李国华
- 作品数：11 被引量：28H指数：3
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：兵团博士基金国家科技重大专项家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 西尼罗病毒病重组乙型脑炎病毒载体疫苗的构建及实验免疫研究
- 西尼罗病毒病(West Nile virus disease,WND)是由西尼罗病毒(WNV)经蚊虫叮咬感染动物和人的、以西尼罗热(WNF)和西尼罗脑炎(WNE)为主要临床症状的人兽共患传染病。自1999年在美国纽约暴发...
- 李国华
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒西尼罗病毒重组疫苗
- 文献传递
- 鼠源Bif-1蛋白7种选择性剪接异构体真核表达质粒的构建及鉴定被引量：1
- 2017年
- 目的构建鼠源Bif-1(Bax-interacting factor-1)蛋白7种选择性剪接异构体(alternatively spliced isoforms)真核表达质粒,并在BHK和N2a细胞中表达。方法以提取的N2a细胞总RNA为模板,采用RT-PCR、重叠延伸PCR等方法扩增目的基因Bif-1(transcript variant 1、transcript variant 2、transcript variant 3、transcript variant x1、transcript variant x2、transcript variant x3、e),并将目的基因连入真核表达载体p IRES2-EGFP,构建重组质粒。重组质粒经鉴定正确后经脂质体介导转染BHK和N2a细胞,采用荧光显微镜观察及Western blot法检测转染细胞中Bif-1蛋白的表达。结果琼脂糖凝胶电泳可见与预期大小相符的核酸条带;重组质粒经PCR、双酶切、测序鉴定证明构建正确;重组质粒转染BHK或N2a细胞后荧光显微镜下可见绿色荧光;Westen blot可检出相应大小的目的条带。结论成功构建了鼠源Bif-1蛋白7种选择性剪接异构体真核表达质粒,并在BHK和N2a细胞中获得表达。为进一步探索Bif-1蛋白不同选择性剪接异构体的生物学功能,研究其在细胞自噬、细胞凋亡以及抗肿瘤等方面的作用奠定了基础。
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- 关键词：真核细胞基因表达
- 埃博拉病毒抗体间接血凝检测方法的建立
- 2019年
- 以纯化后的埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)糖蛋白(GP)作为抗原,致敏醛化的绵羊红细胞,进行最佳反应条件优化,建立间接血凝抗体检测方法。以EBOV高免马血清、纯化的IgG和精制免疫球蛋白F(ab’)_2为待检样品进行检测,并将检测结果与假病毒中和试验检测结果相比较。结果显示,该方法可特异性检测EBOV抗体,与马尔堡病毒、裂谷热病毒等的阳性血清均不发生反应;与假病毒中和试验测得的抗体效价增长规律相一致。结果表明,本试验成功建立了EBOV抗体间接血凝检测方法,该方法安全、简便、快捷,为EBOV疫苗免疫后的效果评价提供了又一新的检测方法。
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- 关键词：埃博拉病毒间接血凝试验
- 西尼罗病毒E蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：1
- 2020年
- 利用PCR技术扩增西尼罗病毒(WNV)E蛋白基因并将其插入原核表达载体pET-30a(+),构建重组质粒pET-30a(+)-WNV-E,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导目的蛋白表达,对诱导条件进行优化,利用His镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,纯化后的蛋白经SDS-PAGE与Westernblot鉴定正确后,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体并进行间接免疫荧光鉴定。结果显示:WNV E蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式被成功表达,蛋白最佳诱导条件为37℃,0.8 mmol/L IPTG诱导5 h,经间接免疫荧光鉴定多克隆抗体能特异性识别WNV E蛋白。本研究成功表达并纯化了WNV E蛋白,证明该蛋白具有良好的免疫原性,为WNV抗原、抗体检测方法的建立和新型疫苗的研发及相关研究奠定了基础。
