涂桂云
- 作品数：13 被引量：74H指数：6
- 供职机构：福建师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程医药卫生化学工程更多>>
- 拖丝蛋白工程菌发酵条件的优化研究
- 本文介绍了为获取大量重组拖丝蛋白,成功构建了重组拖丝蛋白基因工程菌,并就其高密度发酵条件进行了优化,为该工程菌上罐高密度发酵奠定了基础.
- 章文贤李敏涂桂云吴雪伟
- 关键词：蜘蛛丝基因工程菌发酵条件蛋白酶
- 文献传递
- RGD蛛丝蛋白基因工程菌高密度发酵条件的研究被引量：15
- 2005年
- 蜘蛛丝因其独特的机械特性,成为自然界性能优良的天然蛋白质纤维。基因工程技术是获取蛛丝蛋白的有效途径。为规模化制备重组RGD-蛛丝蛋白基因工程菌pN SR-16表达产物,通过摇瓶培养确定pN SR-16生长和表达的最优化条件,并在此基础上进行分批补料高密度培养。控制碳源、氮源的流加,发酵液溶解氧浓度和菌体比生长速率,使pN SR-16最终发酵菌体OD600达到57.15,重组丝蛋白表达产物占总蛋白量的20.8%。
- 李敏涂桂云黄智华黄曦
- 关键词：工程菌高密度发酵
- 基因重组蛛丝蛋白-聚乙烯醇复合支架材料的制备被引量：2
- 2008年
- 目的探讨致孔剂NaCl粒径和比例、变性剂和聚乙烯醇（PVA）等因素对基因重组蛛丝蛋白-PVA复合支架材料形态及性能的影响。方法基因重组蛛丝蛋白溶解于98％甲酸，采用冷冻干燥粒子滤沥法制备重组蛛丝蛋白-PVA复合多孔支架；采用扫描电子显微镜观察支架的形态；采用单纤维强力试验机测试支架机械性能。结果乙醇作变性剂制得的多孔支架力学性能较好，支架的断裂应力、断裂比强度均提高5倍以上，断裂伸长率可达12．21％。以粒径〈500tzm的NaCl为致孔剂制得的多孔支架力学性能较好。高分子材料PVA能明显改善重组蛛丝蛋白多孔支架的性能。结论重组蛛丝蛋白-PVA复合支架材料有望在组织工程领域得以应用。
- 魏梅红涂桂云陈登龙李敏
- 关键词：冷冻干燥聚乙烯醇
- RGD-蜘蛛拖丝蛋白聚合物的生物合成与纯化被引量：25
- 2004年
- 蜘蛛拖丝是自然界性能最好的蛋白质纤维之一 ,其独特的机械性能 ,良好的生物相容性和缓慢的可降解性 ,作为生物材料在组织工程领域有着潜在的应用前景。本文根据蜘蛛拖丝蛋白序列高度重复的特点 ,引入与细胞黏附有关的精氨酸 甘氨酸 天冬氨酸 (RGD)三肽 ,化学合成RGD 蜘蛛拖丝蛋白基因单体 ,通过头尾相连倍加构建策略 ,首次得到RGD 蜘蛛拖丝蛋白基因 8聚体和 16聚体。分别将这两种多聚体与原核高效表达载体 pET 30a(+)连接 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) pLysS ,用IPTG诱导表达。SDS PAGE图谱显示表达产物分子量分别为 35KD和 6 0KD ,与理论值基本相吻合 ;蛋白质印迹分析这两种表达产物均显示特异性。文中对表达产物的纯化方法进行了初步的摸索。
- 李敏黄建坤涂桂云黄曦
- 关键词：RGD基因多聚体IPTG纯化
- 重组蛛丝蛋白pNSR-16/聚乙烯醇复合材料的研究被引量：7
- 2007年
- 研究基因重组蛛丝蛋白pNSR-16与聚乙烯醇(PVA)共混复合材料。结果表明高分子量的PVA-124对蛛丝蛋白的改性效果较好;IR分析表明PVA-124分子能促进pNSR-16分子构象由无规卷曲向β-折叠转化;SEM观察表明pNSR-16与PVA-124相容性好;体外细胞培养初步证明了复合支架材料具有生物相容性。
- 陈登龙房乾涂桂云黄曦李敏
- 关键词：聚乙烯醇复合材料生物相容性
- 制备性基因重组蜘蛛拖丝蛋白的分离纯化方法
- 本发明涉及制备性基因重组蜘蛛拖丝蛋白(简称蛛丝蛋白)工程菌表达目的蛋白质的分离纯化，得到高纯度可利用的蛛丝蛋白的方法。其特征是工程菌细胞首先用1/15M磷酸盐缓冲液(pH7.0)洗涤菌体，离心后，以1∶5比例加入50mM...
- 李敏黄智华章文贤涂桂云
- 文献传递
- 制备性基因重组蜘蛛拖丝蛋白的分离纯化方法
- 本发明涉及制备性基因重组蜘蛛拖丝蛋白(简称蛛丝蛋白)工程菌表达目的蛋白质的分离纯化，得到高纯度可利用的蛛丝蛋白的方法。其特征是工程菌细胞首先用1/15M磷酸盐缓冲液(pH7.0)洗涤菌体，离心后，以1∶5比例加入50mM...
- 李敏黄智华章文贤涂桂云
- 文献传递
- 组织工程新材料蜘蛛拖丝蛋白的重组培养被引量：9
- 2003年
- 目的通过对重组蜘蛛拖丝蛋白基因工程菌pNS2生长的培养基进行优化,为获取大量蜘蛛拖丝蛋白提供条件。方法采用单因子试验和正交试验对培养基进行优化。结果获得优化的培养基组成:葡萄糖5.0g/L、蛋白胨5.0g/L、磷酸二氢钾(KH2PO4)15.0g/L、微量元素母液15.0g/L、硫酸镁(MgSO4)0.8g/L、柠檬酸1.7g/L。培养基优化后,工程菌的生长量提高了60.6%。结论优化的培养基为基因工程菌pNS2大规模生产蜘蛛拖丝蛋白奠定了基础。
- 章文贤李敏涂桂云黄智华
- 关键词：培养基正交试验生物医学工程
- 基因重组蛛丝蛋白－高聚物组织工程多孔支架材料
- 本发明属于生物医学材料科学工程领域，涉及一种组织工程支架材料，尤其是多孔支架材料。本发明以基因重组蛛丝蛋白和生物可降解的高聚物共混得到组织工程支架材料，基因重组蛛丝蛋白和生物可降解的高聚物的配比(质量比)为：基因重组蜘蛛...
- 李敏陈登龙涂桂云黄曦周志华
- 文献传递
- 基因重组蛛丝蛋白－高聚物组织工程多孔支架材料
- 本发明属于生物医学材料科学工程领域，涉及一种组织工程支架材料，尤其是多孔支架材料。本发明以基因重组蛛丝蛋白和生物可降解的高聚物共混得到组织工程支架材料，基因重组蛛丝蛋白和生物可降解的高聚物的配比(质量比)为：基因重组蛛丝...
- 李敏陈登龙涂桂云黄曦周志华
- 文献传递
