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Beclin1和LC3Ⅱ在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达变化被引量：2: 2015年; 目的:检测自噬基因Beclin1和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型(LC3Ⅱ)在环磷酰胺致大鼠神经管畸形(NTD)神经上皮细胞中的表达变化,探讨自噬与NTD发生的关系,为防治NTD提供一条新的途径.方法:在已建立的环磷酰胺致大鼠NTD模型基础上,应用免疫荧光显色检测环磷酰胺致大鼠NTD神经上皮细胞中Beclin1和LC3Ⅱ表达变化.结果:与生理盐水对照组相比,环磷酰胺实验组神经管神经上皮细胞中Beclin1和LC3Ⅱ阳性细胞光密度值在处理后4h无明显改变;在处理后8、12、24 h升高,48 h降低,差异均有统计学意义.结论:环磷酰胺导致大鼠胚胎神经管神经上皮细胞中Beclin1和LC3Ⅱ表达异常,自噬改变可能是NTD发生的重要途径.; 陈燕春刘焕彩周风华赵春艳杜红梅丁昊宇接琳琳; 关键词：环磷酰胺神经管畸形 BECLIN1

大鼠脊髓发育过程中神经干细胞的分化被引量：3: 2008年; 目的:研究正常大鼠脊髓发育过程中神经干细胞的分化规律。方法:应用免疫荧光染色技术,检测Nestin、NeuN、MAP2、GFAP、CNPase阳性细胞在大鼠胚胎期及生后脊髓内的分布及变化情况。结果:胚胎发育早期,脊髓中央管、灰质、白质均可检测到Nestin阳性细胞,生后Nestin阳性细胞数量逐渐减少。大鼠脊髓神经元的发生呈现明显的背腹模式,孕14d(E14)脊髓内可检测到NeuN阳性细胞,E16 NeuN阳性细胞逐渐增多,腹侧NeuN阳性细胞核体积较大,分布较稀疏,背侧神经元细胞核体积较小,分布较密集。MAP2染色结果与NeuN一致。胶质细胞的分化、成熟在生后初期进行,P4可检测到GFAP及CNPase阳性细胞,主要分布于脊髓白质内,P30在脊髓灰质内可检测到GFAP阳性细胞,细胞分支较多且短。结论:正常大鼠脊髓发育中神经干细胞的分化呈现一定规律性,向神经元方向化较早且呈明显的背腹模式,胶质细胞的分化较晚。; 张皓云管英俊孙秀宁王金平袁丽丽杜红梅; 关键词：神经干细胞脊髓分化

Notch1在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠动物模型和细胞模型中的表达变化被引量：2: 2017年; 目的:观察Notch1在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠动物模型和细胞模型中的表达情况。方法:应用免疫荧光、免疫印迹、RT-PCR,检测Notch1在95、108、122 d ALS转基因鼠脊髓中的表达变化;检测转染pEGFP-wt-SOD1和pEGFPG93A-SOD1的NSC34细胞模型中Notch1的表达变化。结果:Notch1可与β-tubulinⅢ共表达,与GFAP无明显共表达。较同窝野生型鼠,Notch1于蛋白水平和mRNA水平上的表达在95 d ALS转基因鼠脊髓中无明显变化,在108 d和122 d ALS转基因鼠脊髓中明显升高;与转染pEGFP-wt-SOD的NSC34细胞相比,转染pEGFP-G93A-SOD1的NSC34细胞中Notch1蛋白和mRNA表达增多。结论:Notch1在ALS转基因鼠动物模型和细胞模型中表达增多,提示Notch1信号通路可能与ALS相关。; 杜红梅管英俊于丽陈燕春周风华张皓云接琳琳刘永新; 关键词：肌萎缩侧索硬化症转基因鼠 NOTCH1

同等学力申请临床医学硕士专业学位人员培养的实践探讨被引量：3: 2010年; 同等学力申请临床医学硕士专业学位工作的开展,对提高医师的临床能力具有重要意义。文章结合我院同等学力申请临床医学硕士专业学位人员培养工作,就课程设置、实践要求、科研能力培养、临床能力培养与考核、学位论文要求等问题进行了探讨。; 鞠学红管英俊张金宝孙嘉斌朱红王雪净杜红梅; 关键词：同等学力专业学位硕士

维甲酸、音猬因子对大鼠脊髓神经干细胞向运动神经元样细胞分化的影响被引量：2: 2010年; 目的：分离大鼠胚胎的脊髓神经干细胞进行体外培养，探讨维甲酸（RA）、音猬因子（Shh）诱导其向运动神经元样细胞分化。方法：应用无血清培养技术分离培养脊髓神经干细胞，通过5-溴-2-脱氧尿苷标记、免疫荧光显色检测细胞增殖、分化情况；培养液分组添加Shh、RA或shh＋RA，观察神经干细胞向运动神经元样细胞的分化情况。结果：大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞，分化后可表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原；诱导分化后结果显示Shh组未检测到胆碱乙酰转移酶阳性细胞，RA组为20．63％，shh＋RA组为66．84％，其差异具统计学意义。结论：从大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞，Shh、RA可不同程度地诱导脊髓神经干细胞分化为运动神经元样细胞。; 杜红梅管英俊袁丽丽张皓云; 关键词：神经干细胞脊髓运动神经元

