张莉伟
- 作品数：4 被引量：17H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氧化型低密度脂蛋白对心脏瓣膜成肌纤维细胞的增殖及骨相关蛋白表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的通过观察猪主动脉瓣成肌纤维细胞在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)作用下时,细胞的增殖变化以及是否表达骨相关蛋白,探讨心脏瓣膜钙化的病理机制。方法以原代培养的猪主动脉瓣成肌纤维细胞作为研究对象,用与心脏瓣膜钙化有关的病理因素ox-LDL处理细胞,将细胞随机分为4组:对照组(Ctrl)、氧化型低密度脂蛋白组(25μg/ml ox-LDL)、氧化型低密度脂蛋白+阿托伐他汀组(25μg/ml ox-LDL+50μg/ml Ator)、阿托伐他汀组(50μg/ml Ator)。采用流式细胞学技术测定各组细胞在24、48和72 h的增殖变化,利用Western blot和Real-time PCR检测72 h各组细胞的α-平滑肌蛋白(α-SMA)活性以及骨形成蛋白2(BMP2)、碱性磷酸酶(ALP)的基因表达;了解细胞是否异常激活以及是否向成骨细胞样表型转化。结果 ox-LDL分别处理成肌纤维细胞24、48和72 h后,细胞显示出时间依赖性的增殖加速(P<0.05);ox-LDL能使成肌纤维细胞α-SMA的表达明显增加(P<0.05)而成为活性细胞;骨相关蛋白BMP2、ALP的蛋白和m RNA在对照组和Ator组仅有低水平表达,而在ox-LDL组表达显著升高(P<0.01);Ator对ox-LDL的这种病理性影响可以起到一定的抑制作用(P<0.05)。结论 ox-LDL促使心脏瓣膜成肌纤维细胞激活、分化、增殖以及向成骨细胞样表型转化,进而导致心脏瓣膜的钙化。阿托伐他汀可能通过阻遏成肌纤维细胞的增殖起到对心脏瓣膜钙化的防治作用。
- 沈迎念胡伟林张莉伟辜刚健李永胜
- 关键词：氧化型低密度脂蛋白瓣膜钙化成肌纤维细胞增殖
- 丹参酮ⅡA抑制心肌细胞的纤维化被引量：15
- 2013年
- 背景:转化生长因子β-Smads信号通路是心肌纤维化的关键通路;丹参酮ⅡA具有抑制心肌纤维化作用。目的:验证丹参酮ⅡA对转化生长因子β1致心肌纤维化的作用并探讨其机制。方法:取出生24h内的SD大鼠心脏,利用酶消化法结合差速贴壁体外培养心肌成纤维细胞。取上述第3代心肌成纤维细胞,用5μg/L转化生长因子β1培养15,30,60,120min或6,12,24h后收集细胞,用不同浓度(10-5mol/L、10-4mol/L)丹参酮ⅡA预处理2h后再加入5μg/L转化生长因子β1培养120min或24h后收集细胞,并设空白对照组。免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定,反转录聚合酶链反应检测结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达,Western Blot检测Smad7及磷酸化Smad3蛋白表达。免疫组织化学染色及免疫荧光法检测磷酸化Smad3、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原蛋白表达。结果与结论:转化生长因子β1在一定范围内以时间依赖方式诱导结缔组织生长因子、Ⅰ型胶原、磷酸化Smad3及Smad7的表达,刺激终末结缔组织生长因子、Ⅰ型胶原mRNA的表达量明显上升(均P<0.01);磷酸化Smad3及Smad7蛋白表达量在刺激后1h达到峰值,表达量显著增加(均P<0.01)。高浓度丹参酮ⅡA预处理可显著下调磷酸化Smad3、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原表达(均P<0.01)。两种浓度的丹参酮ⅡA预处理均可上调Smad7蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。提示丹参酮ⅡA对心肌纤维化有抑制作用,可能与其上调Smad7蛋白表达,抑制转化生长因子β1诱导的Smad3磷酸化,部分阻断转化生长因子β1-Smads信号通路有关。
- 周代星李智慧占成业张莉伟
- 关键词：心肌成纤维细胞心肌纤维化转化生长因子Β1SMAD3SMAD7结缔组织生长因子
- 阿托伐他汀抑制心脏瓣膜成肌纤维细胞向成骨细胞样表型转化被引量：1
- 2015年
- 目的:通过观察猪主动脉瓣成肌纤维细胞在受氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)作用时,阿托伐他汀(Ator)对细胞凋亡的影响以及是否表达骨相关蛋白,来探讨阿托伐他汀对心脏瓣膜钙化的防治机制。方法:以原代培养的猪主动脉瓣成肌纤维细胞作为研究对象,用ox-LDL处理细胞。将瓣膜间质细胞随机分为4组:对照组(Ctrl),ox-LDL组(25 mg·L-1ox-LDL),oxLDL+Ator组(25 mg·L-1ox-LDL+50 mg·L-1Ator),Ator组(50 mg·L-1Ator)。采用流式细胞学技术测定各组细胞在24,48,72 h的凋亡变化,利用Western印迹法和Real-time PCR检测72 h各组细胞的α-平滑肌蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)活性,以及骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的基因表达。结果:ox-LDL分别处理成肌纤维细胞24,48,72 h后,细胞显示出时间依赖性的凋亡加速(P<0.05),加入Ator后,细胞的凋亡速度明显减低(P<0.05)。ox-LDL组α-SMA的表达明显增加(P<0.05),成为活性细胞,加用Ator并未对α-SMA蛋白产生影响(P>0.05)。骨相关蛋白BMP2、ALP和mRNA在对照组和Ator组仅有低水平表达;而在ox-LDL组表达显著增加(P<0.01),加入Ator后,BMP2、ALP的表达明显下降(P<0.05)。结论:ox-LDL促使心脏瓣膜成肌纤维细胞分化、凋亡加速以及向成骨细胞样表型转化;Ator可以抑制ox-LDL所诱导的细胞凋亡,并对细胞的激活,以及向成骨样细胞表型分化可以起到一定的抑制作用,对心脏瓣膜钙化有防治作用。
- 沈迎念张莉伟辜刚健李永胜
- 关键词：阿托伐他汀OX-LDL成肌纤维细胞瓣膜钙化
- oxLDL对心脏瓣膜间质细胞的影响
- 目的
钙化的主动脉瓣膜狭窄是老年人常见病并以瓣膜进行性钙化和纤维化增厚为特征，但是细胞和分子机制还不清楚。本文的目的是研究氧化低密度脂蛋白能否介导猪主动脉瓣膜间质细胞向成骨细胞转变及这一过程能否被药物控制。
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- 张莉伟
- 关键词：氧化低密度脂蛋白阿托伐他汀钙化
- 文献传递
