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周长辉: 作品数：11 被引量：31H指数：3; 供职机构：郑州大学生物工程系更多>>; 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金河南省高校青年骨干教师资助项目更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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辐射诱导IRM-2小鼠造血细胞功能变化: 目的IRM-2小鼠由本所自主培育的具有辐射抗性的纯系小鼠,父系是615小鼠,母系是ICR/JCL小鼠。本项研究观察IRM-2小鼠照射后造血免疫细胞功能的改变,并与ICR和615小鼠进行比较。方法外周血及股骨有核细胞计数;...; 李德冠王成春周长辉关方霞赵永成刘强王宏杜丽清孟爱民吴红英王月英路璐王小春张恒王彦褚丽萍张俊玲; 关键词：骨髓细胞

经血源性子宫内膜间充质干细胞的分离、培养与鉴定被引量：14: 2010年; 背景:目前用于干细胞研究的主要来源为胚胎干细胞和骨髓干细胞,但这两种来源都存在着部分局限性,因此需要寻找一种新型的干细胞以克服肿瘤形成的潜在性、标本来源的缺乏及伦理学的争议等弊端。目的:分离培养经血源性子宫内膜间充质干细胞并进行鉴定。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离出人经血源性子宫内膜间充质干细胞,对细胞的形态及生长特性进行观察;采用流式细胞仪对细胞表面抗原CD29、CD44、CD34、CD45、HLA-ABC及HLA-DR进行表型鉴定;免疫细胞化学法测定经血源性子宫内膜间充质干细胞中nestin阳性细胞表达。结果与结论:应用Ficoll密度梯度离心法可以从女性月经血中分离培养出干细胞,约2周原代细胞达到80%～90%融合,细胞呈漩涡状、网状、辐射状。传代后能稳定生长,可见纤维样细胞形态为主导。流式检测结果显示,经血源性子宫内膜间充质干细胞表现出CD29强阳性,CD44阳性,CD34、CD45、HLA-DR阴性,低表达HLA-ABC。染色显示nestin抗原在经血源性子宫内膜间充质干细胞中有表达,约占经血源性子宫内膜间充质干细胞的(10.35±0.51)%。结果表明经血源性子宫内膜间充质干细胞表达间充质干细胞的标记物,具低免疫源性;经血源性子宫内膜间充质干细胞表达nestin抗原,为经血源性子宫内膜间充质干细胞在神经系统应用提供一定的理论依据。; 周云帆杨波胡祥焦洪亮周长辉田毅雷宁静谷晨熙许予明戴建武关方霞; 关键词：经血子宫内膜间充质干细胞表型鉴定巢蛋白

p38抑制剂对受照小鼠免疫细胞改变的影响: 研究发现,p38MAPK参与辐射引起的细胞损伤过程.本研究给与受照小鼠p38抑制剂SB203580(SB),观察抑制p38通路对辐射诱导的免疫细胞功能改变的影响,并探讨与GSF的联合作用.方法 C57BL/6小鼠分为对照...; 李德冠王成春周长辉关方霞赵永成刘强王宏杜丽清孟爱民王小春王彦路璐吴红英王月英张恒褚丽萍张俊玲; 关键词：外周血

人羊膜间充质干细胞静脉移植治疗转基因APP^+小鼠的机制被引量：3: 2010年; 背景:研究发现APP基因与阿尔茨海默病发病密切相关。课题组前期实验发现人羊膜间充质干细胞静脉移植可以促进阿尔茨海默病APP+转基因小鼠的学习,记忆能力改善。目的:探讨人羊膜间充质干细胞尾静脉移植后,能否归巢到小鼠脑组织中,并分化为相关的中枢神经细胞,治疗阿尔茨海默病。方法:无菌条件下体外分离培养人羊膜间充质干细胞,传至第3代将细胞浓度调整为1×109L-1,经尾静脉注入0.5mL至细胞移植组转APP+基因小鼠体内;对照组经尾静脉注入同体积的生理盐水;正常组转APP-基因小鼠不给予任何干预措施。采用免疫组化方法检测、测定Brdu标记的人第3代羊膜间充质干细胞在小鼠脑组织中的表达,各组小鼠脑组织中GFAP、Nestin和NSE的表达。结果与结论:光镜下观察可见,移植组小鼠脑组织中大部分细胞核被染成蓝色,但有一些细胞核被染成棕色或褐色,Brdu呈阳性。与对照组相比,移植组小鼠脑组织中的GFAP增加了近4倍,表达显著增加,甚至超过正常组的表达(P<0.05);Nestin的表达则显著升高,增加了近10%,但是还比正常组低了近20%(P<0.05)。NSE的表达降低了近1/3,但仍高于正常组(P<0.05)。表明人羊膜间充质干细胞尾静脉移植治疗阿尔茨海默病可能是通过羊膜间充质干细胞归巢到转基因APP+小鼠脑组织中,并分化成中枢神经细胞的途径实现的。; 王成春杨波关方霞李国栋周长辉周云帆胡祥谷晨熙雷宁静; 关键词：人羊膜间充质干细胞巢蛋白神经元特异性烯醇化酶

