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碱性成纤维细胞生长因子对β-淀粉样蛋白诱导PC12细胞凋亡的抑制作用被引量：3: 2002年; 目的 :利用体外培养的PC12表现出神经细胞的特性 ,用Aβ2 5-3 5诱导PC12细胞凋亡 ,建立神经细胞毒性作用的模型 ,来探索bFGF对Aβ2 5-3 5作用和治疗老年性痴呆 (AD)的机制。方法 :通过Giema’s、PI染色法、DNA琼脂糖凝胶电泳、Westernblot及流式细胞仪研究了加入Aβ2 5-3 5培养的以及Aβ2 5-3 5和bFGF共培养的PC12细胞的形态和分子生物学改变及凋亡相关基因Bcl- 2 ,Bax表达的变化。结果 :Aβ2 5-3 5可诱导PC12细胞核DNA发生降解 ,出现染色质浓缩成块状、胞浆浓缩、胞膜内陷、凋亡小体形成等 ;而Aβ2 5-3 5和bFGF共培养的PC12细胞则能缓解这种形态学上的变化 ,细胞凋亡率减少 ,Bcl- 2的表达量上调而Bax的表达量下调。结论 :bFGF能抑制Aβ2 5-3 5对神经细胞的毒性作用 ,其机制可能是通过调控Bcl- 2、Bax的表达来实现的。; 朱大明宋照雷孙奋勇杨媛段锐林剑洪岸; 关键词：成纤维细胞生长因子细胞凋亡淀粉样Β蛋白

使用一种新策略在大肠杆菌中高效表达hbFGF(英文)被引量：4: 2002年; 翻译起始区 (TIR)的二级结构是影响翻译效率的决定性因素 ,同时密码子的偏好性问题也是个至关重要的方面。基于以上两点考虑 ,对hbFGF 5’末端 35个碱基进行了改造 ,对其中 4个位点进行了定点突变 ,另有 4个位点进行了随机点突变。这些突变都可能造成TIR二级结构变化。这 4个随机突变共有 32种组合 ,使用RNA结构预测软件DNASISv2 .5对这 32种序列分别模拟其二级结构且计算其自由能 ,并选取了 10条自由能最高的序列。根据这10条序列 ,分别设计引物引入突变 ,克隆至表达载体pET 3c上 ,然后转化宿主菌E .coli,通过诱导表达纯化及生物测活等常规实验方法 ,最后确定有两株为高表达菌株 ,从某种程度上证明了用计算机辅助设计定点突变的方法来优化外源基因在E .coli中的表达是有效且很有潜力的。; 宋照雷潘秋辉汪炬杨媛朱大明陈小佳刘翠兰洪岸; 关键词：翻译起始区计算机辅助分析密码子偏好性 HBFGF 大肠杆菌

E.coli中高效表达外源蛋白的探索及其在纳豆激酶中的应用: 目的：针对目前基因工程发酵生产中一些外源蛋白表达量过低的问题，寻找一种切实可行的方法能高效表达这些外源蛋白。目前基因工程发酵生产的方法一般是按照分子克隆的方法，将一段外源基因克隆到一种表达载体中，然后转化到大肠杆菌中进行...; 宋照雷; 关键词：外源蛋白纳豆激酶大肠杆菌基因工程; 文献传递

大肠杆菌可溶性表达人碱性成纤维细胞生长因子的研究被引量：8: 2003年; 包涵体的形成与外源基因在大肠杆菌中的表达量高度相关 ,在适当的范围内 ,降低hbFGF在表达宿主BL2 1 (DE3)plysS中的表达 ,成为实现高可溶性表达的关键。在不改变氨基酸序列的条件下 ,对hbFGF高表达菌株突变重组子起始密码ATG下游前 3个密码子的摇摆碱基进行随机回复突变 ,共有 7种组合 ,合成引物PCR扩增后 ,克隆至表达载体pET 3c ,将重组子转导BL2 1 (DE3)plysS后 ,IPTG诱导表达 ,发现其中 1株有较高可溶性和活性的菌株。可见部分降低外源蛋白的表达量可以避免与减少包涵体的形成。; 孙晋华洪岸张玲孙奋勇宋照雷; 关键词：大肠杆菌可溶性表达人碱性成纤维细胞生长因子回复突变外源基因

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宋照雷