神经干细胞定向诱导分化的研究进展被引量：3: 2006年; 杜红梅管英俊袁丽丽; 关键词：定向诱导分化神经干细胞中枢神经系统疾病多向分化潜能神经胶质细胞干细胞治疗

促红细胞生成素体外培养鼠胚脑皮质神经干细胞的分化被引量：10: 2011年; 背景:促红细胞生成素最早作为生长因子被认识,近些年来其对中枢神经系统保护作用的体内研究较多。目的:观察促红细胞生成素对体外培养大鼠胚脑皮质神经干细胞凋亡及分化的影响。方法:无菌条件下取孕14dSD大鼠胚脑皮质,体外先悬浮增殖培养后贴壁诱导分化。巢蛋白免疫细胞荧光染色检测神经干细胞,以微管相关蛋白2、神经胶质原纤维酸性蛋白检测神经干细胞分化。取第3代神经干细胞向培养基中添加0.5,5,50,500U/mL的促红细胞生成素,另设不添加促红细胞生成素的对照组。应用半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3检测神经干细胞凋亡,微管相关蛋白2检测神经干细胞向神经元方向的分化。结果与结论:加入≥5U/mL促红细胞生成素,神经球内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达显著下降(P<0.01),分化培养后微管相关蛋白2阳性细胞较对照组明显升高(P<0.01)。提示促红细胞生成素可降低体外培养鼠胚脑皮质神经干细胞的凋亡率,促进其神经干细胞向神经元方向分化。; 袁丽丽杜红梅管英俊孔佑华; 关键词：促红细胞生成素神经干细胞凋亡分化

Wnt3a对星形胶质细胞炎性因子、神经营养因子表达的调节: ＜正＞肌萎缩侧索硬化症（ALS）是一种累及脑、脊髓上、下运动神经元的致死性神经变性疾病,目前其发病原因机制尚不明确。前期研究发现,Wnt信号通路异常与ALS发病密切相关,其中Wnt3a信号分子发生明显改变,且在星形胶质细...; 张皓云管英俊杜红梅接琳琳刘永新; 文献传递

成年鼠糖尿病自发康复时胰岛β细胞雄激素受体表达的研究: 2015年; 目的观察成年鼠糖尿病康自发复时胰岛β细胞特异基因的表达。方法建立自发康复糖尿病成年小鼠模型。在糖尿病自发康复过程中,以流式细胞术分选其胰岛β细胞,通过mRNA差异显示法研究胰岛β细胞基因差异表达,以免疫荧光双标显示其蛋白差异表达。结果在糖尿病自发康复过程中,以mRNA差异显示法在胰岛β细胞内共检出12个差异表达基因,其中,雄激素受体(AR)在糖尿病最严重时低表达甚至不表达,在糖尿病康复过程中表达增强,在糖尿病完全康复时高表达(P<0.01)。结论以mRNA差异显示法研究胰岛β细胞特异基因的表达切实可行。糖尿病康复时,胰岛β细胞雄激素受体表达与功能性胰岛β细胞的增多密切相关。; 梁同衍王丽红周生伟杜红梅李如江; 关键词：糖尿病胰岛Β细胞 MRNA差异显示雄激素受体

自噬相关基因4B在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠动物模型及细胞模型中的表达被引量：1: 2015年; 目的:检测自噬相关基因(Atg) 4B在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠动物模型、神经母细胞瘤与脊髓杂交细胞系34(NSC-34)运动神经元细胞模型中的表达变化,探讨Atg4B调节的自噬与ALS发病的关系.方法:通过RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学检测Atg4B在ALS转基因鼠发病不同时间点脊髓中的表达变化;应用pEGFP-G93A-SOD1和pEGFP-wt-SOD1转染NSC-34细胞,通过RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光显色检测转染后24、48 h和72 h Atg4B在细胞模型中的表达变化.结果:与野生型鼠相比较,ALS鼠脊髓中Atg4B mRNA及蛋白在发病早期变化不明显,发病中期和晚期均下调;与转染pEGFP-wt-SOD1的NSC-34细胞相比,转染pEGFP-G93 A-SOD1的NSC-34细胞在转染后24 h Atg4B mRNA及蛋白无明显变化,转染后48 h和72 h均下调.结论:自噬基因Atg4B表达下调与ALS发病密切相关.; 陈燕春刘焕彩周风华王巧真丁昊宇接琳琳杜红梅赵春艳; 关键词：肌萎缩侧索硬化症自噬转基因鼠

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杜红梅

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