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周先碗: 作品数：17 被引量：154H指数：6; 供职机构：北京大学生命科学学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划“九五”国家科技攻关计划更多>>; 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>

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大豆蛋白酶抑制剂的提取及其性质研究被引量：5: 2008年; 蛋白酶抑制剂（Protease Inhibitor）是一类对蛋白酶有抑制作用的多肽或蛋白质，对于生物体内许多重要的生理功能具有调节作用。蛋白酶抑制剂广泛存在于动、植物和微生物中，在豆类植物的储藏器官，特别是种子中含量丰富。在大豆种子中其含量可达总蛋白的6％-8％。且大豆中蛋白酶抑制剂的活性最高。探讨从大豆中提取、分离蛋白酶抑制剂的方法，并对其性质进行初步研究。首先将大豆浸泡液分别通过阴离子和阳离子交换柱层析分离，对获得的各组分进行活性测定、SDS-凝胶电泳和等电聚焦电泳分析。结果显示：最高的组分比活在15000U·mg^-1左右、相对分子质量在21000D左右、等电点在4．55左右。; 田军魏志魁周先碗; 关键词：大豆胰蛋白酶抑制剂等电聚焦电泳

睾酮对大鼠肝脏金属硫蛋白诱导合成的作用被引量：3: 2001年; 本研究主要观察了睾酮对大鼠肝脏金属硫蛋白 (Metallothionein ,MT)诱导合成的作用 ,并动态观察了不同锌营养状态的大鼠在急性力竭运动后的恢复期中 ,肝脏金属硫蛋白诱导合成和锌、铜、铁离子含量的变化 ,探讨了它们之间的关系。结果显示 :大鼠皮下注射睾酮能够刺激诱导肝脏MT的合成。锌缺乏引起安静状态下大鼠肝脏MT含量下降 ,MT下降的原因可能与睾酮低下和锌离子减少有关。睾酮可能是MT在体内的正向调节因子。营养性锌缺乏不仅引起大鼠肝脏MT和锌基础水平的下降 ,而且导致急性力竭游泳后肝脏MT峰值较晚出现。这表明锌缺乏造成MT对运动的应激能力和合成速率下降 ,这将不利于运动后自由基的清除和组织的恢复。不管大鼠的锌营养状态如何 ,力竭游泳后 ,肝脏锌、铜、铁的含量均出现不同程度的升高或升高趋势。这些金属离子的升高和再分布 ,可能与MT的升高有关。; 艾华周先碗茹炳根吴玉珍陈志民刘晓鹏陈吉棣; 关键词：金属硫蛋白睾酮金属离子锌缺乏急性运动

人尿激酶原在大肠杆菌中表达的研究被引量：5: 2000年; 用限制性内切酶将人尿激酶原cDNA酶切成一系列基因片段 ,并分别在大肠杆菌中表达。发现其中 1个富含大肠杆菌稀有密码子AGG(精氨酸 )的片段表达量低 ,成为人尿激酶原cD NA在E .coli中高效表达的限制因素。将富含AGG(精氨酸 )的片段在E .coliBL2 1 CodonPlusTM RIL中表达 ,通过该菌株引入dnaY基因 (即tRNAagg/aga(Arg) )使该片段的表达量提高了 10倍。最后用同样的方法提高全长人尿激酶原cDNA在大肠杆菌中的表达量 ,使其表达量达到全菌蛋白的5%。; 王涛周先碗胡美浩; 关键词：尿激酶原大肠杆菌稀有密码子

昆虫谷胱甘肽S-转移酶分离纯化的新方法被引量：20: 1999年; 谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳ－ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓ，ＧＳＴ）是一类具有多种生理功能的同功酶．从蜡螟幼虫（Ｇａｌｅｒｉａｍｅｌｏｎｅｌａ）的提取液中分离纯化谷胱甘肽Ｓ－转移酶的基本方法如下：首先将冷冻的蜡螟幼虫在磷酸缓冲液中匀桨，经１００００ｇ和１０００００ｇ分级离心；取上清液通过ＱＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５离子交换柱层析除去部分色素和杂蛋白；然后采用谷胱甘肽－琼脂糖凝胶亲和层析（ＧＳＨ－ＱＴ４），四溴酚酞二磺酸盐－琼脂糖凝胶亲和层析（ＢＳＰ－ＱＴ４），铜离子－琼脂糖凝胶螯合层析（Ｃｕ２＋－ＱＴ４）及ＰＢＥ９４－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（ＰＢＥ９４）聚焦层析等层析技术进一步分离纯化．将上述方法获得的色谱峰以ＣＤＮＢ和ＤＣＮＢ为底物检测生物活性．具有生物活性部分的蛋白质，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其分子量．实验结果表明，采用ＧＳＨ－ＱＴ４亲和层析法获得的活性峰，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱上呈现出两条带，分子量为２４ｋＤ，２４．５ｋＤ左右；Ｃｕ２＋－ＱＴ６螯合层析法分离的活性峰，呈现出一条带，分子量为２４ｋＤ左右；ＰＢＥ９４－聚焦层析法分离获得三个活性峰：第一色谱峰，呈现出一条带，分子量为２３ｋＤ左右?; 周先碗; 关键词：谷胱甘肽S 转移酶

