徐中清
- 作品数：12 被引量：24H指数：4
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生经济管理化学工程更多>>
- 新城疫活疫苗La Sota株免疫增强了禽网状内皮组织增生病毒对SPF鸡的致病作用被引量：4
- 2022年
- 禽网状内皮组织增生病毒(REV)是鸡群中常见的垂直传播性病毒之一,感染后可导致鸡群发生严重的免疫抑制,对于一些未净化REV的鸡群,在免疫新城疫活疫苗后某些鸡会加重发病趋势,怀疑通过鸡胚感染的REV和新城疫活疫苗在体内发挥了协同致病作用,为此本研究开展了模拟实验。从100枚SPF鸡胚中随机选择50枚SPF鸡胚通过卵黄囊接种REV,剩余50枚SPF鸡胚通过卵黄囊接种灭菌PBS。待孵化出雏后鸡胚接毒组和空白鸡胚对照组各取20只SPF鸡于7日龄时免疫新城疫活疫苗(La Sota株),同时鸡胚接毒组和空白鸡胚对照组各取20只SPF鸡于7日龄时接种PBS。结果显示:携带有REV的雏鸡再免疫活疫苗La Sota株后首先出现死亡,其体重明显低于其他组SPF鸡体重,免疫器官损伤程度比REV单独感染组更加严重,且显著高于对照组。本研究结果表明新城疫活疫苗La Sota株免疫后增强了REV对SPF鸡的致病作用,提示我们选择净化种源的重要性。
- 张亚文季晓琳张智慧苏奇常爽徐中清王芳赵鹏
- 关键词：新城疫活疫苗
- 猪瘟猪丹毒猪肺疫三联活疫苗抗原菌选择性显色培养基的研发和应用被引量：4
- 2022年
- 为研制便于检测猪瘟猪丹毒猪肺疫三联活疫苗抗原含量的选择性显色计数琼脂(以下简称猪三联显色培养基)以代替传统的马丁琼脂,对比研究了干粉马丁琼脂、新鲜马丁琼脂和猪三联显色培养基的理化特性和生长特性,并通过活菌计数方法平行对比了猪丹毒单价苗、猪肺疫单价苗和猪瘟猪丹毒猪肺疫三联活疫苗的抗原含量。结果显示,猪三联显色培养基在活菌计数的准确性和重复性上均与干粉马丁琼脂保持一致,而且两种菌的菌落回收率均能达到0.9以上。研究表明,猪三联显色培养基可以代替马丁琼脂作为检测猪丹毒和猪肺疫抗原菌含量的计数琼脂,在猪瘟猪丹毒猪肺疫三联活疫苗生产过程中监测疫苗质量。
- 韩美珍徐中清才学鹏李秀辉
- 关键词：显色培养基活菌计数
- 不同牛分枝杆菌特异性基因PCR方法的比较被引量：4
- 2020年
- 【背景】牛结核病是我国二类动物疫病,世界动物卫生组织将其列为法定报告的动物疫病。牛主要通过患病牛呼吸道分泌物和咳嗽所产生的气溶胶感染;人则主要通过食用未经高温处理的病牛的肉或奶感染。因此,经过病原学PCR检测对疑似患病牛牛奶或屠宰组织样品进行快速检验确诊,能够最大限度地减少奶牛养殖中乳品生产业的经济损失。【目的】研究并确定适宜的牛分枝杆菌PCR扩增引物及参数,为临床快速准确诊断牛结核病提供参考。【方法】对已报道的5对PCR引物,运用降落(touch down)PCR法确定适宜退火温度(Tm);运用梯度稀释的牛分枝杆菌C68001株(国内牛结核菌素生产用菌株)基因组DNA以及不同菌液含量的人工模拟临床样本(淋巴结、肺脏和牛奶),确定不同引物PCR方法的敏感性;同时以6种常见牛感染菌(牛种布鲁氏菌2308、羊种布鲁氏菌Rev.1、牛分枝杆菌C68001和AN5、禽分枝杆菌C68202、副结核分枝杆菌C68681和胞内分枝杆菌C68226)核酸样本,确定不同引物PCR方法的特异性。【结果】所有引物在53?63℃均含有目的条带,确定引物的最佳退火温度是60℃。