徐望
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
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- PTP4A1在舌鳞癌组织及TCA8113细胞中的表达及意义被引量：4
- 2013年
- 目的:检测PTP4A1基因在舌鳞癌组织及舌鳞癌细胞系TCA8113中的表达,并探讨其表达水平与舌鳞癌临床病理参数的关系。方法:应用免疫组化SP法检测30例舌鳞癌和15例正常舌组织石蜡包埋组织中PTP4A1的表达;对15例新鲜舌鳞癌组织进行real-time PCR,检测PTP4A1在舌鳞癌组织、癌旁组织、正常舌组织的表达,此外对TCA8113细胞中PTP4A1的表达水平也进行了检测。结果:免疫组化结果显示,PTP4A1表达于舌鳞癌组织的细胞质和细胞核,在舌鳞癌组织中呈阳性和强阳性表达,而在正常舌组织中呈阴性和弱阳性表达;PTP4A1在舌鳞癌的阳性表达率为83%,显著高于其在正常舌组织中的表达率33.3%;PTP4A1在舌鳞癌组织和正常舌组织的表达差异有统计学意义(P=0.001<0.05);而且PTP4A1的表达水平与肿瘤的淋巴转移相关(P=0.014<0.05),而与病人的性别、年龄、肿瘤的大小、肿瘤的分期分级无明显相关。Real-time PCR实验结果显示舌鳞癌组织及舌鳞癌细胞系TCA8113细胞中的PTP4A1的mRNA表达水平高于其在癌旁和正常舌组织的表达,癌旁组织的表达高于正常舌组织的表达(P=0.000<0.05)。结论:PTP4A1基因mRNA水平和蛋白水平表达在舌鳞癌组织中表达均较癌旁和正常舌组织高,可能在舌鳞癌的发生发展过程中起着一定作用。
- 漆小娟季平潘丽时恩来徐望
- 关键词：人舌鳞状细胞癌免疫组织化学REAL-TIMEPCR
- 促肝细胞再生磷酸酶-1基因对舌癌细胞侵袭的影响
- 目的:探讨促肝细胞再生磷酸酶-1(Phosphatase of regenerating liver cel-1,PRL-1)对舌癌细胞侵袭能力的影响及其可能的机制.方法:应用siRNA-PRL-1慢病毒载体转染处理舌癌...
- 潘丽季平刘平时恩来徐望
- 关键词：舌癌基质金属蛋白酶
- 促肝细胞再生磷酸酶1基因对舌癌细胞侵袭的影响
- 2014年
- 目的:探讨促肝细胞再生磷酸酶1(phosphatase of regenerating liver cell-1,PRL-1)对舌癌细胞侵袭能力的影响及其可能的机制。方法:应用si RNA-PRL-1慢病毒载体转染处理舌癌TCA8113细胞株后,分别采用荧光定量PCR和蛋白质印迹检测PRL-1基因和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)m RNA和蛋白水平;采用Transwell小室模型实验检测癌细胞的侵袭能力。结果:si RNA-PRL-1慢病毒转染组癌细胞PRL-1在RNA(0.425 0±0.010 0)和蛋白(2.720 0±0.110 0)水平明显下调(P=0.000,P=0.000),同时MMP-2及MMP-9在RNA(0.562 2±0.180 0,0.617 1±0.100 0)及蛋白(0.592 4±0.010 0,0.476 2±0.020 0)表达水平降低(P=0.024,P=0.010,P=0.000,P=0.000);Transwell实验si RNA-PRL-1慢病毒转染组细胞通过数(64.33±4.04)明显减少(P=0.000)。结论:si RNA-PRL-1转染可抑制舌癌细胞侵袭,其机制可能与PRL-1基因下调MMP-2及MMP-9的表达有关。
- 潘丽季平刘平时恩来徐望
- 关键词：舌癌基质金属蛋白酶
- 慢病毒介导shRNA特异性沉默促肝细胞再生磷酸酶1基因表达抑制舌癌细胞迁移侵袭能力
- 2014年