甘薯和花生胰蛋白酶抑制剂的初步研究被引量：3: 2009年; 许多植物蛋白制成品均含有抑制动物消化的蛋白酶抑制剂。目前已从某些豆类及蔬菜种子中分离出多种对胰蛋白酶具有抑制作用的活性物质。该实验以花生、甘薯等为原料,通过DEAE-Sepharose4BFF阴离子交换柱层析分离胰蛋白酶抑制剂,以N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)为底物测定其对胰蛋白酶的抑制活性;将具有抑制活性的组分通过SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量(Mr);以聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定蛋白质等电点(pI)。结果显示,甘薯中至少有4种胰蛋白酶抑制剂组分,相对分子质量为20～25kD、等电点在pH5.0～6.6之间;花生中至少有三种胰蛋白酶抑制剂组分,相对分子质量为30～70kD、等电点在pH5.0～5.8之间。; 田军苏昌茂周先碗; 关键词：胰蛋白酶抑制剂等电聚焦电泳底物

酶降解法精制肝素钠被引量：2: 1999年; 肝素钠在哺乳动物的脏器和体液如：肝、肺、脾及胃肠粘膜等中含量很高．肝素钠作为一种有效的抗凝剂已广泛应用于临床，生物学功能在于阻止血液中凝血酶的作用．其衍生物还具有降血脂、消炎、抗过敏、利尿及调节免疫功能等多种用途．肝素钠属于多糖类化合物，作为溶栓类药...; 周先碗何伟; 关键词：肝素钠纯化

颤藻对6种抗生素敏感性的研究被引量：6: 2000年; Shang Xun, Dai Jixun, Han Baoqin, Ru Binggen, Zhou Xianwan ( Marine Life Sciences College, Ocean University of Qingdao, Qingdao 266003 College of Life and Sciences, Peking University,Beijing 100871); 尚迅戴继勋韩宝芹茹炳根周先碗; 关键词：颤藻敏感性蓝藻青霉素链霉素红霉素

不同锌营养对急性运动诱导的大鼠金属硫蛋白合成和金属离子代谢的影响: 研究表明,营养性锌缺乏可以引起运动能力的降低,还可以导致机体组织器官中金属硫蛋白(metallothionein,MT)的降低。MT具有多种功能,参与金属离子的吸收、储存、运输和代谢,重金属的解毒,参与机体对各种应激的反...; 艾华周先碗茹炳根吴玉珍陈志民刘晓鹏陈吉棣; 文献传递

运动训练对大鼠骨骼肌和肝脏金属硫蛋白诱导和金属离子代谢的影响被引量：12: 2000年; 观察了耐力游泳训练对大鼠骨骼肌和肝脏金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，ＭＴ）诱导性的影响，以及训练大鼠力竭性游泳后，ＭＴ和锌、铜、铁、锰、钙、镁等金属离子含量的动态变化，探讨了它们之间的关系。结果显示：耐力性游泳训练可使大鼠骨骼肌和肝脏ＷＴ的基础水平升高。训练大鼠力竭性游泳后，骨骼肌和肝脏中诱导合成的ＷＴ的峰值提前出现，表明运动训练可加快ＭＴ的诱导合成。ＷＴ较高的基础水平和快速的诱导合成，可能是训练促进运动恢复的生理机制之一。训练大鼠力竭性游泳后，骨骼肌锌、铜、锰和肝脏锌、铜、锰、铁的变化趋势与ＷＴ的变化趋势较为一致，表明ＷＴ可能参与了这些金属离子的代谢。ＷＴ可能通过调节金属离子代谢，在机体的运动恢复中发挥重要作用。; 艾华周先碗茹炳根吴玉珍陈志民刘晓鹏陈吉棣; 关键词：金属硫蛋白金属离子骨骼肌肝脏

谷胱甘肽转硫酶酶促动力学实验设计被引量：11: 2002年; 酶学研究是生物化学的重要组成部分,本文介绍了一组酶促动力学实验:亲和层析法对谷胱甘肽转硫酶进行分离纯化,并测定该酶活性,米氏常数Km值及最大反应速度Vm值,测定酶蛋白含量计算酶的比活性.该实验适用于生物学专业本科生的酶学实验训练,获得了良好的教学效果.; 胡晓倩陈雅蕙邓爱平周先碗; 关键词：生物化学酶促动力学酶活性米氏常数谷胱甘肽转硫酶

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