朱德厚
- 作品数：10 被引量：24H指数：3
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细胞培养中支原体污染的去除被引量：2
- 1995年
- 在运用细胞培养手段的生物学研究和生物工程产品中,支原体污染仍是一个颇为棘手的问题。11株人的细胞SPC—A1、K562、HUT-102、BT—325、6T—CEM、NKM—45、CNE、HL—60、QGY—7701、QZG、人羊膜细胞;3株小鼠细胞P388—1、YAC—1、P815;1株绒猴细胞B95—8;和一株杂交瘤QKT3等,已污染了支原体的细胞经MC—210 1μg/ml处理7天,支原体污染全部转阴性。去除了支原体的细胞株经一年的培养、传代、冻存复苏,多次支原体检测始终阴性。对去除了支原体的SPC—A1、K562、HUT—102、B95—8等细胞株测试了其相关特性,均未见受影响。人为用口腔支原体、猪鼻支原体、精氨酸支原体分别感染小鼠骨髓瘤Sp2/0和非洲绿猴肾细胞株Vero,然后经MC—210处理,支原体全部去除,且不影响Sp2/0在制备杂交瘤时的融合率和抗体的分泌。
- 吕沅冈喻峰朱德厚葛锡锐
- 关键词：细胞培养支原体MC-210
- 表面表位包埋法制备肿瘤表面抗原P185^(neuc-erbB-2)单克隆抗体及其性质研究被引量：14
- 2000年
- 目的 :细胞表面表位包埋法 (SEM)是一种选择细胞表面特定的表达分子制备单克隆抗体的新途径。由于P185 neu c erbB 2 是乳腺癌及其他肿瘤的一个重要表面标志 ,这个研究旨在应用SEM法制备特异性好 ,灵敏度高的P185单克隆抗体并分析其特性以便于临床。方法 :采用细胞表面表位包埋法免疫BALB C小鼠 ,常规杂交瘤技术进行细胞融合 ,ELISA法测定 ,有限稀释法克隆化。结果 :筛选得到 3株能稳定分泌抗人癌基因erbB 2产物P185蛋白的McAb杂交瘤细胞。经间接免疫过氧化物酶染色和流式细胞术分析证明该McAb特异性与P185阳性细胞膜结合 ,而不与结构类似的EGFR膜阳性细胞结合。免疫印迹实验证明这些McAb特异地与P185蛋白结合 ,病理切片免疫组化结果证明该单抗对乳腺癌组织呈特异膜阳性反应。结论 :SEM法制备的肿瘤表面抗原P185的McAb杂交瘤具有很好的用于临床诊断肿瘤抗原P185的价值及工程化改造的前景。
- 王琛李昀李平刘兢杨正洪吕源冈朱德厚张荣兴姚阳吴强管伟宁杨枫
- 关键词：单克隆抗体
- 抗卵巢上皮癌单克隆抗体的制备和鉴定被引量：1
- 1997年
- 以人的浆液性卵巢上皮癌细胞系HO－8910为抗原，制备分泌抗卵巢癌单克隆抗体的杂交瘤，经间接免疫荧光组化鉴定证实。制备的单克隆抗体0C1C3与HO-8910呈强阳性反应，与其他肿瘤细胞系则无反应或反应极弱。在冰冻切片中，单克隆抗体OC1C3与卵巢恶性肿瘤呈强阳性反应（7／8），与绒癌有部分交叉反应（1／2），与正常卵巢和胚胎组织无反应。结果表明OC1C3是卵巢恶性肿瘤的一种特异性抗原的单克隆抗体。为进一步改善卵巢恶性肿瘤的免疫诊断方法提供了有利的基础。
- 陈亚宝吕元杨正洪朱德厚张荣兴
- 关键词：单克隆抗体卵巢癌
- 动物细胞株系的质量控制 一、新生牛血清质量的检测
- 哺乳动物细胞培养,不仅是细胞生物学领域内一种常用的研究手段,而且近年来巳成为重要的生物工程技术。各种杂交瘤所分泌的单克隆抗体和转基因细胞的产物巳开始在生物学和医学上得到应用。迄今,常规哺乳动物细胞培养液都以不同的基础培养...
