张春明
- 作品数：68 被引量：72H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院放射医学研究所更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金天津市科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 人血清抵抗素ELISA方法的研究及其临床初步应用被引量：1
- 2008年
- 用兔抗人抵抗素（resistin）片断（22～34氨基酸残基）的多克隆抗体（PcAb）包被固相板，用辣根过氧化物酶（HRP）标记PcAb得HRP—PcAb。在包被PcAb的孔中加入抵抗素标准品（或待测样品），加入HRP—PcAb，形成PcAb-resistin—HRP—PcAb复合物，加酶底物邻苯二胺（OPD）显色，用酶标仪在492nm波长处测定OD值，绘制标准曲线。从标准曲线读出样本中抵抗素含量。本方法特异性强，灵敏度高，精密度好。该法测定范围0．5～100ng／mL，最低检出量0．5ng／mL，批内和批间CV％分别为3．4％和7．2％。50例2型糖尿病患者血清抵抗素含量为23．2±3．9ng／mL，明显高于正常值16．0±2．5ng／mL。结果表明该法稳定，灵敏度适于检测人血清抵抗素水平。
- 路璐王德芝张春明潘兵赵明辉韩佩珍
- 关键词：抵抗素多克隆抗体酶联免疫吸附分析
- 心肌肌钙蛋白I胶体金免疫层析法的建立被引量：3
- 2006年
- 目的心肌肌钙蛋白I(Cardiac TroponinI cTnI)胶体金免疫层析法(GICA)的建立。方法从心肌组织中提取心肌肌钙蛋白I作为抗原,免疫新西兰大耳白家兔,制备出抗人心肌肌钙蛋白I抗体,并用胶体金标记cTnI抗体,采用免疫层析技术,建立了cTnI胶体金免疫层析法。结果心肌肌钙蛋白I抗血清滴度达1:100000,Ka=2.38×109L/mol;心肌肌钙蛋白I胶体金免疫层析法:灵敏度为5ng/ml;特异性:与心肌肌钙蛋白T,心肌肌钙蛋白C,激酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)均无交叉反应。结论本方法特异性强、快速、简便,适于急性心肌梗死的早期诊断及科研工作需要,具有广泛应用前景。
- 王德芝陈冀莹秦丽莉赵保健张春明
- 关键词：胶体金免疫层析
- 人心肌肌钙蛋白I胶体金免疫层析试纸条的研制被引量：6
- 2010年
- 目的建立一种简便实用胶体金免疫层析检测方法,用于人心肌肌钙蛋白I(cTnI)的快速检测。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,以鼠源抗cTnI单克隆抗体进行胶体金标记,以兔源抗cTnI多克隆抗体固定于硝酸纤维素膜作为捕获抗体,采用免疫层析技术制备快速检测cTnI胶体金免疫层析检测试纸条,并与国外生产的胶体金试剂盒作对比。结果该试纸条检测范围质量浓度为5 ng/mL～1μg/mL;灵敏度质量浓度为5 ng/mL;特异性:与肌红蛋白、肌酸磷酸激酶同工酶、cTnT、cTnC无交叉反应;与国外胶体金试纸条检测结果比较阳性符合率为96.4%,阴性符合率为100.0%。结论成功建立cTnI胶体金免疫层析检测方法,该方法灵敏度高,特异性强,检测速度快,适于急性心肌梗死的早期诊断及科研工作需要。
- 郝建秀张春明王沂宋娜玲贺欣刘鉴峰王德芝
- 关键词：胶体金免疫层析技术急性心肌梗死
- 酶放大时间分辨荧光分析
- 酶放大镧系元素发光(enzyme_amplified lanthanideluminescence，EALL)分析是把酶标记放大作用、BAS系统亲和力放大作用和TRFqA优点结合起来，建立新的灵敏的、不用增强液的分析方法...
- 赵启仁宋娜玲褚丽萍张春明王德芝贺欣
- 关键词：荧光分析
- 文献传递
- 核酸杂交的酶放大镧系元素发光分析
- 目的 DNA探针技术学已在基础研究中获得很大进展,而且在传染病、遗传病和肿瘤等疾病的诊断应用中有重要意义.目前,核酸杂交的分析测定系统的研究主要集中在提高分析灵敏度和非同位素两方面,为了解决这两方面的问题,从而建立一种超...
