孙洋
- 作品数：7 被引量：25H指数：3
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家教育部“211”工程河南省医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转化生长因子β1与食管鳞状细胞癌上皮间质转化的关系被引量：6
- 2008年
- 目的探讨食管鳞状细胞癌中转化生长因子β1（TGFβ1）与上皮间质转化的关系以及阻断TGFβ1通路对食管鳞状细胞癌上皮间质转化的影响。方法将化学合成的TGFβ1反义寡核苷酸（TGFβ1—ASODN）转染食管鳞状细胞癌细胞株EC9706，采用RT—PCR、免疫细胞化学及流式细胞术检测阻断前后对TGFβ1活性的影响以及对上皮性标志物E—cadherin及间质性标志物波形蛋白表达的影响；观察TGFβ1—ASODN转染前后细胞形态学的变化；采用细胞划痕试验检测TGFβ1—ASODN转染前后细胞迁移能力的变化。结果转染TGFβ1—ASODN可有效的抑制EC9706细胞中TGFβ1的活性，其mRNA（0．25±0．07）及蛋白（35．07％±1．42％）的表达均明显低于转染前mRNA（0．43±0．09）及蛋白（43．57％±1．77％）的水平（Х^2=13．847及x。=84．120，均P〈0．05）；并提高E—cadherin的表达，抑制波形蛋白的表达。转染后E—cadherin mRNA（0．38±0．09）及蛋白（17．13％±1．45％）的表达明显高于转染前mRNA（0．22±0．06）及蛋白（12．53％±1．31％）的水平（Х^2=0．160及Х^2=40．008，均P〈0．05）；波形蛋白mRNA（0．73±0．07）及蛋白（14．15％±1．46％）的表达低于转染前mRNA（0．89±0．09）及蛋白（17．97％±1．42％）水平（Х^2=0．160及Х^2=21．103，均P〈0．05）。TGFβ1-ASODN转染可明显抑制细胞的运动能力，转染后细胞迁移距离（0．45±0．05）比转染前（0．81±0．11）明显缩小（Х^2=16．854，P〈0．05）。结论TGFβ1可能参与了食管鳞状细胞癌的上皮间质转化，TGFβ1—ASODN可导致食管鳞状细胞癌细胞上皮性标志物E—cadherin表达上调、间质性标志物波形蛋白表达下调、形态发生改变以及细胞移动能力降低，阻断TGFN信号可抑制食管鳞状细胞癌细胞的上皮间质转化。
- 孙洋李珊珊王新华王小军阎爱华
- 关键词：食管肿瘤转化生长因子Β1
- 食管癌组织中缺氧诱导因子-1α蛋白的表达被引量：3
- 2006年
- 目的:检测食管癌组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia induciblefactor1α,HIF1α)的表达。方法:采用免疫组化方法检测100例食管癌及其癌旁正常组织中HIF1α的表达。结果:食管癌组织中HIF1α蛋白的阳性表达率明显高于正常黏膜(90%vs58%,P<0.05),深层浸润组高于浅层浸润组(P<0.05),与食管癌分化程度及淋巴结转移无关。结论:HIF1α的高表达可能与微环境缺氧有关,亦可能与食管癌的癌变及浸润有关。
- 李世栋李珊珊孙洋卢创新阎爱华
- 关键词：食管肿瘤缺氧诱导因子-1Α
- TGF-β1引发的上皮-间质转化与食管鳞癌浸润转移的关系被引量：14
- 2008年
- 目的:探讨食管鳞癌中是否存在TGF-β1引发的EMT,及其与食管鳞癌的浸润转移的关系.方法:选用郑州大学第一附属医院2000-01/2004-12食管鳞癌手术切除标本100例,每例标本均选用癌组织中心及其远端正常黏膜对照.采用免疫组织化学技术检测100例食管鳞癌手术切除标本中的TGF-β1、E-cadherin和Vimentin蛋白的表达.结果:TGF-β1蛋白在食管鳞癌组织中的表达明显高于正常黏膜(85%vs27%,P<0.01),其在深层浸润组中的表达高于浅层浸润组(91%vs75%,P<0.05);E-cadherin蛋白在食管鳞癌组织中的表达明显低于正常黏膜(43%vs85%,P<0.01);Vimentin蛋白在食管鳞癌组织中的表达高于正常黏膜(23%vs0%,P<0.05);食管鳞癌组织中,TGF-β1与E-cadherin表达呈负相关(Tb=-0.257,P=0.013),而与Vimentin表达呈正相关(Tb=0.163,P=0.030),E-cadherin与Vimentin表达呈负相关(Tb=-0.379,P=0.000).结论:食管鳞癌中可能存在TGF-β1引发的EMT,且可能与食管鳞癌的浸润转移有关.
