林志雄
- 作品数：128 被引量：403H指数：10
- 供职机构：广东出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目广东出入境检验检疫局科技计划项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学自然科学总论更多>>
- 猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测方法的建立被引量：18
- 2006年
- 通过条件优化，以定量的10倍系列稀释质粒pMD—ORF2（含PCV2-ORF2全基因）为标准品，进行荧光定量PCR扩增并制作标准曲线，建立了猪圆环病毒2型（PCV2）的荧光定量PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达1．0×10^6拷贝／μL，线性范围为10^9～10^0，达10个数量级；对起始浓度为1．0×10^6、1．0×10^5、1．0×10^4拷贝／μL的标准品的最终实际测得值分别为1．000×10^6、0．935×10^5、0．987×10^4拷贝／μL，变异系数分别为2．527％、2．067％、2．092％。该方法的检测灵敏度与套式PCR（nPCR）相当，甚而高于常规PCR。
- 张福良宋长绪杨鸣琦朱道中蒋智勇林志雄刘燕玲宋志军
- 关键词：猪圆环病毒2型荧光定量PCRTAQMAN探针
- 水泡性口炎病毒血清型特异LUX实时荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：8
- 2008年
- 采用LUX荧光核酸扩增技术原理,以水泡性口炎病毒(VSV)NJ、IND型NS基因为模板分别设计并合成单标记LUX荧光引物,建立血清型特异的VSV荧光RT-PCR检测方法。试验表明,两种型特异的LUX荧光RT-PCR能分别特异地鉴定VSV血清型,对口蹄疫、猪水泡病等病毒以及对照细胞、健康动物组织RNA样品的检测结果均为阴性。对比检测试验表明,LUX荧光RT-PCR的检测敏感性比常规RT-PCR提高达10倍以上,对VSV细胞增殖病毒液的检测灵敏度可达1 TCID50。对人工感染豚鼠样品以及临床样品的检测试验证实,该LUX荧光RT-PCR可有效检测到人工感染动物组织以及进口牛临床样品中的水泡性口炎病毒,并能鉴定感染病毒血清型。所报道的检测方法,包括样品核酸提取、LUX荧光RT-PCR以及熔解曲线分析,可在3 h内完成。
- 陈茹刘中勇曾碧健曹永长陈俊伟赵吟林志雄毕英佐
- 关键词：水泡性口炎病毒
- 光密度法RT-LAMP检测高致病性禽流感病毒
- 2013年
- 以HNB为指示剂建立光密度法RT-LAMP检测H5N1亚型高致病性禽流感病毒,2套特异引物的反应产物电泳均出现相应的特异条带,进行浊度测定出现扩增曲线的时间分别为28min和54min。用于检测5个H5N1亚型高致病性禽流感病毒样品,平均光密度值分别为0.355和0.381,对应的荧光RT-PCR Ct值为22.25。高通量光密度法RT-LAMP检测方法的建立,为高致病性禽流感诊断奠定基础。
- 田纯见王宏李红梅张树罗琼林志雄赵吟唐羿罗长保鱼海琼
- 关键词：禽流感病毒光密度
- 供港澳家禽高致病性禽流感及H7N9病毒监测与分析
- 采集供港澳家禽喉头、泄殖腔拭子进行禽流感病毒监测,建立一步法荧光RT-PCR检测A型和H5、H7、H9亚型及H7N9病毒,所用高通量核酸提取和基因扩增体系可适应活禽出口快速检测通关的要求.2006-2015年共检测约15...
- 田纯见高佳卉王宏罗琼林志雄
- 关键词：动物检疫禽流感病毒检出率
- 一种检测猪流行性乙型脑炎病毒的引物及可视化试剂盒
- 本发明提供了一组检测猪流行性乙型脑炎病毒的引物，包括：上游内部引物、下游内部引物、上游外部引物、下游外部引物、上游环引物和下游环引物，其序列依次如序列表SEQ ID No.1-6所示。本发明还提供了包含该组引物的检测猪流...
