牟文丽
- 作品数：13 被引量：26H指数：3
- 供职机构：山东大学附属省立医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省科技发展计划项目上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 多烯紫杉醇抑制乳腺肿瘤细胞增殖及诱导凋亡的实验研究被引量：8
- 2005年
- 魏爱英马春燕牟文丽
- 关键词：多烯紫杉醇乳腺肿瘤细胞凋亡细胞增殖
- 放射线对口腔鳞状细胞癌细胞中核因子-κB p65表达的影响
- 2009年
- 目的:探讨不同剂量放射线对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65信号转导蛋白表达的影响。方法:采用人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞,分为6个剂量组,分别为0y、2、4、6、8、10Gy,在照射后的不同时间点(1,3,6,10,24,48h)应用免疫细胞化学检测NF-κB p65的表达情况,应用Leica Qwin Plus图像分析系统对图像进行分析,测其灰度值,并应用SPSS10.0软件对数据进行X2检验。结果:免疫细胞化学方法显示不同剂量组的平均灰度值与0Gy组相比均为P<0.05,差异均具有统计学意义,而不同时间点组的平均灰度值相互比较,3h组的平均灰度值与其他时间点组相比均为P<0.05,差异有显著性。结论:放射线可以激活NF-κB p65信号转导通路,此信号转导通路在肿瘤的放射治疗中可能具有重要意义。
- 马利张东升韩俊庆张世周刘桂军牟文丽张捷
- 关键词：放射线P65口腔鳞状细胞癌
- 放疗对人唾液腺腺样囊性癌p65信号传导通路的影响被引量：4
- 2006年
- 目的:研究放射治疗对人唾液腺腺样囊性癌(adenoidcysticcarcinoma,ACC)细胞核转录因子NF-κBp65(nucleartranscriptionfactor-κBp65)信号传导通路的影响,初步探讨放射线引起唾液腺腺样囊性癌p65信号传导通路变化的规律。方法:采用人唾液腺腺样囊性癌细胞系ACC-2进行细胞培养,在培养皿底部均匀贴附1～2层细胞时,予以不同剂量高能X线照射。继续进行细胞培养,观察细胞形态,并在不同时间段对细胞进行NFκBp65染色。采用LeicaQwinPlus细胞图像分析系统对染色后的图像进行灰度分析,并自动计算细胞核灰度值,计算其方差。通过比较不同照射剂量组及不同染色时间组之间腺样囊性癌细胞p65染色深度的差异,研究放射治疗对腺样囊性癌细胞p65信号传导通路的影响。对所得数据采用SPSS10.0统计软件包进行t检验。结果:高能X线照射后,贴壁细胞减少。各组测得图像灰度值与空白对照均有显著差异(P<0.05),各放疗组细胞核平均灰度值均低于空白对照组。高放射剂量组平均细胞核灰度值显著低于低放射剂量组(P<0.05)。除48h染色组外,各不同时间染色组平均细胞核灰度值均显著低于空白对照组(P<0.05)。48h染色组的平均细胞核灰度值与空白对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论:高能X线可引起腺样囊性癌细胞p65信号传导通路开放。放射剂量与p65信号传导通路开放存在量效关系,即在一定范围内,随着放射剂量增加,p65信号通路的表达更为明显。p65信号传导通路开放具有时效性,即放射后p65信号传导通路开放增加,后逐渐减少,48h内恢复正常水平。
- 刘桂军张东升韩俊庆刘莹牟文丽吴军楼张世周
- 关键词：放疗P65唾液腺腺样囊性癌信号传导通路
- 信号转导蛋白P65与放疗诱导口腔鳞状细胞癌细胞凋亡的关系
- 2011年
