张智清
- 作品数：166 被引量：725H指数：10
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 人B7逆转录病毒基因转移体系的建立及在原代培养肾癌细胞中的表达
- 1998年
- Ｔ淋巴细胞的活化需要双信号刺激，关于Ｔ淋巴细胞共刺激信号的分子生物学机制目前尚未完全知晓，可能与抗原呈递细胞（ＡＰＣｓ）上的多种分子有关，而其中最引人注意的是Ｂ７分子［１］。为探讨Ｂ７基因在肾癌治疗中的作用。本实验建立了介导Ｂ７基因的逆转录病毒基因转...
- 郭应禄邢念增张智清张智清俞莉章朱丽华刘漓波
- 关键词：肾肿瘤肾癌细胞原代培养B7基因
- UroplakinII基因和启动子在人膀胱癌中的研究
- 郭应禄朱宏建张智清辛殿祺席志军叶雄俊臧桐张志文
- 本研究应用免疫组化法研究了UroplakinⅡ基因与膀胱癌细胞分化的关系，发现UroplakinⅡ基因与膀胱癌细胞分化成负相关关系。克隆并分析了人UroplakinⅡ启动子各部分功能，人UroplakinⅡ启动子长度为2...
- 关键词：
- 关键词：膀胱癌
- 带有EGF受体干扰序列的γ干扰素新分子抗肿瘤细胞增殖活性的提高被引量：4
- 1991年
- 利用基因工程技术,将天然IFN-γ分子的N端132个氨基酸与带有上皮生长因子(EGF)样多肽C端保守序列融合,构建了干扰素重组体IFN-γ132PGIX_(16).其中X_(16)由EGF样多肽C端16个氨基酸组成,PGI为连接肽序列。将此重组体基因插入表达载体pBV220P_RP_L串连启动子下游,转化大肠杆菌DH5α,在cIts857基因的调节下,通过升温诱导表达.表达产物与其母体天然IFN-γ相比,不仅保持了较高的抗病毒活性,抗病毒滴度达530MU/L菌液,而且明显地提高了抗肿瘤细胞增殖活性.在EGF存在的条件下,干扰素重组体的抗鼻咽癌细胞CNE-2增殖活性明显高于其母体分子(p<0.01).提示重组体分子IFN-γ132PGIX_(16)同时具有EGF受体干扰活性.
- 王晓鸣金奇李玉英张智清赵明侯云德
- 关键词：IFN-Γ抗肿瘤细胞增殖活性
- 流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其重组毒株及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其基因重组毒株及其制备和应用，所述毒株包括SEQ.NO.1、SEQ.NO.2、SEQ.NO.3、SEQ.NO.4、SEQ.NO.5、SEQ.NO.6、SEQ.NO.7、SEQ...
- 张智清董婕孙梅生徐红张立国吴昆昱齐立
- 甲状旁腺素相关蛋白cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 1999年
- 采用ＲＴＰＣＲ方法从中国人肾癌细胞株中克隆到甲状旁腺素相关蛋白（Ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｈｏｒｍｎｏｅｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＰＴＨｒＰ）ｃＤＮＡ，其核苷酸序列与国外发表资料相比，有６个核苷酸不同，其中仅９２位密码子的不同导致氨基酸变异，即由脯氨酸变为丝氨酸。将克隆的ＰＴＨｒＰｃＤＮＡ插到原核表达载体ｐＥＴ３ａ的Ｔ７噬菌体启动子下游，转化大肠杆菌后得到高效表达，并经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和生物学活性检测对表达产物作了鉴定。
- 刘红兵熊卫东安乃莉姚立红钭理强张智清
- 关键词：甲状旁腺素相关蛋白克隆
- 流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其重组毒株及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其基因重组毒株及其制备和应用，所述毒株包括SEQ.NO.1、SEQ.NO.2、SEQ.NO.3、SEQ.NO.4、SEQ.NO.5、SEQ.NO.6、SEQ.NO.7、SEQ...
