方佳琪
- 作品数：10 被引量：35H指数：4
- 供职机构：浙江大学医学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- pH吸附法纯化乳酸乳球菌素Lacticin LLC518被引量：3
- 2011年
- 对乳酸乳球菌素Lacticin LLC518在不同pH条件下产生菌的吸附作用进行研究,结果表明,pH 6.0时吸附率达100%,pH 2.0时吸附率为0。利用该特性,可将产生菌细胞从发酵液中分离,制备Lacticin LLC518粗制品。通过与硫酸铵沉淀样品进行对照,表明pH吸附法具有良好的分离效果,Lacticin LLC518的回收率为20%,纯化倍数高达83.02。
- 方佳琪竺德强柯芳芳陈晓琳张明
- 一种乳酸乳球菌和该乳酸乳球菌产生的抗菌肽以及该抗菌肽的用途
- 本发明涉及一种乳酸乳球菌和该乳酸乳球菌产生的抗菌肽以及该抗菌肽的用途，本发明中的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis subsp.lactis)LLC518，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保...
- 张明方佳琪陈丽园谢继辉倪敬田别怀周竺德强李翠李瑞胜祁克宗
- 清酒乳杆菌细菌素研究的现状及展望被引量：8
- 2011年
- 清酒乳杆菌不仅可作为发酵香肠的发酵剂赋予香肠良好的风味和品质,而且绝大多数清酒乳杆菌细菌素对食源性致病菌单核增生李斯特菌具有较强的抑制作用。清酒乳杆菌细菌素种类多,性质各异。本文分别从清酒乳杆菌细菌素的种类,肉制品环境对清酒乳杆菌和细菌素稳定性的影响以及清酒乳杆菌细菌素在食品中的应用研究进行了概述,为寻找新的具有良好性能的清酒乳杆菌细菌素提供了参考。
- 姜洁施波方佳琪陈晓琳祁克宗张明
- 关键词：清酒乳杆菌细菌素
- 钩端螺旋体M23超家族金属内肽酶生物学活性及致病相关性的研究被引量：2
- 2017年
- 目的 了解并确定问号钩端螺旋体黄疸出血型赖株LA2582 和LA2901 基因产物金属内肽酶活性及其致病相关性.方法 采用生物信息学软件分析LA2582 和LA2901 基因结构与功能.构建LA2582 和LA2901 基因胞外区原核表达系统,Ni-NTA 亲和层析法提纯目的重组表达产物rLA2582 和rLA2901.采用分光光度法检测rLA2582 和rLA2901 水解偶氮酪蛋白底物的活性.采用荧光分光光度法检测rLA2582 和rLA2901 水解Dabsyl-Leu-Gly-Gly-Gly-Ala-Edans 荧光标记五肽底物的活性并测定其Km 和Kcat 值.采用SDS-PAGE 和分光光度法分别检测rLA2582 和rLA2901 水解细胞外基质（ECM）分子Ⅰ型胶原蛋白（COL1）、纤维连接蛋白（FN）和刚果红标记弹性蛋白（ELN）的活性.采用实时荧光定量RT-PCR 和Western blot 法分别检测问号钩端螺旋体赖株感染人脐静脉内皮细胞（HUVEC）后LA2582 和LA2901 基因mRNA 和蛋白质表达水平.结果 LA2582 和LA2901 基因产物均为含信号肽和HXH 基质金属蛋白酶基序的锌离子依赖M23 家族Gly-Gly 金属内肽酶.rLA2582 和rLA2901 不能水解偶氮酪蛋白,但能水解荧光五肽底物,其Km 和Kcat 值分别为126. 54μmol/ L 和4. 67/ s 、190. 25 μmol/ L 和4. 86/ s .rLA2582 和rLA2901 具有水解COL1、FN 和ELN 的活性.问号钩体赖株感染HUVEC 后,LA2582 和LA2901 基因mRNA、蛋白质表达水平均显著升高（P〈0. 05）.结论 问号钩体赖株LA2582 和LA2901 基因产物是具有水解ECM 分子活性的锌离子依赖M23 金属内肽酶,与问号钩体侵袭力密切相关.