- 林志雄田纯见何晓明罗琼鱼海琼罗长保陈茹刘志玲王宏吴晓薇毕英佐马静云
- 文献传递
- PRRSV分离株GP5的基因序列分析及msyB-GP5融合表达质粒的构建
- ＜正＞本试验旨在对分离得到的GD-IC株GP5的基因序列进行分析,及构建msyB-GP5融合可溶表达质粒,为GP5的结构和功能的研究奠定基础。根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的基因序列,设计1对包...
- 林志雄何晓明罗琼马静云谢青梅陈茹罗长保陈荣光田纯见
- 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒GP5基因
- 文献传递
- 禽流感病毒广东株HA基因BLSOM神经网络分型方法的建立
- 2016年
- 利用25个禽流感病毒及相关流感病毒广东株HA基因序列,建立三、四核苷酸特征基因片段BLSOM神经网络分型方法,对各片段数量进行统计和归一化处理。设计程序由MATLAB函数模拟人脑思维自组织学习,当训练步数为100及以上各毒株能成功聚类。H1、H3、H5、H7和H9亚型主要毒株分别归为一类,其中H3N2和H7N9毒株HA基因聚类图谱高度相似,表明这些毒株起源相同;不同年代H5N1毒株差异较大;H1N1和H9N2各1个毒株聚为一类,表明这两种病毒自然重组变异,为高危毒株筛查和溯源提供参考。
- 田纯见罗琼高佳卉林志雄鱼海琼刘志玲陈茹吴晓薇
- 关键词：禽流感病毒HA基因神经网络
- 多重荧光PCR检测水产品致病菌方法的建立与应用研究被引量：3
- 2011年
- 根据沙门氏菌invA基因、副溶血性弧菌toxR基因和大肠杆菌O157:H7RFBE基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度和特异性,建立了可同时检测上述三种致病菌的多重实时荧光PCR方法。该方法对纯菌的检测灵敏度均低于10cfu/PCR反应体系。人工染菌样品经6h增菌,检测的灵敏度可低于10cfu/25g;对48株标准/参考菌株的检测结果,只有目的菌株呈阳性反应;而定量检测批内和批间的变异系数均小于2%。应用本法检测人工染菌样品和进出口水产品样品,结果与SN标准方法检测结果一致。本法可在8h内完成对水产品中上述三种致病菌的定性或定量检测,可适应于进出口水产品的快速检验。
- 许如苏林志雄林彩华陈冠武蔡颖陈其生杨奇志
- 关键词：沙门氏菌副溶血性弧菌大肠杆菌O157:H7
- 用抗原捕获ELISA方法及过氧化物酶染色法检测蓝舌病病毒被引量：2
- 2001年
- 鱼海琼林志雄颜思通黄生
- 关键词：蓝舌病蓝舌病病毒
- 检测猪乙型脑炎抗体胶体金免疫层析法的建立与初步应用被引量：2
- 2013年
- 利用蔗糖密度梯度超速离心浓缩纯化vero细胞培养SA14-14-2株猪乙脑病毒灭活抗原,进行胶体金点样和配比优化,制备GICA试纸条。结果最优浓缩样品配比构成是PBS 1.32 mL、灭活病毒液24 mL、30%蔗糖2.6 mL、55%蔗糖6.6 mL;用于胶体金偶联的抗原浓度约2.80 mg/mL。试纸条能明显区别阴阳性血清,阳性血清稀释1:256能显示条带,优化后灵敏度达到1:1024。与猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、Ⅱ型圆环病毒病阳性血清不发生交叉反应。用于检测2群免疫母猪抗体阳性率分别为86%和100%,说明疫苗免疫效果较好;检测未经免疫肉猪出现阳性结果,分别达到38%和24%,说明存在病毒隐形感染。
- 田纯见贾坤林志雄何晓明罗琼罗长保鱼海琼陈茹彭运平吴晓薇
- 关键词：乙型脑炎胶体金免疫层析超速离心抗体