- 目的探讨不同剂量的X射线对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中信号转导蛋白P65表达的影响以及P65与放疗诱导口腔鳞状细胞癌细胞凋亡的关系。方法人舌鳞癌Tca8113细胞复苏后,在37℃,5%CO2的孵箱中培养。共分对照组、2、4、6、8、10 Gy剂量组,待细胞长至对数生长期后,对细胞分别应用上述照射剂量一次性照射。照射后继续培养,并在照射后的不同时间点(1、3、6、10、24、48 h)应用免疫细胞化学和Western blot检测细胞中P65的表达量,并同时应用流式细胞仪和末端核苷酸转移酶介导的生物素化的dUTP末端标记(TUNEL)法检测不同X射线剂量组的细胞凋亡率。结果不同X射线剂量组的细胞浆内P65蛋白的表达量与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05),而不同时间点组的细胞浆内P65蛋白表达量相互比较,3 h组的细胞浆内P65蛋白表达量与其他时间点组相比差异有显著性(P<0.05)。不同剂量组的凋亡率与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05),而不同时间点组的凋亡率相互比较时,3 h组的凋亡率与其他时间点组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 X射线可以激活口腔鳞状细胞癌细胞中核因子-κB(NF-κB)P65信号转导通路,而P65在细胞浆中表达与放疗诱导口腔鳞状细胞癌细胞凋亡具有正相关性,激活后进入细胞核内的P65蛋白可能具有抵抗细胞凋亡的作用。
- 马利张东升吴军楼韩俊庆张世周刘桂军牟文丽张捷
- 关键词：P65口腔鳞状细胞癌细胞凋亡
- 盐酸小檗碱抗假丝酵母菌及抗肿瘤活性研究被引量：7
- 2009年
- 目的:研究盐酸小檗碱抗假丝酵母菌及抗肿瘤活性,为临床用药提供依据。方法:依据NCCLS的M27-A2标准方案测定标准株对盐酸小檗碱的药物敏感性;MTT法测定盐酸小檗碱对细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测盐酸小檗碱对人舌癌细胞Tca8113凋亡率的影响。结果:盐酸小檗碱具有抗假丝酵母菌活性,能抑制Tca8113细胞生长;浓度为160、80、40、20、10μg/ml的盐酸小檗碱作用于Tca8113细胞48h后凋亡率分别为32.3%、24.6%、13.3%、6.35%、6.51%,对照为8.46%。结论:盐酸小檗碱(C20H18ClNO4)体外具有抗假丝酵母菌活性,且能抑制舌癌细胞Tca8113的生长,诱导舌癌细胞Tca8113的凋亡。
- 赵民迟华基牟文丽崔彬
- 关键词：盐酸小檗碱药物敏感性实验抗肿瘤作用
- TK基因重组质粒的构建及在ACC-2细胞中的表达
- 2008年
- 目的:克隆胸腺嘧啶核苷激酶(TK)基因,构建质粒表达载体pIRES-TK,并利用该载体转染ACC-2细胞,建立了稳定表达TK基因的ACC-2细胞克隆。方法:通过PCR从逆转录病毒重组体pLNSX-TK中扩增出TK基因全长序列,将扩增产物定向插入到克隆载体pMD18-T中进行序列测定,测序正确后将其亚克隆到质粒表达载体pIRES中,构建重组表达载体pIRES-TK,用电穿孔法以该质粒转染ACC-2细胞,经G418筛选获得稳定表达TK基因的ACC-2细胞株,提取该细胞株的总RNA,用RT-PCR检测TK基因的表达。结果:PCR扩增出1128bp大小的片段,测序结果与GeneBank报道的TK序列基本一致;阳性重组质粒pIRES-TK经XhoI和MulI双酶切后获得2692Bb和1128bp的片段;RT-PCR从转染细胞的总RNA中扩增出361bp的预期片段。结论:成功扩增了TK基因的DNA片段;成功构建了质粒表达载体pIRES-TK;建立了稳定表达TK基因的ACC-2细胞株,为TK/GCV自杀基因系统在腺样囊性癌基因治疗中的应用奠定良好的基础。
- 黄圣运张东升刘桂军牟文丽张世周张捷
- 关键词：胸腺嘧啶核苷激酶自杀基因核酸内切酶腺样囊性癌
- 颌骨骨纤维异常增殖症骨髓间充质干细胞Gsα基因突变分析被引量：1
- 2011年
- 目的:探索对颌骨骨纤维异常增殖症(FD)患者骨髓间充质干细胞(BMSCs)的Gsα蛋白编码基因位点进行突变分析的方法。方法:颌骨FD患者经X线及组织病理学确诊后,术中取组织标本进行骨髓间充质干细胞原代培养,提取细胞DNA,通过巢式PCR及酶切等方法,将突变基因扩增,并进行基因序列测定。结果:颌骨FD患者BMSCs中,Gsα第201位氨基酸的编码基因突变(G→A或C→T),造成第201位氨基酸由精氨酸→组氨酸或精氨酸→半胱氨酸突变。结论:颌骨FD患者BMSCs中Gsα蛋白第201位氨基酸编码基因位点存在特异性突变,巢式PCR是检测该突变的可靠方法之一。