人脐带沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞的共培养被引量：2: 2010年; 背景:人脐带沃顿胶间充质干细胞满足了国际细胞治疗协会规定的间充质干细胞的特点,能够向骨、软骨、脂肪、肌肉、神经细胞诱导分化并支持其他干细胞的扩增,对免疫系统有良好的耐受性,对肿瘤有定向迁徙性。目的:观察人脐带沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞体外共培养后,脑肿瘤干细胞的生物学变化。方法:以原位法培养人脐带沃顿胶间充质干细胞,以酶消化法培养人脑肿瘤组织脑肿瘤干细胞,以细胞传代法获取第3代细胞。应用不添加任何生长因子的无血清培养基将两种细胞在24孔板中进行直接共培养。第3,7天应用流式细胞术检测细胞CD133表达;应用免疫荧光法检测贴壁细胞巢蛋白和胶质纤维酸性蛋白表达;将第3天离心所得的共培养上清液重悬第3代脑肿瘤干细胞并与正常培养悬浮的第3代脑肿瘤干细胞置入96孔板中,应用酶标仪检测两组细胞生长曲线的差异。结果与结论:两种细胞共培养后在倒置显微镜下可见脑肿瘤干细胞球随着培养时间的增加出现分解、贴壁、分化现象;贴壁的脑肿瘤干细胞免疫荧光染色胶质纤维酸性蛋白和巢蛋白均阳性。恶性程度高的脑肿瘤组织培养的脑肿瘤干细胞表达CD133量越高,而与沃顿胶间充质干细胞共培养后随着时间的变化均出现CD133表达量降低。共培养3d的上清液培养的脑肿瘤干细胞与正常培养基培养的脑肿瘤干细胞相比,增殖明显受到抑制。结果显示沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞体外共培养后可限制脑肿瘤干细胞表面标记物CD133的阳性率以及细胞增殖能力并促使其分化。; 田毅关方霞胡祥杨波杜英周长辉巴云涛谷晨熙雷宁静王晓薇; 关键词：共培养脑肿瘤干细胞 CD133 人脐带

经血源性间充质干细胞分离培养及其免疫调节作用: 本发明公开了一种经血源性间充质干细胞(ERCs)分离培养及其免疫调节作用。本发明采用密度梯度离心法从经血中成功分离出ERCs，并对其特异性表面标记及增殖活力进行了检测，建立了该细胞稳定的培养方法，由于来源广泛，取材方便，...; 关方霞周长辉杨波周云帆田毅谷晨熙戴建武; 文献传递

P38抑制剂SB203580对小鼠辐射致死效应和小肠损伤的保护作用被引量：5: 2011年; 本研究主要观察p38抑制剂SB203580对小鼠辐射致死效应和小肠损伤的保护作用。在小鼠辐射致死效应实验中,随机分为对照组、照射组和照射给药组。对照组给予假照射,其他两组接受7.2Gy照射,照射给药组在照射前0.5 h腹腔注射给药,以后隔天给药(共5次),观察小鼠30天生存率。小肠损伤保护实验中分组和照射剂量相同。24 h后处死小鼠并取小肠组织进行HE及免疫组化染色。结果显示,照射给药组小鼠30天生存率比照射组提高40%。与照射组相比,照射给药组的小肠隐窝细胞p-p38、p53表达下降,凋亡细胞数量下降,Ki67表达升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结果表明,SB203580特异性抑制全身照射小鼠小肠隐窝细胞p38激活及p53表达升高,小肠隐窝细胞凋亡减少,增殖能力提高,30天小鼠生存率提高。提示SB203580对小鼠辐射致死效应和小肠损伤有一定保护作用,p38通路在辐射致死效应和辐射诱导小肠上皮细胞损伤中起着一定的作用。; 常建辉张恒关方霞王月英李德冠吴红英王成春周长辉翟志斌路璐王小春侯琦孟爱民; 关键词：SB203580 生存率细胞凋亡 P38通路

