彭亮 作品数:10 被引量:24 H指数:2 供职机构: 第三军医大学大坪医院野战外科研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 环境科学与工程 更多>>
利用环状糊精纯化淀粉水解酶类 2004年 环状糊精是由环状糊精葡萄糖基转移酶作用于淀粉所产生的一组非还原性环状低聚糖 ,最常见的有α,β和γ型 ,它们分别是由 6、7或 8个葡萄糖单元以α 1,4糖苷键联结而成的。由于其特殊的“内疏水外亲水”分子结构 ,使得环状糊精能与多种有机分子形成特殊结构的包合物 ;同时环状糊精还能与酶的活性 /非活性部位相互作用 ,所以以环状糊精为配体 。 彭亮 廖祥儒 张充 吴立峰 王博 杨磊关键词:环状糊精 纯化 配体 联合多数据库高通量筛选分析前列腺癌上调表达基因 目的:研究前列腺癌组织上调表达的基因,不仅可帮助阐明前列腺癌分子病理学机理,而且可提供有价值的诊断及治疗的癌标。随着美国癌症基因组解剖计划(CGAP)的实施,越来越多的肿瘤 吴刚 靳风烁 李黔生 彭亮文献传递 前列腺癌上调表达基因BRP44的蛋白细胞定位及功能预测研究 2006年 目的了解GFP-BRP44融合蛋白的细胞定位,初步预测BRP44的功能。方法构建BRP44与GFP的融合表达真核载体,脂质体介导法转染高表达该基因的前列腺癌细胞株LNCaP,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的细胞定位。生物信息学方法对基因BRP44进行序列分析及功能预测。结果成功构建GFP-BRP44融合蛋白的真核表达载体,pEG-FP-BRP44融和蛋白在LNCaP细胞核及细胞质均有表达。与单纯GFP相比,融合蛋白在细胞质的表达相比细胞核更强。功能预测提示基因BRP44可能是一个受oct-1等转录因子调控,主要在细胞线粒体发挥基因调节作用的可溶性蛋白。结论BRP44蛋白可能主要在细胞质发挥作用。 吴刚 彭亮 聂志林 叶锦 毕罡 靳文生 靳风烁关键词:真核表达载体 细胞定位 基因功能 植物中的磷脂酶D 被引量:15 2005年 介绍了植物磷脂酶D(PLD)的生化性质、克隆、基因组结构、氨基酸序列结构、活性调控、信号转导和细胞生理功能的研究进展。 张充 蒋继志 廖祥儒 彭亮 安秀娟 杨磊关键词:植物 磷脂酶D 基因组结构 生化性质 活性调控 信号转导 数据库挖掘法高通量筛选分析前列腺癌相关基因 被引量:8 2006年 背景与目的:发现并研究前列腺癌与正常前列腺组织差异表达的基因,不仅可帮助阐明前列腺癌分子病理学机理,而且可提供有价值的诊断及治疗的肿瘤标志物。越来越多的肿瘤基因表达信息被收集在美国癌症基因组解剖计划(CGAP)数据库,给肿瘤研究者提供了一个前所未有的机会去挖掘筛选肿瘤差异表达基因。本研究探讨利用这些公用信息及分析软件去分析挖掘前列腺癌差异表达基因的可行性及具体筛选方法。方法:通过选择合理的数据库及统计参数,利用分析软件SAGEDGED及cDNADGED获得在前列腺癌组织相对正常组织差异表达超过5倍的SAGE标签及cDNA,完成SAGE标签对基因的确认后根据我们制定的筛选原则进行标签筛选;最后通过UniGene、OMIM及Pub/Med等数据库注释候选基因的主要功能及与前列腺癌的关系。结果:通过SAGEDGED得到53条差异表达基因,其中26条为前列腺癌上调表达,27条下调表达。通过cDNADGED得到28条差异表达基因,其中15条前列腺癌上调表达,13条下调表达。结论:合理利用公用生物信息学资源,联合多数据库挖掘肿瘤相关基因是一个简单而可行的方法,可以给进一步的生物学实验以大量的提示。 吴刚 彭亮 靳风烁 李黔生关键词:前列腺肿瘤 基因表达系列分析 生物信息学 稳定高效表达正反义Alu-Sx细胞系的建立 2006年 目的建立稳定高效表达正反义A lu-Sx的细胞系。方法根据A lu亚家族Sx序列合成两对两端带有限制性酶切位点的引物,提取HEK293细胞的总DNA后PCR扩增,产物连接到真核表达载体pcDNA3.1/myc-H is A中构建成重组体。经酶切及测序鉴定后,阳离子脂质体转染法转染HEK293细胞后G418筛选稳定表达的细胞克隆,Northern杂交检测并挑选出表达最强的亚克隆。结果成功构建A lu亚家族Sx的正反义真核表达载体并获得高效稳定表达的HEK293细胞亚克隆。结论高效稳定表达正反义A lu Sx的HEK293细胞亚克隆可用于下一步研究。 彭亮 吴刚 蒋继志 靳风烁 丁瑞关键词:真核表达载体 稳定转染 细胞克隆 嗜碱性细菌在酶制剂生产中的应用 被引量:1 2005年 嗜碱性菌是一类生长于碱性环境中的特殊微生物。自发现以来引起人们广泛重视,并在 许多方面得到了应用。阐述了嗜碱性菌在酶制剂方面的应用和发展。 张充 廖祥儒 彭亮 安秀娟 吴立峰 杨磊关键词:酶制剂 稳定高效表达BRP 44的PC-3细胞系的建立 2007年 目的建立稳定高效表达BRP 44的PC-3细胞系。方法下载BRP 44的全长mRNA序列,用Oligo 6进行引物设计,在上下游引物的5’引入相应的HindⅢ、EcoR I限制性内切酶识别序列及保护碱基。提取LNCaP细胞的总RNA反转录成cDNA进行PCR扩增,产物连接到真核表达载体pcDNA 3.1/myc-His A中构建成重组体。重组载体经酶切和测序鉴定后,阳离子脂质体转染法转染PC-3细胞、G 418筛选、Northern杂交检测并挑选出表达最强的亚克隆。结果成功构建BRP 44的真核表达载体并获得高效稳定表达的BRP 44基因的PC-3细胞亚克隆。结论高效稳定表达BRP44的PC-3细胞亚克隆可用于下一步研究。 白巍 李黔生 吴刚 彭亮 靳风烁关键词:PC-3细胞系 稳定转染 前列腺癌 脱泛蛋白酶及其功能 2004年 脱泛蛋白酶 (DUB)是催化脱泛蛋白化的一种酶 ,在生物体内普遍存在 ,具有重要作用。对脱泛蛋白酶的分类、结构特点、作用和生物功能进行了综述。 张充 廖祥儒 彭亮 吴立峰 杨磊 王博PCa05和EGFP在LNCaP细胞中的融合表达及其亚细胞定位 前列腺癌为全世界特别是欧美国家男性常见的恶性肿瘤和主要死亡原因之一。我国随着人口老年化及医疗检测水平的提高,其发病率逐年增加。按照近年来全国前列腺癌的发病率统计,前列腺癌被列为我国21世纪可能增长最快的肿瘤之一。 ... 彭亮关键词:增强型绿色荧光蛋白 真核表达载体 亚细胞定位 基因功能 文献传递