在细菌核酸敏感性检验中,1号和3号引物的检测敏感性最高,达10?10 ng/μL;其次是2号和5号,达10?5 ng/μL。对于人工模拟感染样本,1号、3号和4号引物在淋巴结和肺脏中检测敏感性最高,其次是2号;而2号、3号、4号和5号引物对奶样检测敏感性最高。对于特异性检验,2号和5号引物特异性较好,可检测到明显的牛分枝杆菌特异性条带,对通常不引起牛结核病而只干扰免疫学诊断的禽分枝杆菌检测条带较微弱,而布鲁氏菌、副结核分枝杆菌和胞内分枝杆菌均无检测条带。【结论】2号引物及其反应参数的PCR方法敏感性、特异性良好,适合用于牛结核病的快速准确诊断。
- 张春燕秦玉明边增杰徐中清牛凯许冠龙丁家波鑫婷朱良全
- 关键词：牛分枝杆菌引物PCR敏感性特异性
- 畜禽活疫苗耐热冻干保护剂被引量：5
- 2004年
- 耐热保护剂是畜禽用冻干活疫苗质量好坏的关键技术,为国内、外研究的热点和难点.目前国外活疫苗冻干制品在2～8℃的保质期可达12～36个月,并且正向着群体免疫的方向发展(饮水或与饲料混合使用).耐热保护剂配方和生产技术具有科技含量高,实用性强等优点,因此一般为专利产品或商业秘密.国内使用的进口疫苗多为此类产品.由于受到知识产权的保护,引进这项技术或购买其产品均需要花费大量的外汇.
- 王栋王利永徐中清
- 关键词：耐热保护剂活疫苗冷冻干燥
- 乳酸杆菌禽株(Lacto bacillace P.strain)的分离与试验
- 1991年
- 从健康成年鸡嗉囊中分离到乳酸杆菌禽株(Lacto bacillace P.strain),并以该菌饲喂雏鸡,结果表明该茵具有降低雏鸡盲肠pH值,防止雏鸡肠道感染和提高育雏成活率的效果.
- 刘华程金科黄宗洲杨玮云徐中清
- 培养副鸡嗜血杆菌用干粉培养基的优化研究
- 2023年
- 优化副鸡嗜血杆菌干粉培养基配方。通过单因素平行对比配方中碳源、血清、辅酶等营养物质,确定各个因素对副鸡嗜血杆菌生长的影响。研究筛选出了适宜副鸡嗜血杆菌生长的干粉培养基配方:鸡肉蛋白胨、酪胨、多价胨、酵母粉、葡萄糖等,再添加7.5%鸡血清和10 mg/L辅酶Ⅰ,于37℃、5%CO_(2)恒温培养箱中160 r/min振荡培养14~16 h。优化后的配方更适于培养副鸡嗜血杆菌,为副鸡嗜血杆菌疫苗大规模生产提供了参考依据。
- 韩美珍徐中清李秀辉郇春燕
- 关键词：副鸡嗜血杆菌鸡传染性鼻炎活菌计数
- 重组产气荚膜梭菌β毒素突变体的表达与免疫保护性分析被引量：1
- 2020年
- 旨在获得产气荚膜梭菌β毒素(CPB)的重组突变体,并评价其毒力及免疫保护性。对已知的产气荚膜梭菌CPB编码基因进行优化设计,同时引入4个氨基酸突变位点,分别是第212位的精氨酸突变为谷氨酸,第268位的亮氨酸突变为甘氨酸,266位的酪氨酸和275位的色氨酸突变为丙氨酸。此外,在该基因5′端添加Th细胞表位(T)和鞭毛蛋白(flagellin)N末端的编码序列,经人工合成获得重组基因片段(GTF_(N)CPB_(m4))。将GTF_(N)CPB_(m4)克隆至原核表达载体pET-30a(+)中进行表达与纯化,获得重组蛋白rTF_(N)CPB_(m4)。利用Western blot方法检测rTF_(N)CPB_(m4)与C型产气荚膜梭菌毒素抗血清的反应性,并检测rTF_(N)CPB_(m4)对小鼠的毒力。随后,以rTF_(N)CPB_(m4)免疫家兔,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测家兔血清对C型产气荚膜梭菌毒素的中和抗体效价。