潘灏
- 作品数：20 被引量：101H指数：7
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 小鼠神经干细胞的生物学特性观察
- 2004年
- 目的探讨小鼠神经干细胞体外原代培养的生长特性。方法用无血清与单细胞克隆技术对小鼠胚胎脑组织进行分离、培养,用光镜、免疫组织化学进行鉴定,并对其不同生长时期的生物学特性进行透射电镜观察。结果鼠胚胎分离细胞具有连续分化及克隆能力,克隆球和早期的原始细胞神经上皮干细胞蛋白(nestin)抗原呈阳性。成熟分化后胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经丝-200(NF-200)抗原呈阳性。不同期电镜结果:培养2周的神经干细胞较原始,核大,细胞质少,细胞器不发达。将其继续培养到4周,部分细胞内可见到发达的细胞器,并在分化细胞中观察到神经微管、微丝、胶样丝和细胞间连接样结构。结论胚胎脑组织在体外培养并克隆成神经球,具有很强的增殖能力,是多分化潜能干细胞。
- 姬西团章翔林绿标费舟王西玲梁景文曹锐峰潘灏
- 关键词：神经干细胞免疫组化透射电镜胎鼠
- 不同浓度胰岛素对小鼠神经干细胞分化的影响被引量：8
- 2005年
- 目的体外培养获得神经干细胞并初步探讨不同浓度胰岛素对神经干细胞分化能力的影响。方法小鼠胎脑细胞体外培养获得神经干细胞,并行免疫荧光检测鉴定。25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、125ng/ml、150ng/ml胰岛素诱导分化后,免疫荧光染色观察不同浓度胰岛素对神经干细胞分化的影响。结果体外培养的神经球表达巢蛋白(nestin),神经球分化的细胞表达神经丝和胶质纤维酸性蛋白。不同浓度胰岛素作用下的神经元分化率有差别。其中100ng/ml组的分化率最高。结论体外培养的细胞为神经干细胞,100ng/ml浓度的胰岛素可以起到较好的促进神经元分化的效果。
- 潘灏章翔刘卫平姬西团梁景文
- 关键词：神经干细胞胰岛素细胞培养
- 时间因素对神经干细胞向γ-氨基丁酸能神经元分化的影响
- 2005年
- 目的探讨时间因素对体外培养的神经干细胞向γ氨基丁酸(gammaaminobutyricacid,GABA)能神经元分化的影响。方法体外培养神经干细胞并加以鉴定。利用反义寡核苷酸诱导神经干细胞向GABA能神经元分化,通过免疫荧光染色计算不同时间点的GAD65阳性细胞率。结果体外培养获得神经干细胞,染色可见神经球及分化细胞中分别有nestin、NF200、GFAP阳性细胞。方差分析表明不同时间点的阳性细胞率存在的差别具有显著意义(F=702.93,P<0.05),LSDt检验表明除第7d与第9d无明显差别外,其余各时间点之间均有明显差别。其中第7天的分化率最高为87.60%±6.26%。结论本实验利用反义寡核苷酸序列特异性阻断了Hes1的表达,促进了神经干细胞向GABA神经元分化,并发现在诱导分化7d后分化率达到最高值。
- 刘卫平潘灏章翔费舟姬西团王剑博梁景文
- 关键词：神经干细胞分化GABA神经元
- 神经干细胞原代培养及GABA能神经元的诱导分化被引量：21
- 2005年
- 目的 探讨神经干细胞的原代培养及γ 氨基丁酸 (GABA)能神经元的诱导分化。方法 取孕 16dWistar大鼠的胚鼠全脑 ,进行体外培养 ,并对培养的神经干细胞以及诱导分化的GABA能神经元进行鉴定。结果 培养 2 4h后 ,出现 2～ 4个细胞的细胞球。分化 2d后 ,神经球贴壁后伸出细长突起 ,并可和周边神经球伸出的突起连接。神经球周边可见大量散在贴壁的双极或多极细胞。免疫荧光染色可见神经球均有nestin、NF2 0 0、GFAP阳性细胞。取第 3代神经球行GABA能神经元定向分化。分化 2 4h后 ,实验组细胞球贴壁。 3d后 ,实验组细胞球周边有大量散在分布细胞贴壁生长 ,胞体圆形较大 ,有 1～ 2个细长突起。免疫荧光显示 ,实验组周边散在的贴壁细胞多为GAD6 5阳性细胞。GAD6 5阳性细胞分化率实验组 (85 .97± 2 .78) %、对照组 (18.16± 2 .2 9) % ,P <0 .0 1。结论本实验利用寡核苷酸序列特异性阻断了bHLH基因家族的调控因子之一Hes1,解除了其对bHLH的抑制 ,促进了神经干细胞向神经元的分化。实验还发现 ,阻断Hes1后大大提高了神经干细胞向GA BA神经元分化的比率。
- 刘卫平潘灏章翔姬西团王彦刚王西玲梁景文
- 关键词：神经干细胞分化
- 立体定向大鼠脑胶质瘤颅内接种生长情况的观察被引量：4
- 2005年
