吴敬
- 作品数：11 被引量：70H指数：4
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- 相关领域：医药卫生化学工程生物学更多>>
- 重组L-天冬酰胺酶的鉴定被引量：3
- 2000年
- 目的 :对重组L 天冬酰胺酶进行鉴定。方法 :用基因测序、氨基酸组成分析、N 末端氨基酸测序、胰肽图谱、IEF、分子量、紫外扫描等各种实验手段对重组L 天冬酰胺酶及其天然品进行了全面比较。结果 :重组产品与天然品具有同质性。结论 :重组L 天冬酰胺酶具有较好的应用前景。
- 吴敬吴梧桐赖龙生刘景晶
- 关键词：L-天冬酰胺酶基因测序氨基酸
- 重组天门冬酰胺酶Ⅱ纯化过程的毛细管电泳监测法
- 2000年
- 目的建立重组天门冬酰胺酶Ⅱ纯化过程质量监控的方法。方法用高效毛细管区带电泳法监 测 Ｌ－天门冬酰胺酶的纯化过程。经优化的电泳条件为：４５ｃｍｘ５０ｕｍ ｉ．ｄ．石英毛细管（有效长度为 ３７．５ｃｍ），检测波 长 ２１４ｎｍ，分离电压 １２ｋＶ，压差迸样 １０ｓ，恒温 １３℃，分离介质为 ｐＨ７．０的 ８０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸钠缓冲液。实测了 ６批样品 的纯度，用于各纯化步骤的质量监控。结果该方法简单、快速，尤其适合于重组蛋白的质量控制。结论毛细管 区带电泳法（ＣＺＥ），可以用于对Ｌ－天门冬酰胺酶的纯化过程的质量监控，还可用于半成品和成品的质量控制。
- 张晓丹周国华古卓良吴敬
- 关键词：毛细管区带电泳纯化
- 重组大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ中残余DNA的检测
- 2000年
- 用地高辛标记工程菌DNA片断作探针 ,通过分子杂交和免疫显色检测重组天冬酰胺酶半成品中的残余DNA。该法对半成品用氯仿抽提 ,消除了蛋白质对DNA测定的干扰。 3批重组门冬酰胺酶半成品的测定结果表明 ,其残余DNA均小于 10 0 pg/剂量。
- 吴敬房德兴吴梧桐刘景晶
- 关键词：残余DNA
- 重组L-门冬酰胺酶Ⅱ的提取纯化工艺被引量：14
- 2000年
- 采用渗透振扰破壁法、硫酸铵分级沉淀、乙醇分级沉淀、DEAE-纤维素层析等步骤提取和纯化重组L-门冬酰胺酶,并优化了提纯过程的条件,提取总回收率高于50%,产品纯度经高效毛细管电泳检测为单一峰,具有工业生产前景。
- 吴敬赖龙生刘景晶吴梧桐
- 关键词：纯化
- 衣康酸高产菌株的培养被引量：3
- 1997年
- 用正交试验法确定 Aspergillus terreus W17菌株的较佳培养基条件 ,并优化了其发酵工艺。该菌株以蔗糖为底物 ,含糖为 8%时 ,发酵液衣康酸产率为 5.2 1g/10 0 ml,转化率为供糖的6.5%。同时 ,研究不灭菌和利用游离的菌丝体反复发酵产衣康酸的情况。发酵液提取的衣康酸与标准衣康酸进行液相色谱分析测定 。
- 吴敬吴梧桐
- 关键词：药物衣康酸亚甲基丁二酸
- 重组L-天冬酰胺酶Ⅱ及其抗原表位的研究
- L-天冬酰胺酶一种重要的抗肿瘤药物,广泛应用于治疗白血病和淋巴肉瘤.近年来,我们首先将基因工程技术应用于L-天冬酰胺酶的生产,于1995年构建了高效表达L-天冬酰胺酶Ⅱ的基因工程菌E.coliPKA/CPU210009....
- 吴敬
- 关键词：B细胞表位基因工程菌
- L-天冬酰胺酶B细胞表位研究被引量：4
- 2002年
- 采用ELISA竞争抑制法和光学干涉生物传感器试验对预测的7个段肽进行抗原性鉴定。结果表明7段合成肽中,f（192TPARKHTS199）和g（280AKNGTA286）肽段抗原性较强。研究探索了光学干涉生物传感器在B细胞表位研究中的应用,为进一步抗原位点精细定位打下良好的实验基础。
- 吴敬吴梧桐王德育蒋笃孝袁春伟
- 关键词：L-天冬酰胺酶ELISA
- L-天冬酰胺酶Ⅱ基因工程菌的培养被引量：8
- 1999年
- 为提高L 天冬酰胺酶Ⅱ基因工程菌EscherichiacolipKA/CPU2 10 0 0 9的产酶量 ,采用正交试验法确定了较佳培养条件 ,并优化了发酵工艺。工程菌摇瓶产酶稳定在 190U/ml。 2 5L发酵罐产酶亦高达 180U/ml,发酵周期大大缩短 ,仅 9～ 10h。产酶量比原工艺提高 1倍以上 ,具有较好的工业生产前景。
- 赖龙生吴敬翟源吴梧桐刘景晶
- 关键词：基因工程菌发酵
- 重组L-天冬酰胺酶Ⅱ的中试工艺及其性质的研究被引量：10
- 2000年
- 目的 :通过重组L 天冬酰胺酶Ⅱ中试工艺及其性质的研究 ,旨在获得大量的高纯度产品。方法 :采用 5 0 0L发酵罐发酵 ,对所获得菌体进一步提取纯化 ,产品用还原SDS PAGE(十二烷基硫酸钠 聚丙酰胺凝胶电泳法 ) ,HPLC测定纯度 ,质谱和等电聚焦电泳分别测相对分子质量、等电点 ,并进行了紫外扫描。结果 :发酵液产酶活力达到 2 0 0U·mg-1,提取回收率为80 % ,纯化总回收率为 5 7% ,产品比活为 2 2 0U·ml-1,电泳 30 μg上样量显示一条带 ,HPLC测纯度大于 95 %。该酶Mr为13835 6 ,pI为 4.85 ,紫外最大吸收值在 2 78nm处。 结论 :本研究对实现重组L 天冬酰胺酶Ⅱ的工业化生产有重要意义。
- 吴敬吴梧桐赖龙生刘景晶
- 关键词：SDS-PAGE中试工艺
- B细胞蛋白质抗原表位的研究方法进展被引量：35
- 2000年
- B细胞抗原表位的研究对于免疫识别基础理论和实际应用有积极意义。
- 吴敬吴梧桐
- 关键词：B细胞抗原表位酶法
