崔文涛
- 作品数：54 被引量：135H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪FBXL8基因第二内含子的克隆测序及SNP检测
- 以人FBXL8基因的mRNA序列作为信息探针,搜集猪同源基因EST序列,并构建EST重叠群Contig,设计出合适的引物,以湖北通城、大白和长白猪基因组为模板,应用PCR技术克隆测定FBXL8基因的第二内含子序列。序列分...
- 李勇杨述林崔文涛牟玉连唐中林储明星彭克美李奎
- 关键词：克隆测序SNP检测
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- 一种制备同时表达多个基因的转基因动物的方法
- 本发明公开了一种制备同时表达多个基因的转基因动物的方法。本发明还公开了一种制备转基因胚胎的方法，上述制备转基因胚胎的方法，是将植酸酶基因和人粘病毒抗性基因A均导入目的胚胎中，得到转基因胚胎。将转基因胚胎移植到雌性的目的动...
- 李奎鞠辉明樊俊华白立景牟玉莲杨述林唐中林崔文涛
- 文献传递
- 锌指核酸酶介导的猪MSTN基因突变序列及其应用
- 本发明公开了锌指核酸酶介导的猪MSTN基因突变序列及其应用。本发明利用锌指核酸酶技术介导猪的肌肉生成抑制素MSTN基因发生碱基缺失，造成移码突变，导致翻译提前终止无法形成MSTN功能蛋白，并获得了MSTN基因第3781-...
- 崔文涛钱丽丽汤茂学李奎
- 文献传递
- RecA蛋白介导的转基因小鼠制备被引量：3
- 2008年
- 受精卵原核内核酸酶对外源基因的降解是导致显微注射法制备转基因动物效率低的重要原因之一,RecA蛋白可与单链DNA结合而阻止细胞核内核酸酶对单链DNA的降解。本试验建立了显微注射和RecA蛋白结合制备转基因动物的技术模型,并初步探讨了RecA蛋白对显微注射法制备转基因动物效率的影响。以单链DNA、RecA蛋白与单链DNA的复合体以及双链DNA为外源基因进行受精卵原核显微注射转基因试验,分别获得F0代小鼠28、41和32只,并通过PCR和Southern blot进行了转基因鉴定。结果显示,在小鼠受精卵原核显微注射Re-cA+ssDNA复合体获得的F0代中14.6%(6/41)为转基因个体,显微注射dsDNA获得的F0代中转基因个体占6.2%(2/32),而显微注射ssDNA获得的F0代中无一为转基因个体。
- 赵永贞肖邦张兴举唐中林崔文涛杨述林李奎
- 关键词：显微注射SSDNA转基因
- 一种生产猪生长激素的方法及其专用DNA片段
- 本发明公开了一种生产猪生长激素的方法及其专用DNA片段。该DNA片段，是如下1)或2)：1)其核苷酸序列如序列表中序列3的自5’端6-1108位所示；2)其核苷酸序列如序列表中序列3所示。含有上述DNA片段的重组载体也属...
- 鞠辉明白立景李奎崔文涛牟玉莲杨述林唐中林
- 文献传递
- 跨膜蛋白66生物信息学分析及其突变体转基因小鼠构建被引量：2
- 2010年
- 跨膜蛋白66(TMEM66)是与细胞凋亡以及癌症发生密切相关的重要功能基因,为了在个体水平研究其生物学功能,我们进行了TMEM66基因突变体(TMEM66V)转基因小鼠的构建。本研究通过原核注射法进行转基因操作,将获得的312个受精卵移植到13只代孕母鼠中,运用PCR、Southern blotting对出生的小鼠进行转基因鉴定,对于转基因阳性小鼠通过传代试验研究外源基因是否稳定整合,并通过反向PCR方法研究外源基因的整合方式。结果显示在出生的55只小鼠中有6只为转基因阳性,其中3只转基因小鼠可以稳定传代,表明这些小鼠中外源基因发生了稳定整合。反向PCR检测结果发现外源片段是以串联重复的方式整合到转基因小鼠的基因组中。本研究成功构建了TMEM66基因突变体转基因小鼠,为进一步研究TMEM66基因的功能奠定了基础。
- 李新云王趁芳任红艳赵书红杨述林崔文涛牟玉莲李奎
- 关键词：跨膜蛋白转基因小鼠
- 毛囊的周期性变化和分子调控及其在绒山羊上的研究进展被引量：20
- 2009年
