孙亚楠
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：天津医科大学基础医学实验教学中心更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- Ox-LDL受体CD36与糖尿病大鼠肾小管损伤的关系被引量：4
- 2016年
- 目的：本研究通过观察糖尿病大鼠肾组织氧化型低密度脂蛋白（ Ox-LDL）受体CD36的表达及Ox-LDL处理大鼠肾小管NRK-52E细胞后的CD36表达变化,探讨糖尿病肾病进展过程中CD36与肾小管损伤、肾纤维化的关系。方法高糖高脂联合小剂量链脲佐菌素诱导建立糖尿病合并高脂血症大鼠模型,切取肾脏用于CD36表达的免疫组化分析,同时对肾组织硬化及纤维化指标进行半定量评定。50 mg/L OxLDL分别处理NRK-52E细胞5、10、24和48 h或100和150 mg/L的OxLDL处理NRK-52E细胞2、3 d后后收集细胞,Western印迹法检测CD36蛋白水平。结果与对照组比较,糖尿病组大鼠肾组织中CD36表达明显升高,CD36主要表达在肾小管。糖尿病组肾小管损伤分数（STI）明显高于对照组（5.54±1.5 对0.65±0.15,P＆lt;0.05）。 OxLDL呈剂量时间依赖性地刺激肾小管NRK-52E细胞CD36的表达。结论 CD36在糖尿病大鼠肾小管的表达明显增高,并与STI一致,OxLDL增加肾小管NRK-52E细胞CD36的表达,提示Ox-LDL受体CD36表达可能与实验性糖尿病大鼠的肾小管损伤存在关联。
- 龙香菊孙亚楠刘喆闫铁昆赵伟贾俊亚吴晓明杜玮林珊张宏
- 关键词：肾小管氧化型低密度脂蛋白CD36
- 衔接蛋白p66^(Shc) CH2结构域分泌表达载体的构建及其表达
- 2012年
- 目的:构建可以产生分泌p66ShcCH2结构域重组蛋白的质粒,期望进一步研究p66Shc的功能。方法:利用定点诱变的方法在pDisplay中去除HA和Myc表达序列,但保留小鼠Igκ信号肽和PDGFR跨膜结构域。在小鼠Igκ信号肽后是外源CH2结构域、凝血因子Xa识别位点和Flag序列,与PDGFR跨膜结构域形成融合基因。PCR扩增得到完整表达片段后用于慢病毒载体上的克隆,之后在包装细胞Fx293中产生重组慢病毒用于后续实验。结果:经测序证实所构建的质粒序列与预期序列一致,酶切和PCR验证质粒构建正确,体外感染细胞后产生重组蛋白。结论:成功构建体外可以产生p66ShcCH2结构域的慢病毒载体,为体外产生重组分泌的CH2多肽和体外鉴定与p66ShcCH2结构域结合的蛋白分子实验奠定基础。
- 薛珊珊杜玮孙亚楠李西川马振毅
- 关键词：P66SHC分泌蛋白
- 在A549细胞中靶向p66^(Shc)shRNA的沉默效应被引量：3
- 2012年
- 目的:在人非小细胞肺癌细胞A549细胞中探讨shRNA靶向慢病毒对信号衔接蛋白p66Shc的沉默效应,以更好地研究p66Shc的功能。方法:半定量RT-PCR和Western blot检测p66Shc下调后的变化情况,BrdU标记实验检测细胞的增殖变化情况。结果:在A549细胞中,运用p66Shc-shRNA干扰可以实现p66Shc在mRNA和蛋白水平的下调作用,同时发现A549细胞的增殖显著降低。结论:经过慢病毒载体介导的p66Shc-shRNA在人非小细胞肺癌A549中可获得高效转染效果,并能产生特异性的基因沉默效应,而且对细胞的增殖有显著的抑制作用,为进一步研究p66Shc功能提供了实验手段。
- 陈娜王晓洋杜玮孙亚楠李西川马振毅刘喆
- 关键词：P66SHCSHRNA基因沉默
