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不同胎牛血清对动物细胞体外培养的影响被引量：11: 2009年; 本研究针对血清在细胞库构建中的基础性作用,以中国农业科学院北京畜牧兽医研究所的20枚京星矮脚鸡的7日龄蛋胚为试验材料,利用2种不同的胎牛血清,采用贴壁培养方法,对细胞进行培养、传代及冻存。观察细胞原代及传代后的生长个体数、生长瓶数,细胞形态、冻存前形态及细胞生长曲线。结果表明,不同血清对细胞培养有一定的影响,血清B培养的细胞各方面都优于血清A培养的细胞。本研究结果为细胞体外培养中的血清选择提供了依据。; 吴宏梅刘帅包阿东陆涛峰刘长青张文秀关伟军马月辉; 关键词：血清动物细胞体外培养

不同样品保存液和保存条件对动物细胞体外培养的影响: 2009年; 本研究取矮脚油鸡7日龄胚胎作为试验材料,用MEM、全培养基和PBS3种不同的液体对鸡胚组织进行保存,同时在不同保存温度条件下按不同保存时间梯度,采用组织块贴壁培养法进行体外细胞培养。对细胞的保存液变化,细胞形态、细胞生长等情况进行研究,分析样品保存条件对细胞体外培养和细胞系构建的影响。结果发现,4℃保存的组织块培养效果明显优于室温保存;无论在4℃或常温,基础培养基保存的组织块培养效果明显优于保存液,全培养基效果最好。常温保存48h以内3种保存液培养效果差别甚微,48h后培养效果均急剧下降,96h后保存在PBS中的组织失活,未长出细胞。本研究结果为建立细胞系采集样品的保存提供了一定的参考。; 吴宏梅娜日苏刘帅陆涛峰包阿东张文秀关伟军马月辉; 关键词：动物细胞体外培养

畜禽体外培养细胞生长规律研究被引量：4: 2008年; 本研究利用组织块贴壁培养法对鲁西黄牛、蒙古马、北京鸭和狼山鸡等4个品种体外培养细胞的生长、分化规律进行了研究。通过绘制其生长曲线和在激光共聚焦显微镜下拍摄细胞生长过程,初步分析成纤维细胞的生长、分化规律。试验结果表明,4个品种的细胞生长曲线均呈明显的"S"形,家畜和家禽的细胞潜伏期和停滞期的长短以及细胞群体倍增时间均有明显差异,蒙古马和狼山鸡体外培养细胞的单个细胞分裂期也有显著差异,蒙古马为97 min,而狼山鸡为85 min。本试验构建的4个品种成纤维细胞系不仅使畜禽遗传资源在细胞水平永久保存下来,而且为分子生物学研究提供宝贵材料。; 陆涛峰刘长青吴宏梅张艳艳刘帅包阿东张文秀关伟军马月辉; 关键词：畜禽成纤维细胞

北京油鸡羊膜上皮细胞的分离、培养及分化潜能的研究被引量：2: 2013年; 旨在研究禽类胚胎羊膜上皮细胞的分离、培养、鉴定及向不同胚层细胞诱导分化等的生物学特性。本研究使用酶消化法从北京油鸡胎膜中分离羊膜上皮细胞,通过免疫荧光和RT-PCR方法鉴定羊膜上皮细胞标志物(Nanog、Oct-4、Sox-2、CK19和Vimentin),并诱导其向成骨细胞、脂肪细胞和胰岛样细胞诱导分化,检测其多向分化潜能。结果表明,酶消化法获得的鸡羊膜上皮细胞不仅表达干细胞特有的标志,而且成功诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞和胰岛样细胞。综上所述,北京油鸡羊膜上皮细胞在体外具有较强的自我更新能力及可塑性,可作为种子细胞进行濒危物种的保存,并为日后利用羊膜上皮细胞进行临床治疗提供一定的理论依据,同时也可为油鸡基因的改良提供模型。; 高玉花张文秀吴芳春关伟军马月辉; 关键词：北京油鸡干细胞羊膜上皮细胞分化潜能

胎牛视网膜干细胞向神经细胞诱导研究: 2014年; 旨在研究胎牛视网膜干细胞(Retinal stem cells,RSCs)的分离、培养、鉴定及向不同类型细胞诱导分化等的生物学特性。采用机械吹打法从胎牛眼睫状体部细胞中分离RSCs,通过免疫荧光方法鉴定RSCs标志物Nestin、Pax-6和Chx-10,并诱导其向星形胶质细胞、神经元及少突胶质细胞诱导分化,检测其多向分化潜能。结果表明,机械吹打法获得的胎牛RSCs不仅表达干细胞特有的标志,而且成功诱导分化为星形胶质细胞、神经元及少突胶质细胞。综上表明,胎牛RSCs具有良好的体外增殖能力和多向分化潜能。为今后视网膜干细胞的研究提供相应的理论依据。; 孙博张文秀吴芳春马月辉沙伟关伟军; 关键词：视网膜干细胞分化潜能

利用亮甲酚蓝染色法预测牛卵母细胞发育潜能的研究被引量：1: 2011年; 利用亮甲酚蓝(Brilliant cresyl blue,BCB)对牛未成熟卵母细胞进行染色,根据染色结果的不同对牛未成熟卵母细胞进行分组培养,观察不同组间卵母细胞发育潜能与细胞凋亡的差异,探讨以BCB着色判定牛卵质量的可行性。本试验在牛卵母细胞成熟培养前用26μmol.L-1 BCB染色90min作为处理组(BCB+和BCB-),以未染色卵母细胞作为对照组;以卵内谷胱甘肽的浓度作为胞质成熟的判定指标,以卵母细胞体外受精后囊胚率作为卵子发育能力的判定指标,同时参照卵母细胞的凋亡检测,综合评定卵子的质量。结果表明:(1)着色组(BCB+)卵母细胞成熟率与对照组和无色组(BCB-)间差异显著(P<0.05);(2)成熟卵母细胞中谷胱甘肽的浓度较培养前差异显著(P<0.05);(3)经BCB染色,卵母细胞在成熟后,BCB+组的成熟率、凋亡率较对照组、BCB-组差异显著(P<0.05);(4)体外受精后,BCB+组的囊胚率和囊胚细胞数较对照组和BCB-组差异显著(P<0.05)。由此可见,牛卵母细胞经BCB的染色选择可以作为判断卵母细胞未来发育潜能的一个标记。; 乔利敏李向臣乔富强姚华张文秀关伟军马月辉; 关键词：卵母细胞 BCB 发育潜能

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张文秀