张雪静
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 供职机构：镇江市第二人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Q开关YAG激光及化学脱色法构建色素脱失动物模型的比较被引量：2
- 2011年
- 目的探讨Q开关YAG激光及化学脱色法对豚鼠皮肤黑素细胞的影响,从而构建色素脱失动物模型。方法分别应用Q开关YAG激光照射及5%H2O2化学脱色处理豚鼠黑色皮肤,肉眼观察皮肤颜色变化,HE染色和HMB45免疫组化染色观察皮肤黑素细胞的变化。结果 Q开关YAG激光照射3次后,豚鼠黑色皮肤变为白色,同时长出白色毛发,HE及HMB45染色后基底层未见黑素细胞。2个月后,照射区域皮肤及毛发仍呈白色,镜下基底层亦未见黑素细胞。而化学脱色法可使皮肤略变白,毛发仍呈黑色,HE及HMB45染色镜下基底层仍可见大量黑素细胞。结论 Q开关YAG激光可以构建短期稳定色素脱失动物模型,为色素减少性皮肤病的研究提供了可依据的动物模型。
- 张雪静刘莉萍马红许辉顾文涛李遇梅
- 关键词：黑素细胞动物模型
- 系统性红斑狼疮患者外周血CD19^+细胞数量的变化及p16 mRNA的表达
- 2013年
- 目的:检测系统性红斑狼疮患者外周血中CD19^+细胞数目的变化及p16 mRNA的表达。方法:采用免疫磁珠法分离SLE外周血CD19^+细胞并计数;分选出来的细胞提取RNA,应用实时定量RT-PCR方法检测CD19^+细胞中p16 mRNA表达水平。结果:SLE患者外周血中CD19^+细胞(66.23±4.455)较正常对照组(32.15±5.108)增加。SLE患者p16 mRNA在CD19^+细胞中的表达(47.3731±22.2939)比健康对照组(0.7276±0.1183)明显增加。结论:CD19^+细胞的数量及p16 mRNA的异常在SLE的发病中起一定作用。
- 马红许辉张雪静闵敏李遇梅
- 关键词：P16MRNA系统性红斑狼疮CD19+
- 系统性红斑狼疮患者外周血CD4^+、CD8^+T细胞p16基因mRNA表达被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨p16基因mRNA在系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4^+、CD8^+T细胞中的表达。方法:收集40例确诊的SLE患者(患者组)和30名正常人(对照组)外周血,应用免疫磁珠法分选CD4^+、CD8^+细胞并计数,提取RNA,应用实时定量RT-PCR方法检测外周血CD4^+、CD8^+T细胞中p16基因mRNA表达水平。结果:①p16基因mRNA在CD4^+T细胞中的表达:分别与对照组(2.245±0.586)和SLE非活动期组(1.361±0.154)相比较,SLE活动期组(93.264±42.898)明显增加,差异均具有统计学意义;而非活动期组与对照组之间差异无统计学意义。②p16基因mRNA在CD8^+T细胞中的表达:分别与对照组(4.323±0.735)和非活动期组(3.722±1.701)比较,SLE活动期组(92.926±38.102)明显增加,差异均具有统计学意义;而非活动期组和对照组之间差异无统计学意义。结论:SLE患者p16基因mRNA水平在CD4^+、CD8^+T细胞中增高,提示SLE患者存在p16基因表达异常。
- 马红李遇梅李政亮张雪静刘莉萍许辉
- 关键词：P16基因红斑狼疮
- 人脂肪间充质干细胞体外向黑素细胞分化的研究被引量：1
- 2014年