- 目的:探讨特异性沉默促肝细胞再生磷酸酶1(phosphatase of regenerating liver cell-1,PRL-1)基因表达对舌癌细胞迁移、侵袭能力的影响。方法:设计、合成5条针对PRL-1基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)干扰序列,构建于慢病毒载体质粒中,PCR电泳及基因测序验证。转染293T细胞,Western blot筛选最佳干扰序列,包装产生慢病毒。转染TCA8113细胞,筛选、建立稳定转染细胞株;real-time PCR检测PRL-1基因沉默效率;划痕实验和Transwell实验分别比较慢病毒转染细胞(KD组)、空病毒转染细胞(NC组)及TCA8113细胞(CON组)迁移、侵袭能力变化。结果:PCR电泳及基因测序证实5条sh RNA序列定向插入慢病毒载体质粒中。Western blot筛选出PRL-1-sh RNA-1基因沉默效率最高,包装获得慢病毒滴度为7×108 TU/ml。通过转染、筛选,建立了TCA8113细胞稳定转染细胞株;real-time PCR测得PRL-1基因m RNA表达明显下降(F=809.120,P=0.000);PRL-1基因沉默后细胞迁移能力降低,穿过人工基底膜的细胞数KD组(25.5±0.4)明显少于NC组(81.5±2.0)和CON组(88.5±2.3)(F=1 092.970,P=0.000)。结论:沉默PRL-1基因表达能有效抑制舌癌细胞迁移、侵袭能力。
- 时恩来季平刘平潘丽徐望
- 关键词：短发夹RNATCA8113
- 5-氟尿嘧啶对人舌鳞癌Tca8113中肿瘤干细胞的富集作用被引量：2
- 2015年
- 背景:肿瘤对于化疗药物具有耐药性,而耐药性产生又与肿瘤干细胞密切相关。因此,如何靶向杀伤肿瘤干细胞,将成为口腔鳞癌治疗的关键。目的:探讨5-氟尿嘧啶对舌鳞癌Tca8113肿瘤细胞生物学特性的影响。方法:利用CCK-8实验检测不同质量浓度5-氟尿嘧啶对Tca8113细胞活性的影响,筛选相对较好的药物质量浓度和作用时间进行后续实验,以不添加5-氟尿嘧啶为对照组,流式细胞仪检测细胞周期及肿瘤细胞中侧群细胞比例的变化,划痕实验检测肿瘤细胞迁移能力变化。结果与结论:CCK-8检测显示:5-氟尿嘧啶对舌鳞癌Tca8113细胞系细胞的活性抑制呈时间及药物浓度的正相关关系,50 mg/L 5-氟尿嘧啶作用48 h时,细胞活性抑制效果相对较好。流式细胞仪细胞周期检测显示:实验组G0/G1期细胞比例较对照组明显升高(P=0.01),S期细胞较对照组下降(P=0.244),实验组G2/M期细胞完全消失(P=0.00)。5-氟尿嘧啶处理后侧群细胞比例较处理前明显升高(P=0.00)。细胞划痕实验显示实验组划痕愈合能力较对照组增强。结果表明5-氟尿嘧啶药物筛选人舌鳞癌Tca8113细胞可以作为富集类肿瘤干细胞的方法之一。
- 徐望季平
- 关键词：肿瘤干细胞氟尿嘧啶干细胞舌鳞癌5-氟尿嘧啶侧群细胞化疗耐药性肿瘤干细胞标志物
- siRNA沉默PTP4A1表达对人舌鳞癌细胞系TCA8113体内外生物学行为的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨特异性沉默人舌鳞癌细胞系TCA8113中PTP4A1基因的表达,并研究沉默该基因表达后对TCA8113细胞体内外生物学行为的影响。方法采用siRNA的慢病毒载体siRNA-PTP4A1作为阳性干扰组(KD),空病毒载体作为阴性对照组(NC),未作任何处理的TCA8113细胞作为空白对照组(CON)。Real-time PCR和Western blot检测PTP4A1基因的干扰效果,MTT法检测3组细胞的增殖能力,流式细胞技术分析3组细胞凋亡和细胞周期情况,平板克隆形成实验检测体外克隆形成能力,Western blot分别检测3组细胞抑制凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax的表达情况,3组细胞分别裸鼠成瘤后观察移植瘤的生长情况。结果 siRNA-PTPA1转染TCA8113细胞成功,Real-time PCR和Western blot检测PTP4A1基因的抑制率达到55%和60%以上(P<0.05);MTT结果显示KD组细胞增殖能力小于NC、CON组;细胞凋亡率也明显增加,KD组早期凋亡为(17.48±0.70)%,而NC、CON组的早期细胞凋亡率为(7.34±0.70)%和(4.86±0.25)%(P<0.01);KD组细胞周期阻滞在G1/G0和S期(P<0.05);Western blot结果显示Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),Bax蛋白表达增高(P<0.01);KD组体外克隆形成数小于NC、CON组(P<0.01);KD组裸鼠移植瘤的生长速度缓慢,质量和体积均小于NC、CON组(P<0.01)。结论 siRNA PTP4A1在体内外均能有效抑制舌鳞癌TCA8113细胞的恶性生物学行为,PTP4A1基因可能与舌鳞癌的发生、发展相关。
- 漆小娟季平潘丽时恩来徐望
- 关键词：TCA8113SIRNA生物学行为
