张乐
- 作品数:17 被引量:62H指数:5
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- 循环抗原阳性对弓形虫病诊断价值的研究被引量:11
- 1995年
- 应用双抗体ELISA检测弓形虫循环抗原(CAg)阳性者的血液及组织液样本41例,进行病原学对照检查,结果29例检获弓形虫,两者的符合率达70.7%。不同样本中的虫体检出率依次为羊水3/3,乳汁1/1,胚胎组织1/1,脑脊液21/30,血清3/6。另外,对29例疑似中枢神经系统弓形虫病患者,取脑脊液进行不同免疫学指标检测。结果,CAg于发病3d即可测出,总阳性数为26例;IHA抗体于发病5d出现阳性,阳性数为4例;ELIsA一IgM及IgG抗体在发病7d后逐渐出现阳性,阳性数分别为5例和1例。研究结果证实,CAg作为弓形虫早期、急性感染的一个指标,具有重要的诊断学意义。
- 傅翠娥余毅陈彩华杨旭明王蓉张乐丁贞英曾小军刘莉许雪萍张群
- 关键词:弓形虫病循环抗原病原学检查
- 弓形虫抗原的部分理化性质研究被引量:2
- 1997年
- 本文选用RH株弓形虫速落子细胞质、细胞膜和腹水代谢抗原,观察温度、pH值对抗原活性的影响,并分别测定糖及蛋白质含量。结果表明,三种抗原对热处理都较为稳定,但代谢抗原在加热前后的检测效果均不及其它两者。经糖含量测定显示,代谢抗原的糖含量最低。结果提示,弓形虫抗原的重要决定因子可能是糖蛋白或多糖成分。pH值试验表明,细胞质抗原的包被波以pH9.6碳酸盐缓冲液为佳,而细胞膜抗原应选用pH6.5磷酸盐缓冲液。
- 林爱芬傅翠娥余毅杨旭明张乐陈彩华
- 关键词:弓形虫抗原理化性质
- 弓形虫循环抗原诊断试剂盒的研制和应用
- 傅翠娥陈彩华楼涤林爱芬陆绍红陈睿张乐杨纪顺卓敏敏杨旭明
- 该试剂盒由纯化抗弓形虫特异性抗体(多抗)包被的微孔板与多抗酶标记物,配以其他试剂所组成。应用双夹心ELISA一步法原理,检测人血清等样品中的弓形虫循环抗原(CirculatingantigenCAg)。在弓形虫感染的早期...
- 关键词:
- 关键词:弓形虫循环抗原诊断试剂盒酶结合物
- 弓形体抗原的纯化与分析被引量:2
- 1998年
- 对几种提纯弓形体抗原的方法进行了比较。结果,分别经5000r、10000r、15000r/min离心30分钟的粗抗原,用于检测弓形体抗体的P/N值依次为5.05、5.60、6.43。用10000r/min30分钟处理的粗抗原(R10000),经凝胶柱层析分离洗脱,呈现2个蛋白峰(F1、F2),经免疫学测定,其主要的抗原活性部分存在于F1中。R10000抗原用50%硫酸铵沉淀(S50)的蛋白质得率达64%;用70%硫酸铵沉淀(S70)的蛋白质率为35%。R10000与F1、F2、S50、S705个抗原,经ELIB后用高免兔血清识别的条带数:F1和F2各1条、S50Z条、S70和R10000各3条。除F2之外,39~40KD为4种抗原的共同反应区带。用上述5种抗原致敏反应检测弓形体抗体,以S50具有更高的敏感性和特异性。
- 傅翠娥杨旭明林爱芬余毅张乐楼涤陈彩华
- 关键词:凝胶过滤提纯免疫学
- 浙江省1197名供血者弓形体感染的血清学调查被引量:7
- 1996年
- 浙江省1197名供血者弓形体感染的血清学调查310004浙江省杭州市中心血站孟忠华,叶晓惠浙江省医学科学院张乐,林爱芬国内外均有弓形体经输血或器官移植而感染受血者的报道[1,2],亦有在无症状的供血者的血液中找到弓形体,并发现含弓形体的血液经枸橼酸抗...
