杨向明
- 作品数:14 被引量:0H指数:0
- 供职机构:第四军医大学口腔医学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- RECK基因GFP融合蛋白真核表达载体的构建及鉴定
- 2014年
- 目的使用真核表达载体pCDNA3.1,构建含有GFP蛋白标签的RECK真核表达载体,研究RECK基因在口腔鳞状细胞癌转移中的作用。方法使用人胚肝cDNA文库,通过聚合酶链反应扩增出带有XhoⅠ及BamHⅠ核酸内切酶位点的目的 RECK基因序列后连接入真核载体pCDNA3.1质粒中,在RECK基因序列上游通过聚合酶链反应扩增构建GFP蛋白标签。经过DNA琼脂糖凝胶电泳检测后,将GFP蛋白标签连接入真核表达载体pCDNA-RECK中。经过测序分析比对后,转化入DH5a感受态细胞后,提取质粒。使用Lipofectamine2000脂质体方法转染RECK基因入舌癌细胞系SCC-25细胞中。经过RNA提取、反转录后,通过RT-PCR及Western-blot技术鉴定RECK基因体外表达质粒转染效果及RECK蛋白表达情况。结果通过序列比对,证实了体外表达质粒与目标序列一致。将pCDNA-GFP-RECK质粒转染入真核细胞SCC-25细胞后,通过RT-PCR及Western-blot分析,验证RECK基因真核体外表达质粒能有效表达RECK基因及蛋白。结论通过分子生物学基因克隆的方法成功地在体外构建了RECK基因真核表达质粒,为研究RECK基因在口腔鳞状细胞癌转移中的机制奠定了实验基础。
- 刘利军扈梅杨向明申致远赵伟礼孙沫逸
- 关键词:RECK基因基因表达质粒构建
- p53基因表达降低诱导涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83发生癌干细胞特性的实验研究
- 涎腺腺样囊性癌(SACC)是一种恶性肿瘤,周围神经侵袭是其显著特点。p53是一个重要的肿瘤抑制基因,p53基因突变在肿瘤发生和发展中发挥重要作用(胰腺癌、前列腺癌、头颈部癌症)。然而,p53基因在SACC嗜神经侵袭过程中...
- 杨向明马超金伟申志远孙沫逸
- 关键词:嗜神经侵袭RNA干扰P53SACC-83
- 文献传递
- 去甲肾上腺素对FaDu鳞癌细胞系生物学行为的影响
- 2016年
- 目的研究去甲肾上腺素对人咽鳞状细胞癌细胞系FaDu增殖、侵袭及迁移等细胞生物学行为的影响。方法分别采用MTT实验、Transwell细胞侵袭及迁移实验和划痕实验检测不同浓度去甲肾上腺素对人咽鳞状细胞癌细胞系FaDu增殖、侵袭及迁移能力的影响,同时观察普萘洛尔预处理对去甲肾上腺素作用的干预效果。结果 MTT实验、Transwell实验和划痕实验结果表明浓度为10μmo/L的去甲肾上腺素可以显著促进人咽鳞状细胞癌细胞系FaDu的增殖、侵袭及迁移(P<0.001),而浓度为1μmol/L的普萘洛尔预处理可以有效抑制去甲肾上腺素对人咽鳞状细胞癌细胞系FaDu增殖、侵袭及迁移的促进作用(P<0.001)。结论去甲肾上腺素对人咽鳞状细胞癌细胞系FaDu的增殖、侵袭及迁移有促进作用,而非选择性β肾上腺素能受体阻断剂普萘洛尔可以抑制该促进作用。
- 马超孙沫逸倪前伟柴娟申志远杨向明鞠骏高涛李昀赵振彦
- 关键词:去甲肾上腺素普萘洛尔增殖
- 股区穿支皮瓣在头颈部缺损修复中的临床应用
- 研究目的:探讨股区各种穿支皮瓣的特点及在头颈部缺损中的应用效果。研究方法:本研究选取2016-2019年我科应用股区穿支皮瓣修复头颈部缺损的病例共119例,皮瓣制备完成122块。总结了皮瓣制备的不同区域,皮瓣的组成及修复...
