李砚
- 作品数：11 被引量：15H指数：3
- 供职机构：第三军医大学大坪医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
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- 沉默PKCδ表达对L02肝细胞脂肪变性和内质网应激的影响被引量：1
- 2014年
- 目的研究蛋白激酶Cδ亚型(protein kinase Cδ,PKCδ)与肝细胞脂肪变性、内质网应激的关系,探讨其在非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)发病机制中的作用。方法用混合脂肪酸构建人正常肝细胞L02脂肪变性模型,油红O染色和甘油三酯(TG)试剂盒检测细胞脂变程度,实时荧光定量PCR检测PKCδ、Bip、XBP-1s mRNA表达,Western blot检测其蛋白表达。通过siRNA瞬时转染技术沉默PKCδ在L02细胞中的表达后观察上述指标表达变化。结果油酸和棕榈酸酯2∶1混合比例能够成功诱导肝细胞脂肪变性,与对照组单个细胞脂变面积(14.47±9.28)和TG含量(2.30±0.62)μg/mg相比,脂肪酸16 h组脂变面积(333.06±42.36)和TG含量(30.86±6.24)μg/mg均显著增加(P<0.05)。脂肪酸组肝细胞PKCδ、Bip、XBP-1s mRNA和蛋白表达水平较对照组显著升高(P<0.05),具有时间依赖性。在相同脂肪酸诱导液处理的条件下,PKCδsiRNA转染组细胞脂变程度(30.92±1.29)%较对照组(55.32±6.58)%明显减轻(P<0.05),且PKCδsiRNA转染组Bip、XBP-1s的表达较对照siRNA转染组明显降低。结论 PKCδ在NASH形成发展中发挥重要作用,沉默PKCδ能够通过抑制内质网应激减轻肝细胞脂肪变性程度。
- 赖姝婕王军王斌魏艳玲熊吉李青李砚樊丽琳陈东风
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎蛋白激酶C肝细胞脂肪变性内质网应激
- 非酒精性脂肪性肝病对男性生殖功能的影响及机制探讨
- 来，非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发病率逐年升高，带来的健康危害也越来越严重，已成为当今全球性的社会和医学问题。国内外众多研究表明，NAFLD可以对除肝脏以外的系统，如肾脏、甲状腺和心血管系统等产生影响，学者的既往研究...
- 李砚王涛熊吉王军赖殊婕陈东风
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病生殖功能临床干预
- 脂肪肝的危害不止于肝脏被引量：2
- 2013年
- 近年来，脂肪性肝病发病率逐年升高，成为一个倍受关注的健康话题。早期脂肪性肝病患者没有明显的临床症状，一般是在作B超检查时才发现，因此容易被忽视。如任其发展，其引起的并发症可明显威胁人民群众的生命。脂肪性肝病到底有哪些危害呢？
- 李砚陈东风
- 关键词：脂肪肝脂肪性肝病肝脏肝病患者B超检查
- Norrin对胃癌细胞凋亡的抑制作用
- 刘磊王斌李砚
- 非酒精性脂肪性肝病与男性生殖健康
- 2016年
- 近年来，非酒精性脂肪性肝病fNAFLD）发病率逐年升高，带来的健康危害也越来越严重，已成为当今全球性的社会和医学问题。最新研究表明，NAFLD的危害不止于肝脏，对肾脏、甲状腺、心血管和生殖系统等也有不同程度的影响。目前NAFLD的多系统损害研究日益引起广泛关注，现就NAFLD对男性生殖健康的影响作一简要介绍。
- 李砚陈东风
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病男性生殖健康NAFLD多系统损害生殖系统发病率
- 非酒精性脂肪性肝病对男性生殖功能的影响及机制探讨
- <正>近年来,非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发病率逐年升高,带来的健康危害也越来越严重,已成为当今全球性的社会和医学问题。国内外众多研究表明,NAFLD可以对除肝脏以外的系统,如肾脏、甲状腺和心血管系统等产生影响,学者...