- 毛囊是一个形态和结构较为复杂的皮肤附属器官,它控制着毛发的生长,具有自我更新和周期性生长的特点。毛囊的周期性变化依靠毛囊上皮细胞和真皮间充质细胞的相互作用,先是毛囊长出毛干为生长期,接下来是凋亡驱动的退行期,然后进入休止期。其变化过程是一系列信号分子相互作用形成的,包括启动信号、维持毛囊生长的信号及抑制毛囊生长的信号等。绒山羊初级毛囊和次级毛囊在出生后也表现周期性变化,次级毛囊由于光周期的影响而呈很强的季节性的周期变化,而初级毛囊则变化不明显。山羊绒是绒山羊次级毛囊的衍生物,次级毛囊的生长发育直接影响山羊绒的产量和品质。因此,研究皮肤毛囊周期性变化的规律及它们的分子调控机理不仅可揭示毛囊的发育规律而且对绒山羊的育种具有重要指导意义。
- 刘志红任立明郭英胡晓湘崔文涛李宁尹俊李金泉
- 关键词：绒山羊毛囊
- 可遗传与非可遗传构件应用与转基因动物食品安全评价介绍被引量：2
- 2009年
- 近年来基因工程技术不断发展,转基因生物及其产品如雨后春笋般不断涌现,随之而来的转基因食品安全问题也逐渐引起关注和重视。可遗传与非可遗传构件的应用作为生产转基因动物的方法,其存在的潜在风险与巨大的发展前景共存。作者就可遗传与非可遗传构件应用及与转基因动物食品安全评价的关系进行了介绍和讨论,并对其未来的发展做出展望。
- 汪亮崔文涛刘娣李奎
- 关键词：安全评价
- 猪TIMP-2基因克隆、序列特征和表达分析被引量：1
- 2009年
- 本研究分析了五指山试验用小型猪TIMP-2基因的分子特性和可能的生物学功能。将人TIM-P2 mR-NA全长序列在猪ESTs数据库中检索获得同源性较高的ESTs,用电子克隆结合RT-PCR方法克隆获得包含完整CDS区的猪TIMP-2基因cDNA序列,应用生物信息学方法分析了其核苷酸序列及其编码蛋白质分子结构特性,应用RT-PCR研究该基因在猪不同组织和发育时期的特异表达情况。结果,猪TIM-P2 cDNA序列全长790 bp,包括663 bp的完整开放阅读框,编码221个氨基酸。多序列比对和系统进化分析表明,该基因编码蛋白质与人(97%)、大鼠(97%)、小鼠(97%)等物种TIMP-2蛋白质具有较高的同源性。蛋白质序列预测分析发现,猪TIMP-2氨基酸序列理论等电点(pI)为7.65,相对分子质量(MW)为24.5 ku,它包括27AA的前导序列和194AA的成熟肽段,其前导序列比其它物种多1个亮氨酸(Leu)。结构功能预测发现其具有1个在种间高度保守的NTR_TIMP结构域和N端VIRAK保守序列,序列中存在的12个半胱氨酸(Cys)可以形成6对二硫键结构。表达谱分析表明TIMP-2基因在猪的多个组织和不同发育时期的表达量存在较大差异,在睾丸、垂体、胃、大肠、卵巢、子宫和90 d胚胎骨骼肌中高表达;而在心脏、小肠、脑、肝脏、成年猪骨骼肌中表达量极低;在肾脏、胸腺、脾、甲状腺3、3 d胚胎中中度表达。结果表明该基因在发生组织发育和重构活动相对活跃的组织器官和时期表达水平较高,亦符合其固有生物学功能。
- 黄宏刚肖邦任红艳唐中林杨述林崔文涛牟玉莲储明星李奎
- 关键词：TIMP-2电子克隆表达谱
- 利用酵母双杂交系统筛选猪Calsarcin-1基因相互作用蛋白被引量：5
- 2009年
- 【目的】利用酵母双杂交系统研究与猪Calsarcin-1相互作用的蛋白,了解Calsarcin-1在猪骨骼肌纤维类型形成和信号通路的调控功能。【方法】首先用长白猪Calsarcin-1基因构建既无自激活性又无毒性的pGBKT7-CS1诱饵载体;然后从猪的骨骼肌组织样中提取mRNA,利用SMART技术合成并纯化双链cDNA;最后通过酵母双杂交系统的共转化法筛选与Calsarcin-1相互作用的蛋白,在GenBank中比对分析相互作用基因,分析Calsarcin-1在骨骼肌中的功能。【结果】构建了pGBKT7-CS1诱饵载体,获得具有完整3′端的猪骨骼肌单链cDNA,并合成双链cDNA。筛选出4个与Calsarcin-1相互作用的蛋白,经与人的基因比较分析,发现Calsarcin-1与α-1肌动蛋白和α-3辅肌动蛋白互作,与骨骼肌Z线附近结构形成有关;与肌集钙蛋白-1和肌钙蛋白T3互作,影响钙离子的调控。【结论】分析所筛选出的蛋白功能,推测Calsarcin-1通过结合这些蛋白,维持细胞结构的稳定,影响相关蛋白的钙离子结合能力,从而参与钙离子调控;而钙离子浓度的变化将影响到其它控制肌纤维分化的因子,或其它调控通路,共同调节快慢肌纤维的形成与转化。
- 杨锷朱文娟伍晓雄杨述林李奎牟玉莲崔文涛储明星马月辉
- 关键词：骨骼肌酵母双杂交