- 于舰斌张东升王来城郑培惠马利牟文丽
- 关键词：骨纤维异常增殖症G蛋白骨髓间充质干细胞突变巢式PCR
- X线对ACC细胞NF-κB-P65蛋白表达与细胞凋亡的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:将唾液腺腺样囊性癌ACC-2细胞在高能X线照射后,对细胞中NF-κB信号转导通路亚单位—p65蛋白表达及细胞凋亡情况进行检测,探讨两者的相关性。方法:将处于对数生长期的ACC-2细胞进行5种剂量(2、4、6、8、10Gy)的高能X线照射,照射后1、3、6、10t、24、48h,采用免疫细胞化学及免疫蛋白印迹(Western blotting)法,检测ACC-2中p65蛋白的表达情况;采用流式细胞仪测定细胞凋亡率,并进行TUNEL试验,观察凋亡细胞核形态;采用SPSS11.5软件包中的Spearman等级相关法进行放射线照射剂量强度与细胞凋亡率之间的分析。结果:通过免疫细胞化学观察,正常对照组细胞中p65蛋白多被定位于核周,而很少出现在胞核内;放射线照射后,该蛋白穿过胞膜,渐进入胞核中心;借助Western印迹法检测,p65蛋白在总蛋白中的含量可随时间逐渐变化,在各组细胞中表达峰值约在照射后6～10h;在同一时间点上,蛋白表达量随放射剂量的增加而增大。照射后,细胞凋亡率不断改变,其变化曲线最低点位于放疗后10h,并表现出对放射线剂量和p65蛋白含量的负相关关系(P=0.010<0.05);凋亡细胞在TUNEL试验中出现较典型的形态学变化。结论:放射线对ACC-2细胞p65蛋白表达的影响有一定的时间—剂量效应规律,细胞凋亡率与其表达量呈负相关。
- 王守一张东升吴军楼韩俊庆张世周张捷牟文丽
- 关键词：腺样囊性癌放疗核因子-ΚB细胞凋亡
- 骨纤维异常增殖症病变中骨髓间充质干细胞的分离培养及鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的:探索从骨纤维异常增殖症(FD)病变组织中分离、培养骨髓间充质干细胞(MSC)的有效方法,为研究骨纤维异常增殖症的病因及发病机制奠定基础。方法:取FD患者新鲜病变组织,将其剪碎后冲洗,获得骨髓间充质干细胞,进行培养,观察细胞形态,绘制细胞生长曲线,检测其细胞表面标志物及向成骨细胞的诱导分化能力。结果:培养的骨髓干细胞随传代次数增多,细胞形态趋向长梭形,99%的细胞表达CD44和HLA-ABC,不表达CD34;可见诱导后的MSC碱性磷酸酶染色阳性,并形成钙结节。结论:在新鲜FD骨标本中可以成功提取MSC,其在体外具有诱导成骨的能力,获取到的MSC可以满足后续实验的要求。
- 于舰斌郑培惠张东升李胜锋刘桂军牟文丽张捷
- 关键词：骨纤维异常增殖症骨髓间充质干细胞细胞培养
- 质粒表达载体pIRES-CD的构建及其在ACC-2细胞中的表达
- 2008年
- 目的:克隆大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(CD)基因,构建质粒表达载体pIRES-CD,并利用该载体转染ACC-2细胞,建立稳定表达大肠杆菌CD基因的ACC-2细胞克隆。方法:通过PCR从大肠杆菌DH5αDNA中扩增出CD基因全长序列,将扩增产物定向插入到克隆载体pMD18-T中,进行序列测定。测序正确后,将其亚克隆到质粒表达载体pIRES中,构建以内部核糖体进入位点(IRES)相连的CD基因的质粒表达载体pIRES-CD,采用电穿孔法,以质粒表达载体转染ACC-2细胞,用400μg/mL的G418筛选10d,获得稳定表达CD基因的ACC-2细胞系,提取该细胞的总RNA,用RT-PCR检测CD基因的表达。结果:PCR扩增出1280bp大小的片段,测序结果与GeneBank报道的CD序列基本一致;阳性重组质粒pIRES-CD经XbaI和NotI双酶切后,获得6.1kb和1280bp的片段;RT-PCR从转染细胞的总RNA中扩增出228bp的预期片段。结论:成功扩增了CD基因的DNA片段;成功构建了质粒表达载体pIRES-CD;建立了稳定表达CD基因的ACC-2细胞系,为CD/5-FC自杀基因系统在腺样囊性癌基因治疗中的应用奠定了基础。
- 黄圣运张东升张世周刘桂军牟文丽张捷
- 关键词：自杀基因胞嘧啶脱氨酶基因内部核糖体进入位点核酸内切酶