- 张颖颖葛玉梅方佳琪林旭瑷胡玮琳严杰
- 关键词：问号钩端螺旋体生物学活性
- 细菌素的制备及其应用被引量：2
- 2011年
- 近年来,具有抑菌活性的细菌素被发现在食品防腐保鲜、疾病治疗和其他许多相关方面有着广泛的应用价值,各种制备细菌素的方法也被广泛报道。本文概述了细菌素的制备方法以及其在诸多领域中的应用。
- 方佳琪别怀周陈晓琳张明
- 关键词：细菌素
- 钩端螺旋体脂多糖诱生炎性细胞因子及小鼠感染组织中单核-巨噬细胞浸润被引量：5
- 2016年
- 目的：了解问号钩端螺旋体脂多糖（ L-LPS）诱导人单核细胞或小鼠单核-巨噬细胞产生炎性细胞因子的作用以及问号钩端螺旋体感染后小鼠内脏组织中外周血单核-巨噬细胞浸润情况。方法采用酚水法提取问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株L-LPS并用鲎试验测定其内毒素活性。采用细胞因子抗体芯片，检测L-LPS作用或问号钩端螺旋体赖株感染后人THP-1单核细胞株或小鼠J774A.1单核-巨噬细胞产生细胞因子情况。分别采用HRP标记外周血单核-巨噬细胞特异性CD68抗体免疫组化法和细胞因子抗体芯片，分别检测问号钩端螺旋体赖株感染C3H/HeJ小鼠肺、肝、肾组织中单核-巨噬细胞浸润情况以及血清细胞因子水平。结果 L-LPS凝固鲎试剂活性约为大肠埃希菌脂多糖（E-LPS）的1/5。 L-LPS作用后THP-1或J774A.1细胞分别有29和9种细胞因子水平明显升高（P〈0.05或P〈0.01），其中主要促炎细胞因子为IL-6和TNF-α，同时包含多种单核-巨噬细胞趋化因子表达增强。问号钩端螺旋体感染细胞上清或感染小鼠血清中细胞因子检测结果与L-LPS作用细胞相似。问号钩端螺旋体赖株感染小鼠后，肺、肝、肾组织中出现大量外周血单核-巨噬细胞浸润。结论 L-LPS具有很强的诱导单核-巨噬细胞上调多种促炎细胞因子和单核-巨噬细胞趋化因子表达的作用，单核-巨噬细胞是问号钩端螺旋体感染小鼠内脏组织中浸润的主要炎症细胞。
- 胡小伟陈旭方佳琪李凯旋赵金方严杰
- 关键词：问号钩端螺旋体脂多糖炎性细胞因子单核-巨噬细胞
- 病原菌耐药信号传导机制及多抗原肽疫苗研究进展与发展趋势被引量：12
- 2013年
- 细菌耐药性是当前人类面临的重大医学问题之一。接种疫苗是预防各种传染病最为经济和有效的措施,也是预防和控制耐药性病原菌感染相关传染病的有效途径。文中介绍了病原菌耐药相关信号传导机制及新型多抗原肽疫苗研究进展,并分析了其发展趋势,以供相关领域研究者参考。
- 孙爱华方佳琪严杰
- 关键词：甲型副伤寒副结核分枝杆菌肽类药物耐受性病原菌
- 一种乳酸乳球菌和该乳酸乳球菌产生的抗菌肽以及该抗菌肽的用途
- 本发明涉及一种乳酸乳球菌和该乳酸乳球菌产生的抗菌肽以及该抗菌肽的用途，本发明中的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis subsp.lactis)LLC518，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保...
- 张明方佳琪陈丽园谢继辉倪敬田别怀周竺德强李翠李瑞胜祁克宗
- 文献传递
- 甲型副伤寒沙门菌h1a-spaO融合基因构建及其表达产物免疫保护作用被引量：5
- 2014年
- 目的：构建甲型副伤寒沙门菌h1a-spaO融合基因及其原核表达系统，确定重组表达产物rH1a-SpaO免疫保护作用。方法采用柔性肽序列连接引物PCR构建并扩增h1a与spaO基因的融合基因h1a-spaO，T-A克隆后测序。采用常规基因工程方法构建h1a-spaO融合基因原核表达系统，SDS-PAGE检测其rH1a-SpaO表达情况。采用Westernblot鉴定rH1a-SpaO抗原性和免疫反应性，微量肥达试验确定rH1a-SpaO抗血清凝集甲型副伤寒沙门菌的能力。采用小鼠感染模型了解rH1a-SpaO对甲型副伤寒沙门菌致死性感染的保护作用并与等量单一重组表达蛋白H1a（rH1a）及SpaO（rSpaO）比较。结果所构建的h1a-spaO融合基因与单一h1a或spaO基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为100％。h1a-spaO融合基因原核表达系统能高效表达rH1a-SpaO。rH1a-SpaO能与rH1a或rSpaO抗血清结合，rH1a-SpaO抗血清也能识别rH1a和rSpaO并经H抗原凝集甲型副伤寒沙门菌。100μgrH1a-SpaO对甲型副伤寒沙门菌感染小鼠的免疫保护率（93．3％）明显高于等量rH1a（60．0％）及rSpaO（53．3％）（P＜0．05）。结论重组融合蛋白抗原rH1a-SpaO免疫保护作用较等量单一rH1a或rSpaO更强，可作为甲型副伤寒两价基因工程疫苗或伤寒/副伤寒荚膜多糖-蛋白结合疫苗的有效抗原。
- 金蕾蒋锦琴方佳琪林旭瑷严杰孙爱华
- 关键词：甲型副伤寒沙门菌免疫保护性
- 乳酸菌细菌素LLC518的分离纯化及制备
- 细菌素是一些细菌产生的抑菌物质，具有作为食品防腐剂以提高食品安全性的潜在应用价值。本文对Lacticin LLC518的吸附特性、作用方式、毒理学特性、分离纯化方法及其喷雾干燥条件进行了研究，为Lacticin LLC5...
- 方佳琪
- 关键词：细菌素纯化喷雾干燥
- 文献传递