- 朱德厚杨正洪高效群喻峰
- 文献传递
- 动物细胞株系的质量控制 三、动物细胞株系种间污染的同功酶检测
- 随着细胞系数量的日益扩大,长期培养的细胞系之间存在交叉污染的潜在危险性也会增加。细胞株系的种属鉴定巳成为细胞库质量控制的组成部分。
- 吕源冈高效群张荣兴徐绍嫣朱德厚
- 文献传递
- 抗p185单克隆抗体的制备及其在乳腺癌诊断中的应用
- 2000年
- 姚阳官伟宁吴强杨枫刘兢王琛李昀杨正洪吕沅冈朱德厚
- 关键词：乳腺癌
- HeLa细胞和BHK细胞实验交叉污染消涨规律的探讨被引量：1
- 1994年
- 本文用抗中间丝蛋白的免疫荧光染色和细胞在不同条件下的生长曲线测定,对HeLa细胞和BHK-21细胞实验交叉污染系统中两种细胞的消涨规律进行了初步探讨。结果表明:当BHK-21细胞实验污染HeLa细胞后,其消涨趋势总是BHK-21细胞不断被HeLa细胞所淘汰。其主要原因是HeLa细胞的生长速率明显比BHK-21细胞高,其次是HeLa细胞可能能分泌某种抑制BHK-21细胞生长的因子,而两种细胞的营养竞争可能对BHK-21细胞的被淘汰不是主要原因。
- 张荣兴林晓旭朱德厚
- 关键词：HELA细胞BHK细胞细胞系
- 撤除粒-巨噬细胞集落刺激因子对TF-1细胞生长的影响被引量：4
- 2003年
- 采用MTT实验测定撤除细胞因子后TF 1细胞的增殖活性 ,经流式细胞仪、透射电镜观察撤除细胞因子对TF 1细胞凋亡的作用及其形态学变化。采用荧光微孔板读数仪测定凋亡过程中Caspase 3活性的改变。结果发现 ,撤除细胞因子后 4 8h ,细胞存活率为正常培养时的 4 8 8% ;电镜显示TF 1细胞出现了凋亡典型的变化。细胞凋亡率在撤除因子后 2 4h、4 8h时分别为 2 1 2 3%和 71 36 % ,TF 1细胞被阻滞在G0 G1 期。细胞内Caspase 3活性在撤除因子后 12h、36h时明显升高 ,荧光度分别为 6 32 1和 1782 3。结果表明 ,撤除因子后可导致TF 1细胞凋亡 ,Caspase 3活化参与了此凋亡过程。另外通过MTT实验观察到一种新型造血刺激因子粒 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF) 白细胞介素 3(IL 3)融合蛋白可维持TF
- 杨素荣文莉孙兰英朱德厚姚明辉
- 关键词：粒-巨噬细胞集落刺激因子细胞凋亡CASPASE-3白细胞介素3融合蛋白
- 用Ciprofloxacin去除传代细胞株中的支原体污染的研究被引量：3
- 1995年
- 在应用细胞培养手段的生物学研究和生物工程产品中,支原体污染仍是一个非常棘手的问题。对Vero和SP 2/0-Ag 14等细胞,应用Ciprofloxacin,10μg/ml处理14天,支原体检测全部转阴,经4个月的培养、传代、冻存、复苏,每次支原体检测均保持阴性。对去除了支原体的Vero和LSC-116细胞株,测试了其生长特征和功能,均未见受影响。
- 陈如颖喻峰朱德厚
- 关键词：细胞培养CIPROFLOXACIN
- 动物细胞株系的质量控制 四、杂交瘤细胞分泌活性的ELISA检测
- 随着生物工程技术的迅速发展,中国科学院细胞库引进和收藏工程细胞-杂交瘤的比重日益增大。控制其质量的指标在于是否分泌针对对一个抗原决定簇的均质的单克隆抗体。因种种原因,这种分泌性能可减弱或丢失。为此对杂交瘤细胞分泌活性的检...
- 陈如颖张荣兴朱德厚
- 文献传递