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- 关键词：西尼罗病毒原核表达E蛋白多克隆抗体
- 奶牛乳房炎防治的新进展被引量：13
- 2011年
- 奶牛乳房炎是高产奶牛最常见的疾病,对奶业的发展危害严重。近年来,国内外学者对该病开展了大量的研究工作,作者对奶牛乳房炎的研究进展作一综述,为该病的科学防治提供有益的参考。
- 李国华李贞乔军陈创夫
- 关键词：奶牛乳房炎
- 埃博拉病毒病抗原反向间接血凝检测方法的建立
- 2019年
- 为建立埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)抗原快速检测方法,本研究利用纯化后的埃博拉病毒样颗粒(EBOVVLPs)免疫马匹制备阳性血清,采用饱和硫酸铵沉淀法初纯血清中的IgG,后经过Protien G柱亲和层析法精纯IgG,利用精纯后的IgG致敏醛化的绵羊红细胞,建立反向间接血凝抗原检测方法,并对该方法进行最佳反应条件的优化。将该方法用于不同批次制得的已知病毒滴度埃博拉假病毒血凝效价检测,检测结果显示:病毒滴度的高低与血凝效价检测结果呈现良好的相关性。本研究成功建立埃博拉病毒抗原反向间接血凝检测方法,该方法简单、方便、快捷,无需特殊的仪器设备,1h内便可报告检测结果,在普通实验室中便可进行操作。此外,该方法也适用于埃博拉病毒感染及疫病暴发后临床样品的定性分析。
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- 关键词：埃博拉病毒抗原检测
- 链球菌GapC基因重组痘苗病毒的构建及筛选与鉴定被引量：1
- 2012年
- 为了研制链球菌性奶牛乳房炎的有效疫苗,首先用PCR方法扩增出停乳链球菌的GapC基因。其次将GapC基因连接到pSC11穿梭质粒上,构建pSC11-GapC重组穿梭质粒。然后在脂质体的介导下将pSC11-GapC转染已感染痘苗病毒的BHK-21细胞,使之与痘苗病毒基因在BHK-21细胞内进行同源重组,得到GapC重组痘苗病毒,用rVV-GapC表示。最后用蓝斑法连续筛选5次rVV-GapC重组毒,再用PCR和Western blot分别检测rVV-GapC的重组和表达情况。结果显示,PCR电泳检测到目的条带,测序结果与GenBank公布的标准序列同源性99%,Western blot试验证明GapC蛋白在重组毒中进行了表达。rVV-GapC构建成功。重组痘苗病毒的构建为链球菌性奶牛乳房炎疫苗的研究奠定基础。
- 李国华李贞乔军陈创夫才学鹏孟庆玲丁波
- 关键词：痘苗病毒
- 埃博拉病毒研究进展
- 2016年
- 埃博拉是由埃博拉病毒所引起的一种人和灵长类动物出血、发热、腹泻等为临床特征的烈性传染病。该病在非洲国家广泛流行,发病率和死亡率均较高,给人们健康带来了极大威胁。近年来,世界各国研究人员对埃博拉病毒、传播途径、致病机理和预防措施等开展许多研究工作。本文从病原学、流行病学、临床症状、病理变化、病毒重要蛋白功能、疫苗研究几方面进行综述。
- 李国华夏咸柱
- 关键词：埃博拉病毒病原学流行病学疫苗
- 尼帕病毒病的流行现状与防治研究进展被引量：6
- 2018年
- 尼帕病毒病(Nipah virus disease, NVD)是一种急性接触性、高致死性人兽共患传染病。临床症状主要表现为发热、头痛、脑炎及咳嗽等。1998年在马来西亚和新加坡先后出现,1999年分离并确诊其病原为尼帕病毒。之后该病在印度、孟加拉国多次暴发。2018年5月,印度再次暴发NVD疫情,给人们造成了极大恐慌。本文以该病的流行情况和防治研究进展为重点,从病原学、流行病学、临床症状、病理变化、实验室诊断及防治等方面介绍其研究进展。
- 李国华王化磊张颖张颖杨松涛夏咸柱
- 关键词：尼帕病毒尼帕病毒病流行病学疫苗抗体
- 表达链球菌主要保护性抗原的重组痘苗病毒的构建及免疫原性研究
- 奶牛乳房炎是影响奶牛生产性能的一种重要疾病，据统计该病占到奶牛一般疾病导致的直接损失的38％。由于我国奶牛以农户散养为主，饲养管理、卫生等措施不完善等，奶牛乳房炎导致的经济损失要远高于38%。国内外学者研究发现，引起奶牛...
- 李国华
- 关键词：奶牛乳房炎链球菌保护性抗原基因工程疫苗重组痘苗病毒免疫原性
- 文献传递
