焦康为
- 作品数:4 被引量:0H指数:0
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- 慢病毒介导环腺苷酸反应成分结合蛋白1特异性小干扰RNA对小鼠视网膜新生血管的抑制作用
- 2014年
- 目的 观察玻璃体腔注射慢病毒介导环腺苷酸反应成分结合蛋白1(CREB1)特异性小干扰RNA(siRNA)对小鼠视网膜新生血管的抑制作用.方法 构建针对小鼠靶基因CREB1 siRNA载体,筛选并进行慢病毒包装.将140只C57BL/6J小鼠均分为正常对照组、氧诱导视网膜病变(OIR)模型组、空载体组和CREB1干扰组.正常对照组小鼠在正常空气中饲养.OIR模型组、空载体组和CREB1干扰组小鼠均于出生后7d建立OIR模型.空载体组及CREB1干扰组小鼠于出生后5d分别行玻璃体腔注射慢病毒-绿色荧光蛋白(GFP)空载体和CREB1-RNA干扰慢病毒载体1.0μl.利用突破内界膜的新生血管内皮细胞核数和荧光血管造影视网膜铺片评价视网膜新生血管情况;计算小鼠视网膜新生血管和无灌注区面积;逆转录聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹法检测小鼠视网膜CREB1 mRNA和磷酸化CREB1 (P-REB1)蛋白表达,以及血管内皮生长因子(VEGF)-A、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)的mRNA和蛋白表达情况.结果 OIR模型组、空载体组突破内界膜的血管内皮细胞核计数较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);CREB1干扰组突破内界膜的血管内皮细胞核计数较OIR模型组、空载体组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05).OIR模型组、空载体组小鼠视网膜新生血管面积和无灌注区面积均较正常对照组明显增大,CREB1干扰组小鼠视网膜新生血管面积和无灌注区面积均较OIR模型组和空载体组明显缩小.4组小鼠视网膜新生血管面积和无灌注区面积比较,差异均有统计学意义(F=67.220、110.090,P<0.05).OIR模型组、空载体组小鼠视网膜CREB1 mRNA和P-CREB蛋白表达以及VEGF-A、Akt、PI3K mRNA和蛋白表达均较正常对照组明显增加;CREB1干扰组小鼠视网膜CREB1 mRNA和P-CREB蛋白表达以及VEGF-A、Akt、PI3K mRNA和蛋白表达较OIR模型组、�
- 温臣婷贺涛邢怡桥焦康为蔡维
- 关键词:视网膜新生血管化基因转移技术
- 劈柴所致眼外伤多因素临床分析
- 2013年
- 目的探讨因劈柴所致的眼外伤的危害性和治疗预防措施。方法分析208例(210眼)因劈柴所致的眼外伤住院患者的受伤情况、诊断、治疗方法及治疗前后最佳矫正视力。结果男性占绝大多数186例(188眼)占总例数89.42%。女性22例(22眼)占10.58%。受伤年龄以〉50岁为主。农村居多178例(180眼)占85.57%。其中24h内就诊者68例(68眼)占32.69%,2—7天就诊者97例(99眼),占46.64%,8天以上43例(43眼)占20.67%。开放式眼外伤86眼占40.95%,闭合性眼外伤122例(124眼)占59.05%。外伤性白内障21眼占10.00%,玻璃体积血30眼占14.29%,视网膜脱离31眼占14.76%。最初最佳矫正视力和最终最佳矫正视力呈正相关。结论对劈柴所致眼外伤眼部及视力情况进行评估可为患者及医生的治疗及预后作参考。
- 焦康为梅海峰邢怡桥
- 关键词:眼外伤视力预后
- 慢病毒介导CREB1siRNA对氧诱导视网膜病变小鼠视网膜新生血管的抑制作用
- 目的 探讨玻璃体腔注射慢病毒携带的CREB1(CREB1)siRNA对氧诱导视网膜病变小鼠模型视网膜新生血管生成的抑制作用及机制.方法 构建针对小鼠靶基因CREB1 siRNA载体,筛选并进行慢病毒包装.140只C57B...
- 温臣婷贺涛邢怡桥焦康为
- CREB1在氧诱导视网膜病变小鼠模型中的表达变化
- 2014年
- 目的 研究CREB1在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠模型视网膜新生血管形成中的表达变化,探寻视网膜新生血管形成的可能机制.方法 实验研究.选用7日龄健康清洁级C57BL/6J小鼠134只,随机分为正常对照组(67只)和OIR模型组(67只).将小鼠与哺乳母鼠共同置于(75±2)%氧环境内饲养5d后转移至正常环境中饲养5d,建立小鼠OIR模型,17日龄的OIR鼠在空气中再继续饲养4d,正常对照组在正常氧环境中饲养21 d.出生后第17 d时取OIR模型组和正常对照组小鼠制备视网膜切片HE染色法和FITC-dextran心脏灌注视网膜铺片法观察视网膜新生血管情况,以及视网膜组织冰冻切片免疫荧光染色观察P-CREB1表达情况.取2组鼠第7、9、12、14、17、21 d的视网膜采用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)法和Western Blot法检测CREB1mRNA和蛋白在小鼠视网膜中的表达情况.数据分析采用独立样本t检验和两因素方差分析方法,两两比较采用Bonferronipost-test检验.结果 17 d时OIR模型组较正常对照组突破视网膜内界膜的内皮细胞核数明显增加(t=1 1.31,P<0.05),且模型组视网膜新生血管区及无灌注区面积分别为(21.40±2.72)%和(30.61±3.12)%.与正常对照组相比,模型组小鼠视网膜中可见大量P-CREB1蛋白荧光,主要表达在内核层和神经节细胞层.Real-time PCR和Western Blot结果表明,正常对照组第7、9、12、14、17天的CREB1mRNA和蛋白在视网膜中的表达水平逐渐升高,21 d时开始出现下降的趋势;在各相应时间点OIR模型组里的CREB1相对表达量除第7天外,其余时间点均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 CREB1的表达水平与视网膜新生血管的形成存在时空对应关系,CREB1的高表达可能参与了OIR模型中视网膜新生血管的形成过程.
- 温臣婷贺涛邢怡桥黎智焦康为
- 关键词:氧诱导视网膜病变视网膜新生血管化