- 唐晓宋娜玲贺欣王德芝张春明赵启仁
- 关键词：核酸杂交
- 响应曲面法优化心肌肌钙蛋白I在E.coli中表达及纯化被引量：2
- 2009年
- 为优化已构建表达人心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因工程菌的表达条件,获得纯度较高的cTnI作为抗原用于研制临床上检测心肌梗塞的试剂盒;通过PBD(Plackett Burman Design)设计,考察各因素对目的蛋白cTnI表达的影响,证明诱导时间、pH、KCl浓度是影响最大的三个因素,通过响应曲面法(RSM)优化对cTnI表达影响最大的三个因素,构建回归方程预测cTnI的表达所占总蛋白的百分比,在最优条件下目的蛋白表达所占菌体总蛋白含量的26%。经过硫酸氨沉淀和DEAE-Cellulose离子交换层析,将重组的cTnI蛋白进行纯化,经SDS-PAGE检测后,目的蛋白只有一条带;经Western-blottting和临床检测cTnI试剂盒检测后,证明纯化的cTnI有良好的特性,可以作为免疫动物的抗原,制备特异性强,亲和力好的单克隆抗体,也可以作为临床上标定不同cTnI检测方法的校准物。
- 杨磊张春明王德芝
- 血清睾酮的试管固相RIA技术实验研究
- 2000年
- 张春明王德芝杨福军金月英韩佩珍
- 关键词：血清诊断睾酮
- 人脂联素重组体体外对乳腺癌细胞侵袭和转移的抑制被引量：5
- 2007年
- 目的:研究人脂联素重组体对人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外侵袭能力的影响。方法:将MDA-MB-231细胞分设对照组和脂联素重组体加药(2.5、5.0、10、20、30μg/ml)组,药物作用一定时间后,分别以MTT法、Transwell小室实验,Chamber小室实验,黏附实验检测脂联素重组体对乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移和黏附能力的影响,以明胶酶谱法检测其对肿瘤细胞分泌MMP-2和MMP-9的影响。结果:脂联素重组体质量浓度高于5.0μg/ml时,对MDA-MB-231细胞生长具有明显的抑制作用(P<0.01);能明显地降低肿瘤细胞体外侵袭能力(P<0.01),侵袭抑制率随脂联素重组体质量浓度的升高而增加,介于22.64%～77.84%之间;脂联素重组体质量浓度高于2.5μg/ml时,明显地抑制肿瘤细胞的迁移能力(P<0.01);脂联素重组体对ECM和FN黏附能力影响的程度不同,对FN的敏感性大于ECM;脂联素重组体质量浓度大于2.5μg/ml时,明显抑制肿瘤细胞MMP-2和MMP-9的分泌(P<0.05或P<0.01),后者的分泌量随质量浓度的升高而下降。结论:脂联素重组体在大于2·5μg/ml时,可能通过保护基底膜不受破坏而抑制人乳腺癌细胞的侵袭能力。
- 潘兵路璐陈仲顾金龙赵明辉张春明韩佩珍
- 关键词：脂联素乳腺癌细胞
- 抗纤维蛋白单链抗体及其非共价二聚体基因的构建、表达和功能比较研究
- 目的:深部静脉血栓症在世界范围内都是一种致死率和致残率相当高的疾病,特异安全的血栓定位显像可以帮助及时诊断,并迅速的开展治疗。我室制备并保存的抗人纤维蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株 AFkβ8E5分泌对血栓骨架纤维蛋白特异的...
- 胡晓林张春明
- 关键词：可变区基因单链抗体二聚体
- 文献传递
- 心肌肌钙蛋白I(cTnI)合成肽制备、鉴定及抗体研究被引量：2
- 2013年
- 目的制备人心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)合成肽并鉴定其质量。方法根据人cTnI氨基酸序列,结合计算机软件分析,预测cTnI分子的亲水性、抗原性和同源性,采用固相多肽合成法合成了cTnI分子98～110位氨基酸肽段序列(13肽,RQLHARVDKVDEE)。经与载体蛋白KLH偶联作为免疫原制备抗cTnI-KLH抗体,用间接ELISA方法鉴定其免疫原性。结果采用多肽合成法合成的cTnI合成多肽(13肽),经HPLC纯化后,以其制备的cTnI-KLH纯度达到95%。免疫学实验证实,制备的抗体效价达到1∶100 000。结论本研究制备的肽段连接物具有较强的免疫原性,并与生物提取人cTnI具有较好的交叉反应性。cTnI合成肽的研制为临床cTnI检测试剂的国产化奠定了基础。
- 王德芝周则卫刘鉴峰徐文清郝建秀杨福军张春明
- 关键词：抗体