- 孟忠华叶晓惠张乐林爱芬
- 关键词:供血者弓形体血清学
- 激光对弓形虫速殖子的作用研究被引量:3
- 1999年
- 本实验采用激光致弱弓形虫速殖子接种ICR小鼠腹腔,以期提高小鼠抗弓形虫感染的免疫保护力。结果表明:激光照射能够抑制虫体的繁殖和分裂能力。照射虫体免疫小且能诱导产生持续升高的IgG抗体。免疫民经弓形虫RH株攻击后,其发病和死亡时间延长,表现出部分的保护性免疫力。提示:激光对弓形虫速殖子的作用明显,可望在弓形虫病的治疗和预防中得到应用。
- 林爱芬陈彩华陆绍红陈睿张乐楼涤陆漩辉黄富泉
- 关键词:弓形虫速殖子激光疗法二氧化碳激光
- 弓形虫速殖子抗原组分分析及其免疫反应性的比较研究被引量:8
- 1993年
- 应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、酶联免疫印渍试验(ELIB)和酶联免疫吸附试验(ELISA),对四种不同地理株弓形虫-CN、RH、BH、HH速殖子细胞质、细胞膜和代谢抗原组分及株间抗原差异、免疫反应性进行比较研究。ELIB实验结果:RH株高免兔血清与四株细胞质抗原反应,分别出现10、7、4、6条显色的反应区带,其中在35~38kD处都出现极明显的反应区带;与四株细胞膜抗原反应,分别出现5、6、6、9条显色反应区带,其中在31~35kD处都出现极明显的反应区带;与四株代谢抗原反应,分别出现8、7、6、7条反应区带,其中在50kD处、100~108kD处都有明显反应区带。实验结果提示,高免兔血清与四株12种抗原反应结果所出现的区带存在不同程度差异。ELISA检测免疫比值(P/N)大小比较结果表明,无论是细胞质、细胞膜或代谢抗原,在检测人弓形虫抗体阳性血清时,HH、BH较CN、RH的免疫比值高,株间抗原免疫反应似存在一定差异。
- 陈彩华王蓉傅翠娥余毅杨旭明杨纪顺张乐
- 关键词:弓形体ELISA
- 弓形虫抗血清 IgG 的制备及其检测效果研究
- 2004年
- 目的比较弓形虫不同免疫原所制备抗血清 IgG 的检测效果,优选高效价的抗体诊断试剂。方法制备弓形虫的细胞质抗原(C)、代谢抗原(S)。用抗原 C、C+S、S 及活虫(P)各免疫2只家兔,收集抗血清经纯化而获得 IgG 抗体(多抗)并制备酶标记抗体;用上述4种多抗与对应的多抗-HRP 组合成4种双抗体夹心型 ELISA,检测人血清 CAg 和 C、S 抗原,评价试剂的敏感性;抗血清与疟原虫、隐孢子虫等抗原进行交叉反应性试验,评价试剂的特异性;采用捕获法检测人血清 IgM 抗体,比较4种多抗-HRP 的检测效果。结果各种 ELISA 夹心法同步检测 CAg 阳性标本7例,阴性样本8例,均未出现假阴性和假阳性反应,其 OD 均值的 P/N 比值依次为 C+C 组33.5、S+S 组27.8、CS+CS 组21.2、P+P 组13.2;C 和 S 抗原的最低检出量均为0.5μg/ml;与其它寄生虫未出现交叉反应。4种多抗-HRP 同步检测IgM 抗体阳性标本3例,阴性样本7例,均未出现假阴性和假阳性反应,其 OD 均值的 P/N 值最高的是抗 C-HRP。结论 4种抗体用于检测人血清 IgM 抗体、CAg、C 和 S 抗原以及其它抗原的结果表明,各种抗体试剂均具有良好的敏感性和特异性,其中以抗 C 抗体试剂最为满意。(2)4种组合形式的夹心ELISA,检测弓形虫抗原的差异无统计学意义,表明弓形虫 C 和 S 抗原间存在着共同抗原成分。
- 楼涤陈睿张乐陆绍红林爱芬卓敏敏傅翠娥
- 关键词:ELISA夹心法假阳性反应抗体诊断试剂阳性标本弓形虫抗原S抗原
- 直接PCR法检测血液中伊氏锥虫感染被引量:5
- 2006年
- 为建立伊氏锥虫动基体DNA(KinetoplastDNA,kDNA)的PCR扩增技术,血液直接PCR法检测伊氏锥虫的感染,本文以伊氏锥虫kDNA片段为靶扩增DNA设计引物,确定最适PCR反应条件,建立kDNA片段的PCR扩增技术,应用直接扩增缓冲液(Ampdirect)从感染小鼠的滤纸血标本直接PCR检测伊氏锥虫。结果发现,PCR扩增伊氏锥虫kDNA片段分子量为364bp,能检测的最小DNA量是0·06pg,与布氏锥虫、活动锥虫没有交叉反应。应用直接扩增缓冲液不需进行样本的DNA抽提,直接PCR能检测感染小鼠的早期滤纸血样本,敏感性高于镜检法。本实验建立的直接PCR法检测伊氏锥虫具有较高的敏感性和特异性,方法快捷,可进一步应用于伊氏锥虫病的早期诊断以及现场调查。
- 陆绍红陈睿楼涤张乐张雪娟
- 关键词:伊氏锥虫血液
- 中枢神经系统弓形虫病的快速诊断方法的探讨被引量:4
- 1997年
- 本文取ELISA检测弓形虫循环抗原(CAg)、特异性IgM及IgG抗体阳性者的脑脊液样本13例,作弓形虫的病原学对比检查,个别样本同时进行ELIB分析。结果,CAg与IgM双阳性2例、IgM阳性1例,采用涂片法查见弓形虫;CAg阳性2例、CAg与IgM双阳性1例,经接种分离而获得3株弓形虫;其余7例CAg阴性而IgM阳性或IgM与IgG双阳性的脑脊液样本,均卡检获病原体。1例CAg与病原学均为阳性的脑脊液样本,与弓形虫速落子代谢抗原同步进行ELIB,前者在50kD处出现明显的反应区带,后者分别在50、97和108kD处出现3条反应区带。从而表明,脑脊液中弓形虫CAg检出率与病原阳性率相符合,ELISA—CAg可作为中枢神经系统弓形虫病的快速诊断方法;而ELIB技术,对确定及区别弓形上现症患者,均具进一步探讨的价值。
- 傅翠娥杨纪顺陈彩华张乐林爱芬陈嘉棠庄妮霞陈彤
- 关键词:弓形体病中枢神经疾病脑性瘫痪