- 目的 建立体外诱导人脂肪间充质干细胞（hADSC）向黑素细胞分化的方法。 方法 由人皮下脂肪分离培养获得hADSC，流式细胞仪检测细胞表型，成骨成脂分化证明分化潜能。将干细胞生长因子（SCF）、内皮素3 （EDN-3）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）等加到条件培养基中，促使第5代hADSC向黑素细胞方向诱导，诱导至第10周。未诱导组为正常对照组。使用实时荧光定量PCR检测黑素相关基因小眼畸形转录因子（MITF），酪氨酸激酶受体c-Kit（KIT），多巴色素异构酶（DCT），酪氨酸酶（TYR），酪氨酸酶相关蛋白1（TYRP1），性别决定区域相关转录因子10（SOX10） mRNA的表达量，统计学分析采用单因素方差分析及LSD-t检验。诱导结束后，通过免疫细胞化学法、细胞免疫荧光法进行鉴定。 结果 流式细胞仪显示分离培养获得的hADSC高表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166，阳性率均在95%以上；低表达或不表达CD31、CD34、CD45，人白细胞DR抗原（HLA-DR）。成骨成脂分化结果显示hADSC具有分化潜能。实时荧光定量PCR结果显示，诱导10周后，MITF、KIT、DCT、TYR、TYRP1、SOX10 mRNA的表达水平分别为0.325 ± 0.012，0.042 ± 0.006，0.046 ± 0.013，0.036 ± 0.005，0.041 ± 0.003，0.225 ± 0.014，与诱导0周组相比，均有上调（P 〈 0.05）。诱导结束后，免疫细胞化学MITF、HMB45染色阳性，细胞免疫荧光TYRP1、S100阳性表达。 结论 由人脂肪间充质干细胞诱导所得细胞具有一定的黑素细胞生物学特性。
- 闵敏张雪静马红许辉李遇梅
- 关键词：分化黑素细胞
- SLE患者外周血CD4^＋T淋巴细胞DNA中p16基因启动子区甲基化研究被引量：1
- 2010年
- 目的检测SLE患者外周血CD4^＋T淋巴细胞DNA中p16基因的甲基化状态及其在SLE发病机制中的作用。方法以Taqman探针为基础的实时定量PCR（Methylight）方法检测28例SLE患者和20例正常人CD4^＋T淋巴细胞中p16基因启动子区甲基化状态。结果SLE患者CD4^＋T淋巴细胞的p16基因启动子区甲基化率（35．7％，10／28）高于对照组（10．0％，2／20）。两者比较差异有统计学意义（r=4．11，P〈0．05）。SLE患者疾病严重程度评分与对应的标准甲基化指数无统计学相关性（rs=-0．29，P〉0．05）。结论SLE患者CD4^＋T淋巴细胞p16基因甲基化异常，提示p16基因的高甲基化在SLE的发病中起一定作用。
- 李政亮李遇梅马红顾文涛许辉刘丽萍吴蔚张雪静
- 关键词：CD4阳性T淋巴细胞DNA甲基化
- 人脂肪间充质干细胞的原代培养及体外成骨成脂诱导分化被引量：8
- 2013年
- 目的:建立体外分离培养获得人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADSCs)的方法,并观察其形态、免疫表型、生物学特性。初步探讨其体外成骨过程中出现成脂现象的原因及机制。方法 :剖宫产手术获得腹部皮下脂肪,0.15%Ⅰ型胶原酶消化法获得人脂肪间充质干细胞并进行体外培养。行MTT细胞增殖实验绘制增殖曲线,使用流式细胞及细胞免疫荧光技术检测细胞表面抗原,行成骨成脂分化鉴定其分化潜能。通过RT-PCR技术检测成骨成脂过程中过氧化物酶体增殖物激活受体γ-2(peroxisome proliferator activated receptorγ-2,PPARγ-2)和骨桥蛋白mRNA表达情况。结果 :通过分离培养,获得了大量旋涡状生长的人脂肪间充质干细胞。MTT法显示细胞增殖能力强。流式细胞鉴定结果显示,CD29、CD73、CD105、CD166高表达,CD31、CD34、CD45、HLA-DR低表达。细胞免疫荧光结果与之相符。hADSCs在特定诱导条件下,具有成骨成脂分化潜能。在成骨分化过程中同时伴有成脂发生。RT-PCR结果显示,与对照组相比,成脂诱导组PPARγ-2 mRNA有时间依赖性递增表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,成骨诱导组骨桥蛋白,PPARγ-2 mRNA均有时间依赖性递增表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:建立了一种分离培养hADSCs简单可靠的方法。获得的细胞具有贴壁生长、增殖活性强、干细胞表型以及多向分化等特征。hADSCs体外成骨过程中,三酰甘油的形成对成骨具有一定的促进作用。
- 闵敏张雪静马红许辉李遇梅
- 关键词：成骨分化成脂分化
