公共文化服务平台

共 8 条记录，以下是 1-8

全选清除导出

排序方式：

鸭出血症病毒间接ELISA检测方法的建立与应用被引量：1: 2013年; 为了建立快速检测鸭出血症病毒(DHDV)的血清学方法,本试验利用浓缩纯化的DHDV作为包被抗原,建立了检测DHDV血清抗体的间接ELISA方法,并对各种检测条件进行了优化。试验结果表明,抗原最佳稀释浓度为7.06μg/孔;最佳包被条件为37℃1h后,4℃包被过夜;待检血清的最佳稀释倍数为1∶25。在优化条件下,阴阳性临界值判定标准为0.44。建立的ELISA方法对鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒、雏番鸭细小病毒和番鸭呼肠孤病毒阳性血清均无交叉反应,结果表明该方法具有良好的特异性。批内和批间重复性试验的最大变异系数分别为0.0221、0.0032,显示该方法具有很好的稳定性,与血清中和试验的符合率为100%。该方法快速、简单、特异性好、重复性好,可用于大批量监测鸭群DHDV血清抗体感染情况。; 朱海侠万春和黄瑜程龙飞施少华傅光华陈红梅; 关键词：间接ELISA 抗体

一株鹅细小病毒全基因特征分析被引量：16: 2011年; 根据GenBank登录的鹅细小病毒基因序列和基因组结构特征，采用PCR技术扩增获得一株鹅细小病毒株（Goose parvovirus，GoPV）全基因序列，为中国大陆地区首次报道。GoPV株病毒全基因大小为5106nt，其基因组5’端和3’端均含有相同的末端倒置重复序列（inverted terminal repeats, ITR），ITR全长为444nt。GoPV基因组主要由左右两侧两个开放阅读框组成，左侧编码非结构蛋白（non-structureprotein，NS）NSl和NS2，右侧编码3种结构蛋白（viral structural protein，VP）VP1、VP2和VP3。NS基因全长为1884nt（537-2420nt），其中NS2全长1356nt（1065～2420nt）；VP基因全长2199nt（2439-4637nt），其中Ⅵ叼全长1764nt（2874-4637nt），VP3全长1605nt（3033-4637nt），在其右侧的ITR前有一个Poly（A）的尾。GoPV株病毒全基因和欧洲疫苗株（EU583392（VG32／1，Europe））核苷酸同源性最高，高达98．6％。本研究为进一步研究GPV分类地位以及进化关系提供依据，也为研究GPV强毒株和疫苗株之间生物学特性以及GPV治病机理和开发基因工程疫苗奠定基础。; 万春和朱海侠黄瑜彭春香程龙飞施少华傅光华陈红梅; 关键词：鹅细小病毒全基因分子特征

鸭出血症弱毒活疫苗免疫功能研究: 鸭出血症是20世纪90年代以来在我国福建、浙江和广东等省发生的以鸭双翅羽毛管和喙及爪尖出血呈暗紫色、脏器和肠道出血为主要特征的传染病，命名为鸭出血症（DHD）。该病毒属于疱疹病毒科成员，鉴于与鸭瘟病毒（鸭疱疹病毒Ⅰ型）存...; 朱海侠; 关键词：免疫器官指数; 文献传递

鹅细小病毒基因组结构特征研究进展被引量：14: 2011年; 鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)属细小病毒科,细小病毒属,由我国学者方定一1956年首次分离报道。GPV基因组约5 Kb,由左右2个完整的开放阅读框(open reading frame,ORF)组成:LORF(left ORF)和RORF(right ORF)。LORF编码非结构蛋白(nonstructural protein,NS)NS1和NS2,RORF编码VP1、VP2和VP3三种结构蛋白。本文针对近年来鹅细小病毒基因组结构特征的研究进展进行了综述。; 朱海侠万春和黄瑜; 关键词：鹅细小病毒基因组结构非结构蛋白结构蛋白

番鸭IFN-α mRNA实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：3: 2012年; 根据GenBank中鸭IFN-α基因（GenBank登录号：JF894229）序列设计并合成引物,并以鸭β-actin基因（GenBank登录号：GU564232）为内参,采用SYBR Green I染料法,建立检测鸭IFN-αmRNA的实时荧光定量Real-time PCR方法（RT-PCR）。将IFN-α和β-actin基因分别克隆至pMD18-T载体上,鉴定出阳性重组质粒为标准品（p-IFN-α和p-β-actin）,分别建立番鸭IFN-α和β-actin实时荧光定量RT-PCR方法。结果表明,Ct值在13.27~27.54与11.86~25.32范围内呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99（r〉0.99）,扩增产物的熔解曲线分析均各自只出现1个特异性单峰,无引物二聚体,Tm值分别为（93.6±0.26）℃和（85.3±0.15）℃,最低检测限分别为9.37×102copies/μL和3.71×101copies/μL,检测周期从样品的处理到荧光定量PCR结束仅需4 h左右。本研究建立的鸭IFN-α基因实时荧光定量PCR灵敏度高、特异性强、检测周期短,为番鸭IFN-αmRNA的定量分析奠定了基础。; 万春和朱海侠陈红梅施少华傅光华程龙飞黄瑜; 关键词：实时荧光定量RT-PCR 番鸭 IFN-Α Β-ACTIN

一株鹅细小病毒全基因特征分析: 本研究根据GenBank登陆的鹅细小病毒基因序列和基因组结构特征，采用PCR技术扩增获得一株鹅细小病毒株(GoPV)全基因序列，为我国大陆地区首次报道。结果表明，GoPV株病毒全基因大小为5106 nt，其基因组5’端和...; 万春和朱海侠黄瑜彭春香程龙飞施少华傅光华陈红梅; 关键词：鹅细小病毒全基因序列分子特征

鸭坦布苏病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量检测方法的建立被引量：21: 2013年; 根据鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DFV)NS5基因序列特征设计引物,建立基于SYBR GreenⅠ检测模式的实时荧光定量RT-PCR(real-time RT-PCR,RRT-PCR),该方法检测DFV NS5基因2.74×103～2.74×107拷贝/μL反应范围内有很好的线性关系。扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm值为(86.23±0.18)℃,对禽流感病毒、鸭肝炎病毒、鸭源禽1型副黏病毒、鸭减蛋综合征病毒、番鸭呼肠孤病毒核酸均无阳性信号扩增,可重复性好,组内变异系数为0.52%～1.48%,组间变异系数0.71%～2.21%。检测速度快,从样本处理到报告结果仅需4h。; 万春和朱海侠施少华黄瑜程龙飞傅光华陈红梅; 关键词：SYBR 实时荧光定量RT-PCR

番鸭IFN-α基因的克隆与序列分析被引量：2: 2011年; 采用RT-PCR方法从番鸭肺脏器官中扩增IFN-α基因片段,将扩增产物经胶回收后克隆到pMD18-T载体上,经PCR和双酶切鉴定为阳性后进行序列测定,并用Lasergene v7.1DNAStar软件对测序结果进行分析。结果表明,所扩增的IFN-α基因编码完整的开放阅读框,基因长度为576bp,为国内外首次报道。并与GenBank中登录的各品种鸭、鹅IFN-α基因核苷酸序列进行同源性比较分析,其同源性分别在97.0%～97.7%和95.5%～97.7%;遗传进化分析表明,鸭和鹅IFN-α基因在遗传进化上呈各自独立的分支,推测IFN-α基因在不同动物中有严格的种属特异性。; 朱海侠万春和黄瑜施少华程龙飞傅光华陈红梅; 关键词：番鸭 Α干扰素

全选清除导出

共1页<1>

朱海侠