- 张红燕孙洋李珊珊杨建萍阎爱华王新华王小军
- 关键词：上皮-间质转化转化生长因子-Β1食管鳞癌
- NF-κBp65对食管鳞癌细胞上皮间质转化的影响
- 2010年
- 目的:探讨NF-κBp65对食管鳞癌细胞EC9706上皮间质转化的影响。方法:NF-κBp65反义寡核苷酸(NF-κBp65-ASODN)转染食管鳞癌细胞EC9706,采用RT-PCR、免疫细胞化学及流式细胞术检测NF-κBp65-ASODN转染前后EC9706细胞中NF-κBp65、上皮性标志物E-cadherin及间质性标志物Vimentin mRNA及蛋白表达的变化,观察转染前后细胞形态学的改变,细胞划痕实验检测转染前后细胞运动能力的变化。结果:转染NF-κBp65-ASODN的EC9706细胞,其NF-κBp65 mRNA(0.14±0.06)及蛋白(免疫细胞化学:11.33±1.40%,流式细胞术:11.78%)的表达低于转染前(mRNA:0.45±0.05;蛋白:免疫细胞化学:17.17±1.66%,流式细胞术:15.76%)(P<0.05),上皮性标志物E-cadherin mRNA(0.36±0.08)及蛋白(免疫细胞化学:17.58±1.86%,流式细胞术:14.98%)的表达高于转染前(mRNA:0.22±0.06;蛋白:免疫细胞化学:14.42±1.63%,流式细胞术:12.22%)(P<0.05),间质性标志物Vimentin mRNA(0.75±0.07)及蛋白(免疫细胞化学:16.00±1.41%,流式细胞术:12.90%)的表达低于转染前(mRNA:0.89±0.09;蛋白:免疫细胞化学:19.50±0.89%,流式细胞术:17.76%)(P<0.05)。转染NF-κBp65-ASODN后,EC9706细胞形态发生改变,细胞迁移距离(0.45±0.08)较转染前(0.81±0.11)明显缩短(P<0.05)。结论:NF-κBp65可能参与食管鳞状细胞癌的上皮转化。NF-κBp65-ASODN转染可抑制食管鳞癌细胞上皮间质转化,上皮性标志物E-Cadherin表达上调、间质性标志物Vimentin表达下调,且细胞形态发生改变、细胞运动能力降低。
- 张红燕王小军王丰王新华孙洋李珊珊
- 关键词：上皮间质转化NF-ΚBP65食管鳞癌
- TGF-β1反义寡核苷酸对食管鳞癌细胞EC9706增殖及凋亡的影响被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨转染TGF-β1反义寡核苷酸(TGF-β1-ASODN)对食管鳞癌细胞EC9706增殖及凋亡的影响.方法:将化学合成的TGF-β1-ASODN转染食管鳞癌细胞EC9706,采用RT-PCR和流式细胞术检测转染效率;观察TGF-β1-ASODN转染后细胞形态学的改变;采用MTT和流式细胞术检测TGF-β1-ASODN转染后对细胞增殖及凋亡的影响.结果:转染TGF-β1-ASODN可有效抑制EC9706细胞中TGF-β1的活性,其mRNA及蛋白的表达均明显低于转染前的水平(0.25±0.07vs0.43±0.09;35.35%vs41.38%,均P<0.05);TGF-β1-ASODN可明显促进细胞增殖、抑制细胞凋亡,转染后细胞生长拥挤失去正常形态,细胞存活率高于转染前(109.4%vs100.0%,P<0.05),G1期、S期细胞百分比低于转染前,G2期细胞百分比则高于转染前,细胞凋亡率低于转染前(62.9%vs66.5%;21.3%vs23.7%;14.8%vs9.8%;0.69%vs0.96%,均P<0.05).结论:TGF-β1-ASODN可高效特异地将TGF-β1基因沉默,并解除其抑制细胞增殖、阻滞细胞周期、促进细胞凋亡的作用.