- 李砚王涛熊吉王军赖殊婕陈东风
- 文献传递
- 肝细胞脂肪变性模型中Sec61α的表达及可能作用机制被引量：4
- 2014年
- 目的探讨肝细胞脂肪变性模型中Sec61α的表达及可能机制。方法用软脂酸与油酸混合物诱导L02肝细胞发生脂肪变性,建立非酒精性脂肪性肝病肝细胞体外模型,按0、2、4、8、12 h及16 h收获细胞;随后应用Sec61抑制剂EeyarestatinⅠ处理肝细胞,分为正常对照组、脂肪变性组、DMSO组及抑制剂组,通过油红O染色、qRT-PCR及Western blot检测Sec61α、GRP78、GRP94、及Bcl-2的表达变化。结果软脂酸与油酸混合物成功诱导肝细胞发生脂肪变性。与对照细胞相比,脂肪变肝细胞Sec61αmRNA相对表达量在脂肪变早期下降(2、4 h,P>0.05),晚期升高(8、12 h,P<0.05);GRP78在8 h开始升高,16 h达峰(P<0.01)。Sec61α与GRP78的蛋白水平与mRNA水平表达在时间梯度上变化一致。EeyarestatinⅠ处理显著减轻肝细胞脂肪变程度;与脂肪变性组相比,抑制剂组肝细胞Sec61α、GRP78明显降低(P<0.01),GRP94、Bcl-2则显著升高(P<0.01)。结论 Sec61α可能通过调节肝细胞内质网应激,参与肝细胞脂肪变的形成。
- 王军黄殿静赖姝婕熊吉魏艳玲李青李砚陈潇迪王斌陈东风
- 关键词：脂肪变性内质网应激GRP78GRP94BCL-2
- 肝星状细胞具有向肝细胞样细胞分化的干细胞潜能被引量：4
- 2013年
- 目的探讨肝星状细胞是否能体外诱导分化为肝细胞样细胞以及在这过程中某些干细胞标记物的表达和变化。方法采用标准胶原酶灌注联合percoll密度梯度离心法提取并纯化原代大鼠肝星状细胞,免疫荧光鉴定细胞表型;将原代肝星状细胞分为对照组和实验组进行体外培养,对照组肝星状细胞不加任何细胞因子培养24 h,实验组肝星状细胞加入bFGF 20μg/L、FGF420μg/L、HGF 20μg/L、IL-6 1μg/L细胞因子诱导7 d;倒置相差显微镜下观察诱导细胞形态的变化,Real-time PCR和细胞免疫荧光技术检测肝星状细胞诱导前后肝细胞ALB、AFP mRNA和蛋白的表达情况,以及诱导前后干细胞标记物mRNA和蛋白水平的表达及变化。结果①通过胶原酶灌注联合percoll密度梯度离心法获得的大鼠肝星状细胞,其特异性蛋白Desmin和GFAP表达阳性率≥95%。②实验组大鼠肝星状细胞经过bFGF、FGF4、HGF、IL-6等细胞因子诱导7 d后,与对照组细胞相比细胞形态由星形变为类圆形或多角形,转录水平出现肝细胞特异性标记物ALB的表达(P<0.01)和AFP的表达(P<0.05),同时实验组ALB和AFP蛋白表达呈阳性,而对照组则呈阴性。③实验组大鼠肝星状细胞经过bFGF、FGF4、HGF、IL-6等细胞因子诱导7 d后,与对照组相比干细胞标记物P75NTR转录水平表达下降(P<0.05),CD90、c-kit、sox-2、oct-4等转录水平表达显著下降(P<0.01),并伴有干细胞标记物蛋白水平的表达下调或无表达。结论初步证明肝星状细胞可能具有潜在的干细胞特性,在体外可诱导分化形成肝细胞样细胞,在诱导过程中肝星状细胞的干细胞标记物明显下调。
- 罗茜王斌雷增杰李青李砚熊吉陈潇迪张霹雲魏艳玲王军陈东风
- 关键词：肝星状细胞干细胞细胞分离分化
- PACS-2在非酒精性脂肪性肝病动态变化及意义被引量：1
- 2013年
- 目的探讨PACS-2(phosphofurin acidic cluster sorting protein-2)及其所调控的葡糖调节蛋白78(glucoseregulating protein,GRP78)和细胞凋亡标志蛋白Bax、Caspase-3在非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的表达变化及意义。方法应用软脂酸诱导HepG2细胞脂肪变建立非酒精性脂肪性肝病体外模型,并按0、4、8、12、24 h时相点收获细胞,通过油红O(Oil red)染色检测细胞脂肪变程度。同时应用高脂饮食喂SD大鼠建立NAFLD模型,并按时相点分为4、8、12、16、20周组,以普通饮食喂养为对照组。通过q-PCR及Western blot检测PACS-2及内质网应激标志蛋白GRP78和Bax、Caspase-3的表达。结果软脂酸成功诱导HepG2细胞脂肪变性,应用高脂饮食喂养SD大鼠成功建立NAFLD大鼠模型。与对照组相比,PACS-2 mRNA相对表达量在HepG2细胞脂肪变模型早期(4、8 h)下降,脂肪变模型晚期(12、24 h)升高;GRP78在8 h组开始上升后,24 h组达到高峰(P<0.01);Bax、Caspase-3的表达均在12、24 h组显著上升(P<0.01)。在蛋白水平上,PACS-2、GRP78、Bax、Caspase-3的表达与mRNA水平表达基本一致(P<0.01)。NAFLD大鼠模型蛋白表达上,与对照组相比,PACS-2同样在早期(4、8周)下降,晚期(16、20周)上升(P<0.01);GRP78在表达在4周上调后,20周达到高峰(P<0.01)。Bax、Caspase-3的表达均在晚期显著上升(P<0.01)。结论 PACS-2早期的低表达可能参与了NAFLD过程中的内质网应激,晚期升高可能与肝细胞凋亡所致的肝损伤密切相关。
- 牟歌王晓敏熊吉冯吉李砚陈潇迪王斌魏艳玲王军陈东风
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病内质网应激GRP78BAXCASPASE-3
- 性激素与非酒精性脂肪性肝病
- 2013年
- 非酒精性脂肪性肝病（non—alcoholic fatty liverdisease，NAFLD）是指除过量饮酒和其他明确的损肝因素所致，以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变性和肝小叶炎性反应为特征的临床病理综合征。NAFLD发病率逐年升高，西方国家成人患病率为20％～33％，我国发达地区成人患病率达15％，已成为全球最常见的慢性肝病。
- 李砚刘蕾陈东风
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病性激素病理综合征NAFLD过量饮酒脂肪变性