- 目的通过建立类似于人脑胶质瘤的动物模型,观察颅内肿瘤生长特点。方法借助动物立体定向仪,将体外培养大鼠C6胶质瘤细胞(细胞数为3×105个,悬浮于无血清DMEM培养液60μL中)接种于Wistar大鼠左侧尾状核区。接种后观察实验大鼠的生存状态及肿瘤的生长特性,分别于接种后5、14 d进行MRI检查。在实验3、6、9、121、5 d时解剖标本,做组织病理学和GFAP免疫组化检查。结果该方法建立的胶质瘤动物模型在组织病理学上接近人脑胶质瘤.而且颅内生长稳定,成瘤率高,未见颅外转移病灶,实验周期短,重复性好。结论C6大鼠脑胶质瘤动物模型肿瘤生长及病理特征与人脑胶质瘤相似,可作为临床胶质瘤基础研究的理想模型。
- 姬西团章翔陈燕林绿标费舟王西玲曹锐峰梁景文潘灏
- 关键词：胶质瘤疾病模型
- 胶质瘤细胞对神经干细胞增殖影响的初步研究被引量：7
- 2005年
- 目的初步探讨几种胶质瘤细胞上清液对神经干细胞增殖的影响。方法取胎鼠全脑原代培养神经干细胞并行免疫荧光鉴定;复苏几种胶质瘤细胞获取上清液;上清液与干细胞培养液混合培养神经干细胞后MTT法作生长曲线并行电镜切片观察。结果原代培养获得神经干细胞;混合培养液培养后的神经干细胞增殖较对照组快,电镜观察可见核质比增高,细胞器发达。结论胶质瘤上清液对神经干细胞的增殖具有一定的促进作用。
- 潘灏章翔刘卫平姬西团王西玲梁景文
- 关键词：胶质瘤细胞神经干细胞增殖养神原代培养细胞器
- 神经干细胞原代培养及胰岛素对其增殖与分化的作用被引量：1
- 2005年
- 目的原代培养获得神经干细胞并初步探讨胰岛素对神经干细胞增殖分化的影响。方法小鼠胎脑原代细胞培养,免疫组化检测鉴定。100ng/ml胰岛素作用后,甲基噻基四唑(MTT)法及免疫组化观察胰岛素对神经干细胞增殖分化的影响。结果原代培养的神经球表达巢蛋白(nestin),神经球分化的细胞表达神经丝200(NF200)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。与对照组相比,胰岛素作用下的神经干细胞增殖能力强,且神经元分化率较高,可达(35.41±1.97)%。结论原代培养的细胞为神经干细胞,且在胰岛素作用下,其增殖能力和向神经元分化率均有增高。
- 潘灏章翔刘卫平姬西团梁景文王西玲
- 关键词：神经干细胞胰岛素细胞培养
- 针对Survivin基因的短发卡RNA诱导U251细胞凋亡被引量：8
- 2007年
- 目的:观察针对Survivin基因的短发卡RNA(shRNA)对人脑胶质母细胞瘤U251细胞在体外凋亡的影响。方法:对U251细胞,稳定转染Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1-SR的U251-SR细胞,以及稳定转染空载体pWH1的U251-P细胞,分别采用相差显微镜、HE染色、Hoechst染色、TUNEL染色以及透射电镜观察各组细胞的形态学特征;采用流式细胞术(FCM)定量测定各组细胞的凋亡细胞数量。结果:相差显微镜、HE染色、Hoechst染色、TUNEL染色以及透射电镜观察显示,U251-SR凋亡细胞明显增多,并呈现典型的细胞凋亡形态学改变;FCM定量分析凋亡细胞数量显示,与U251(2.1%)和U251-P(2.7%)相比,U251-SR凋亡细胞增加约6倍,达14.4%。结论:针对Survivin基因的shRNA能够在体外诱导U251细胞发生大量凋亡。
- 甄海宁章翔白文涛杨彤涛付洛安章薇高大宽胡世颉潘灏
- 关键词：SURVIVIN短发卡RNARNA干涉胶质瘤
- 神经干细胞在创伤性脑损伤中的治疗作用被引量：7
- 2004年
- 潘灏章翔刘卫平
- 关键词：脑损伤神经干细胞细胞移植
- 神经干细胞培养条件的探讨被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨体外不同培养条件对小鼠神经干细胞增殖及分化的影响。方法 分别用条件培养基及 10ml·L-1、2 0ml·L-1、30ml·L-1、4 0ml·L-1、5 0ml·L-1、10 0ml·L-1胎牛血清 +条件培养基对小鼠胚胎脑组织进行培养 ,用免疫组织化学方法进行鉴定。随后对不同培养条件下、不同生长时期神经干细胞生物学特性进行光镜观察。结果 10ml·L-1、2 0ml·L-1胎牛血清 +条件培养基组培养的神经干细胞比单独条件培养基组克隆球多而大 ;30ml·L-1、4 0ml·L-1、5 0ml·L-1胎牛血清 +条件培养基组既有部分贴壁细胞 ,也有大量的克隆球形成 ,克隆球有伪足样突起 ,克隆球间存在着广泛网络结构 ,且单一神经干细胞核分裂旺盛 ;10 0ml·L-1胎牛血清 +条件培养基组以贴壁细胞为主。
- 姬西团章翔林绿标费舟王西玲梁景文曹锐峰潘灏
- 关键词：神经干细胞小鼠