- 张智清董婕孙梅生徐红张立国吴昆昱齐立
- 人肝癌特异性EB病毒载体-p^(EBAF)介导hGM-CSF基因的转移及表达被引量：3
- 2001年
- 目的 :探索人粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (hGM -CSF)基因在肝癌细胞中特异性表达的新途径。方法 :构建 pEBAF/hGM -CSF基因克隆 ,用脂质体转染法将它分别导入分泌甲胎蛋白 (AFP)的肝癌细胞株HepG2和不分泌APF的细胞株SMMC772 1,构建两转基因的细胞克隆HepG2 /hGM -CSF、SMMC772 1/hGM-CSF ,用MTT比色法测定细胞上清中hGM -CSF活性。结果 :HepG2 /hGM -CSF细胞上清hGM -CSF活性平均为 46 .5ng/ml/10 6/2 4h ,SMMC772 1细胞上清中无明显hGM -CSF活性。结论
- 李玉富张俊萍孙声桃李继昌李福胜张智清
- 关键词：基因治疗肝癌
- H5N1流感病毒M1蛋白免疫制备的单克隆抗体的研究被引量：1
- 2009年
- 目的制备抗人流感病毒H5N1株M1蛋白的单克隆抗体，为流感的快速诊断和研究提供新的工具。方法应用在大肠埃希菌中表达的人H5N1亚型禽流感病毒（A／Anhui／1／2005）株M1蛋白，以纯化的表达产物免疫BALB／C小鼠，取脾细胞与sp2／0细胞系作细胞融合后，间接ELISA法筛选阳性的杂交瘤细胞，并应用间接免疫荧光法对抗体的特异性进行鉴定。结果获得3株能稳定分泌抗禽流感病毒M1抗原的McAb杂交瘤细胞株，交叉反应试验及间接免疫荧光检测表明，三株McAb具有型特异性。结论用H5N1禽流感病毒M1蛋白免疫制备的单克隆抗体，具有一定的交叉反应性，可用于多种亚型甲型流感病毒的检测。
- 陈爱珺姚立红郭建强徐一刘晓宇贾润清张智清
- 关键词：流感病毒A型膜蛋白质类抗体单克隆杂交瘤
- 利用噬菌体抗体库技术制备抗甲状旁腺激素相关蛋白Fab小分子抗体
- 2000年
- 目的 利用噬菌体抗体库技术制备抗甲状旁腺激素相关蛋白 (PTHrP)Fab抗体。方法从经PTHrP免疫的Balb/C小鼠脾细胞提取总RNA ,用逆转录 聚合酶链反应 (RT -PCR)扩增一组Ⅰg轻链和重链Fab段基因 ,插入噬菌体载体pComb3,构建了抗PTHrPFab抗体基因库。用合成短肽和重组PTHrP对抗体库进行了富集筛选 ,获得鼠源抗PTHrPFab段基因后 ,进一步在大肠埃希菌表达 ,并对表达产物的特异性作了鉴定。结果 成功构建了抗PTHrP抗体基因库 ,且筛选到PTHrP特异的鼠源单抗Fab段基因。结论 所获得的Fab抗体能特异性地识别PTHrP抗原。
- 钭理强梁米芳安乃莉姚立红郭应禄张智清
- 关键词：甲状旁腺激素相关蛋白噬菌体FAB段
- 血管内皮生长因子受体KDR胞外区基因对裸鼠人膀胱癌生长的影响被引量：2
- 2001年
- 目的 研究血管内皮生长因子 (VEGF)受体KDR胞外区基因对肿瘤新生血管的抑制作用。方法 采用脂质体转染技术 ,将KDR胞外区基因的真核表达质粒pcDNA 3.1/KDRn7转入人膀胱癌EJ细胞 ,用G418筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞克隆 ,经固相结合实验筛选得到表达与VEGF特异结合的目的蛋白的细胞克隆 ,阳性细胞克隆进行了RT PCR鉴定。结果 鸡胚测活表明 ,EJ细胞表达rKDRn7的能抑制鸡胚绒毛尿囊膜的血管形成 ;表达rKDRn7的EJ细胞株对裸鼠人膀胱癌生长及血管生成明显抑制 ,实验组的微血管密度 (MVD)为 12± 4,阴性对照组 6 2± 11。结论 阻断VEGF/KDR信号传导途径能够抑制肿瘤新生血管的形成 ,延缓肿瘤的生长速度。
- 张志超曾革非张智清张立国曾荔郭应禄
- 关键词：膀胱肿瘤膀胱癌血管内皮生长因子受体