结果表明,rTF_(N)CPB_(m4)主要以包涵体的形式表达且能与C型产气荚膜梭菌毒素抗血清反应。小鼠安全性试验显示,50μg的rTF_(N)CPB_(m4)对小鼠仍无致死性;免疫rTF_(N)CPB_(m4)后,每毫升家兔二免抗血清可中和10~20个小鼠最小致死量(MLD)的C型产气荚膜梭菌毒素;1个家兔MLD的C型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔得到了100%(4/4)的保护。以上结果说明,rTF_(N)CPB_(m4)在丧失毒力的同时保留了良好的免疫原性,从而为C型产气荚膜梭菌病基因工程疫苗的研制提供了重要的数据。
- 杜吉革朱真徐中清李倩琳姚文生李启红印春生杨柳付利芝陈小云刘莹薛麒
- 关键词：鞭毛蛋白毒力免疫保护性
- 国产与进口两种商品化NBB培养基检测啤酒有害菌的效果比较
- 2023年
- 目的:比较国产和进口NBB培养基对啤酒有害菌的检测效果。方法:将干酪乳杆菌、短乳杆菌、四联球菌、戊糖片球菌、乳酸乳球菌乳脂亚种、植物乳杆菌植物亚种6株乳酸菌接种到NBB-B和NBB-A培养基中,28℃厌氧培养24~72 h,测定OD值,观察培养基变色、菌落生长状态等。同时,用不同浓度麦芽啤酒配制NBB培养基,确定配制培养基用啤酒的最适麦芽度。结果:6株乳酸菌在国产和进口NBB-B培养基中灵敏度和指示特征无明显差异。戊糖片球菌在国产NBB-A培养基培养48 h变色情况略差于进口NBB-A,培养72 h后,与进口NBB-A培养基无差异。通过不同麦芽度比对试验,采用10°P啤酒配制的NBB培养基菌株生长情况最好。结论:国产与进口NBB培养基在灵敏度、指示能力、菌落生长等方面无明显差异,国产NBB培养基可用于国内啤酒生产企业检测啤酒有害菌。
- 李艳艳刘小燕赵琳娜白继超崔生辉徐中清
- 关键词：啤酒有害菌乳酸菌
- 铜绿假单胞菌定量冷冻干燥菌球与新鲜制备菌悬液用于胰酪大豆胨琼脂培养基适用性检查的研究
- 2022年
- 目的:探讨使用铜绿假单胞菌CMCC(B)10104定量冷冻干燥菌球制备菌悬液(以下简称冻干型菌悬液)与新鲜制备菌悬液(以下简称新鲜型菌悬液)评价胰酪大豆胨琼脂培养基适用性的差异。方法:将铜绿假单胞菌CMCC(B)10104冻干型菌悬液和新鲜型菌悬液分别涂布5种市售胰酪大豆胨琼脂培养基,获得培养物的菌落数量、菌落平均直径及肉眼可见菌落出现时间,使用SPSS软件进行统计学分析。结果:铜绿假单胞菌CMCC(B)10104冻干型菌悬液与新鲜型菌悬液的差异主要体现在菌落平均直径上,前者大于后者。铜绿假单胞菌CMCC(B)10104冻干型菌悬液在不同品牌胰酪大豆胨琼脂培养基平板上菌落计数明显不同。结论:使用铜绿假单胞菌CMCC(B)10104冻干型菌悬液更利于筛选对损伤菌促生长能力强的培养基,可以用于计数培养基(胰酪大豆胨琼脂培养基)适用性检查。
- 任河山李景云王跃凤崔生辉徐中清王金恒
- 关键词：铜绿假单胞菌
- 马丁干粉培养基的性能研究被引量：3
- 2004年
- 将研制的马丁干粉培养基与新鲜马丁培养基比较,证明用干粉培养基培养链球菌、多杀性巴氏杆菌和丹毒杆菌,其每1mL中活菌数和灵敏度均与新鲜马丁培养基相当。干粉培养基用于生物制品的生产及检验更方便且质量稳定,可推广应用。
- 徐中清薛丽华
- 关键词：灵敏度生物制品