PUMA作为细胞保护和肿瘤治疗靶点的研究进展被引量：3: 2010年; PUMA(p53 up-regulated modulator of apoptosis)是Bcl-2蛋白家族的促凋亡成员之一,具有强大的促凋亡作用。研究发现PUMA表达水平的降低与肿瘤的发生密切相关,上调PUMA在肿瘤细胞中的表达可以增强肿瘤细胞对放化疗的敏感性。PUMA的缺失可以有效降低由放、化疗引起的正常组织损伤。该文简要综述了PUMA在肿瘤治疗以及在放化疗引起的正常组织损伤中的作用进展。; 周长辉关方霞常建辉孟爱民; 关键词：PUMA 肿瘤干细胞靶点细胞保护

人脐带沃顿胶间充质干细胞对人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用被引量：3: 2010年; 背景:骨髓源性间充质干细胞具有低免疫原性和免疫调节作用,但有关人脐带沃顿胶间充质干细胞的免疫调节作用及其机制研究较少。目的:观察脐带沃顿胶间充质干细胞对异体外周血T淋巴细胞的免疫调节作用及机制。方法:从人脐带沃顿胶组织块培养中分离出间充质干细胞。将脐带沃顿胶间充质干细胞及脐带沃顿胶间充质干细胞培养上清分别与植物凝集素刺激下的人外周血T淋巴细胞共培养,多功能酶标仪测量脐带沃顿胶间充质干细胞及脐带沃顿胶间充质干细胞培养上清与植物凝集素刺激下的人外周血T淋巴细胞共培养72h后A值;ELISA试剂盒检测培养上清中转化生长因子β1、γ-干扰素的表达。结果与结论:沃顿胶间充质干细胞对植物凝集素刺激下的T淋巴细胞增殖有抑制作用,增殖抑制率为56%(P<0.01),沃顿胶间充质干细胞培养上清对植物凝集素刺激下的T淋巴细胞增殖也具有抑制作用,且这种抑制呈剂量依赖性。含50%沃顿胶间充质干细胞培养上清组和100%培养上清组的增殖抑制率分别为8.3%、27%(P<0.05);沃顿胶间充质干细胞能显著降低T淋巴细胞分泌的γ-干扰素(P<0.05);可分泌转化生长因子β1,沃顿胶间充质干细胞与T淋巴细胞共培养组的转化生长因子β1分泌量低于沃顿胶间充质干细胞单独培养组(P<0.05)。提示沃顿胶间充质干细胞及沃顿胶间充质干细胞培养上清对植物凝集素刺激下的T淋巴细胞增殖均有抑制作用,其作用机制可能与细胞间的接触及抑制T淋巴细胞分泌的γ-干扰素有关。; 周长辉田毅杨波胡祥焦红亮周云帆王成春谷晨熙雷宁静关方霞; 关键词：T淋巴细胞免疫调节 Γ-干扰素转化生长因子Β1

p38抑制剂对受照小鼠骨髓抑制保护作用的观察: 研究发现,p38MAPK参与辐射引起的骨髓细胞损伤过程.本研究给与受照小鼠p38抑制剂SB203580(SB),观察抑制p38通路对辐射诱导的骨髓抑制的治疗作用,并探讨与GSF的联合作用.方法 C57BL/6小鼠分为对照...; 李德冠王彦杜丽清褚丽萍关方霞赵永成刘强孟爱民张俊玲王成春周长辉张恒吴红英王月英路璐王小春; 关键词：造血细胞

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