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携带新城疫病毒融合蛋白基因的重组减毒单核细胞增多性李斯特菌构建与鉴定被引量：4: 2006年; 以鸡新城疫病毒F基因(NDV-F)为模式外源基因,通过基因切割-重叠延伸PCR法(SOE-PCR)将其插入到单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes)毒力基因hly的启动子和信号肽序列下游,并将该融合片段克隆入穿梭质粒pKSV7,随后将重组质粒电转李斯特菌进行同源重组。NDV-F基因的PCR扩增表明该重组菌构建成功,RT-PCR结果表明F基因在重组菌中得到了转录。比较了重组菌和野生型菌株的溶血性、黏附和侵袭力、对小鼠和鸡胚的毒力和生长特性以及重组菌的体内外稳定性,结果表明:hly基因中F片段的整合消除了单核细胞增多性李斯特菌溶血素基因的表达,其培养上清液没有溶血性,而野生型菌株的溶血价达24;细胞试验表明重组菌对细胞的黏附力和相对侵袭力均有不同程度的降低,而相对侵袭力与野生型菌株具有显著性差异(P<0.05);重组菌对小鼠及鸡胚的毒力(LD50)与野生型相比分别下降3.7和6.5个对数数量级;重组菌在BHI肉汤和小鼠体内连续5次后,仍然可以扩增出目的基因NDV-F,初步表明该重组菌较为稳定。; 徐晶靓江玲丽陈宁帅江冰方维焕; 关键词：同源重组插入突变

单核细胞增多性李斯特菌牛奶分离株弱毒的分子基础: 为探讨单核细胞增多性李斯特菌H4株弱毒的分子基础,我们在分析其表型的基础上,对其主要毒力相关基因进行了系统测序和分析。体外试验表明:分离株H4与10403S菌株相比具有相似的溶血活性和细胞侵袭力,但具有更强的细胞黏附力、...; 江玲丽徐晶靓陈宁帅江冰方维焕; 文献传递

2005-2008年浙江省生猪主产区猪戊型肝炎血清流行病学调查被引量：6: 2009年; 本研究旨在建立检测猪戊型肝炎病毒(HEV)感染的间接ELISA方法,并将其用于分析浙江省生猪主产区猪群的HEV感染状况。首先人工合成并原核表达了HEV ORF2蛋白的主要抗原表位区,免疫印迹显示表达产物对HEV抗体阳性的猪血清具有良好的反应性。以此纯化蛋白为包被抗原建立了猪血清中HEV特异性抗体的ELISA检测方法,检测结果显示其与商品化HEV抗体诊断试剂盒的检测符合率达91.5%。对2005-2008年采集自浙江省不同地区46个猪场的1330份血清进行了检测,有741份血清检测为猪HEV抗体阳性,平均阳性率为55.7%。其中2005和2006年HEV抗体阳性率分别为62.7%(175/279)和61.4%(301/490),明显高于2007年的43.1%(59/137)和2008年的48.6%(206/424)。同时,66-100日龄中猪的血清HEV抗体阳性率(58.2%,110/189)显著高于30-65日龄小猪(39.7%,73/184)和101-160日龄大猪(44.1%,83/188)。从猪场水平来看,仅有3个猪场未检测到HEV抗体,场阳性率93.2%。结果表明本研究建立的ELISA方法切实可行,检测结果显示浙江省猪场中HEV感染相当普遍。; 帅江冰张晓峰徐晶靓陈宁方维焕; 关键词：猪戊型肝炎病毒间接ELISA 血清学调查

表达绿色荧光蛋白的重组单核细胞增多性李斯特菌的构建: 将外源DNA引入某种载体构建重组疫苗,可将保护性抗原传递至宿主免疫系统,诱导免疫应答.细菌和病毒均可作为重组活疫苗载体,其中细菌载体能表达多种不同的外源性抗原.单核细胞增多性李斯特菌(Listeriamonocytoge...; 江玲丽柯春林徐晶靓陈宁方维焕; 关键词：基因簇; 文献传递

食源性单核细胞增多性李斯特菌的生物学特性: 单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是革兰氏阳性兼性胞内寄生菌,广泛存在于自然界和一些特定的环境中,如土壤、水、污水管等。上世纪80年代以来,该菌作为一种重要的食源性病原菌已引起广...; 徐晶靓; 关键词：单核细胞增多李斯特菌生物学特性食源性病原菌食品污染; 文献传递

新常态下畜牧业绿色发展的杭州实践与思考被引量：2: 2017年; 当前，随着我国宏观经济步人新常态，国家相继出台了《环保法（新修订）》《畜禽规模养殖污染防治条例》《中央关于加快生态文明建设的意见》《水十条》等政策法规，畜牧业发展的内外部环境发生了诸多变化。面对新挑战和新机遇，杭州市委、市政府高度重视，按照省委关于畜牧业转型升级的部署，切实开展畜禽养殖污染整治，高效推进畜牧业绿色发展，畜牧业转型升级初见成效。; 田小明陈晓明王雷杰周佳捷徐晶靓; 关键词：畜牧业生态文明建设畜禽养殖宏观经济污染防治规模养殖

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徐晶靓