- 张红燕李珊珊孙洋王新华阎爱华王小军
- 关键词：食管鳞癌转化生长因子Β1
- 宫颈鳞癌组织中Snail mRNA和蛋白的表达
- 2008年
- 目的:检测宫颈鳞癌组织中Snail mRNA和蛋白的表达。方法:采用免疫组织化学及RT-PCR法,检测宫颈鳞癌组织(n=141、48)、癌旁组织(n=48、48)及正常宫颈组织(n=48、48)中Snail蛋白及mRNA的表达,并分析其与临床病理参数之间的关系。结果:宫颈鳞癌、癌旁组织中Snail mRNA的阳性表达率高于正常组织(P均<0.05),且癌组织中Snail mRNA阳性表达率与淋巴结转移情况有关(P<0.05),但与肿瘤的分化程度、FIGO分期无关(P均>0.05)。3组组织中Snail mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈鳞癌及癌旁组织中Snail蛋白的阳性表达率高于正常宫颈组织(P<0.05),且癌组织中Snail蛋白阳性表达率与分化程度、FIGO分期、淋巴结转移情况有关(P均<0.05)。结论:宫颈鳞癌的癌变、侵袭、转移可能与Snail蛋白及mRNA的高表达有关,Snail可作为预测宫颈鳞癌预后的指标之一。
- 阎爱华孙洋王靖李珊珊王小军
- 关键词：宫颈肿瘤鳞状细胞癌SNAILMRNASNAIL蛋白
- siRNA阻断Stat3信号促进食管鳞癌细胞株凋亡被引量：1
- 2010年
- 目的研究RNA干扰技术沉默Stat3基因对食管鳞癌细胞(EC9706)中持续性激活Stat3信号的阻断作用及对细胞凋亡的影响。方法将化学合成的100nM的Stat3 siRNA转染EC9706细胞,RT-PCR检测转染前后Stat3 mRNA的表达,Western blot检测转染前后细胞中Bcl-2、Stat3及磷酸化Stat3(p-Stat3)蛋白的表达,凝胶电泳迁移率(EMSA)检测转染前后活化Stat3蛋白的DNA结合活性,流式细胞术检测转染前后细胞凋亡的改变情况。结果 Stat3siRNA转染细胞48h后细胞形态发生明显的改变,RT-PCR及Western blot结果显示Stat3 siRNA干扰后Stat3 mRNA及蛋白表达均受到明显抑制,Stat3信号的激活被阻断,活化Stat3蛋白的核结合活性显著下降。转染后细胞中Bcl-2蛋白的表达明显减少。流式细胞术结果证明Stat3 siRNA可明显促进细胞凋亡。结论 Stat3 siRNA能够特异地阻断食管鳞癌细胞中Stat3信号的持续性激活并促进肿瘤细胞凋亡。
- 王新华李珊珊田芳郑献召李道明孙洋
- 关键词：食管鳞癌RNA干扰凋亡