- 魏建华杨新杰杨向明王艳杨涛雷德林
- 关键词:穿支皮瓣头颈部缺损修复阔筋膜张肌
- 文献传递
- CDK2AP1基因过表达慢病毒载体的构建与鉴定
- 2014年
- 目的:构建CDK2AP1基因慢病毒过表达载体,感染人口腔鳞癌细胞系SCC-25细胞系中,为CDK2AP1基因体内外实验研究奠定实验基础。方法:将pCDH-CMV-GFP慢病毒载体Sal I和Xba I酶切位点插入CDK2AP1基因序列,构建pCDH-GFP-CDK2AP1慢病毒质粒。经PCR鉴定、测序验证CDK2AP1基因后,将其和慢病毒包装质粒混合物共同转染病毒包装细胞293TN,转染24小时后产生重组病毒GFPCDK2AP1慢病毒颗粒。经病毒浓缩纯化后,感染SCC-25口腔鳞癌细胞系并测定感染效率。结果:GFPCDK2AP1病毒中携有转染正确的CDK2AP1基因,感染人SCC-25细胞系后能稳定表达。结论:成功地在舌鳞癌细胞系SCC-25中构建了CDK2AP1基因的重组慢病毒过表达载体,为研究其在头颈鳞癌的生物学功能奠定基础。
- 刘利军杨向明张静申致远孙沫逸
- 关键词:慢病毒
- 涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭模型的建立及相关研究
- <正>目的:建立观察指标简单明确的涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭动物模型,采用光镜、电镜等形态学及电生理方法观察不同时期的肿瘤细胞对神经侵袭的过程。方法:1.将人涎腺腺样囊性癌嗜ACC-M细胞系接种于裸鼠体内面神经区和坐骨神经...
- 孙沫逸谭爱兴吕成鹏贾文荣杨向明申志远
- 文献传递
- AJCC第八版口腔癌及口咽癌修改要点解读
- 目的:2017年最新发布的AJCC第八版肿瘤分级中,对口腔癌和口咽癌TNM分级有重大修改,本文将对修改的内容做解读。方法:主要参考2017年发表在CA、Lancet Oncology、JCO及CurrTreat.Opti...
- 魏建华杨新杰杨向明王艳闫志伟雷德林
- 关键词:口腔癌口咽癌TNM分类DOIENE
- 文献传递
- 股区穿支皮瓣用于颌面头颈部缺损修复的临床应用研究
- 目的:探讨股区各种穿支皮瓣的特点及在头颈部缺损中的应用效果。方法:本研究选取2012-2016年我科应用股区穿支皮瓣修复头颈部缺损的病例共119例,皮瓣制备完成122块。总结了皮瓣制备的不同区域,皮瓣的组成及修复不同种类...
- 魏建华杨新杰杨向明王艳杨涛雷德林
- 关键词:缺损穿支皮瓣
- 文献传递
- 腓动脉穿支皮瓣在口腔癌切除后缺损修复中的应用及其优势
- 目的:探讨应用腓动脉穿支皮瓣修复口腔癌切除修复的特点及其优势。方法:本研究选取2016-2017年我科口腔癌切除缺损病例共25例,其中舌缺损12例,口底缺损7例,颊部缺损3例,咽旁缺损3例。均采用腓骨近端动脉穿支皮瓣修复...
- 魏建华杨新杰杨向明王艳闫志伟雷德林
- 关键词:穿支皮瓣口腔癌腓动脉
- 文献传递
- 嵌合皮瓣结合数字化技术在颌骨缺损功能性修复中的应用
- 目的:探讨应用嵌合皮瓣修复颌骨复合缺损的方法及使用数字化技术达到颌骨功能性修复效果。方法:本研究选取2012-2016年我科颌骨复杂缺损病例共45例,其中上颌骨缺损8例,下颌骨缺损病例37例。采用嵌合皮瓣修复缺损,其中3...
- 魏建华杨新杰杨向明王艳杨涛雷德林
- 关键词:颌骨缺损数字化技术
- 文献传递