王园园
- 作品数：62 被引量：241H指数：6
- 供职机构：湖南省血吸虫病防治所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划“国家空气污染与疾病监测示范点”项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程文化科学更多>>
- 血管生成素抑制TGF-β1诱导的Smad2的活化被引量：3
- 2012年
- 目的从Smad信号通路途径探讨血管生成素(angiogenin,Ang)对HeLa细胞的促增殖作用机制。方法用不同浓度的重组人Ang刺激HeLa细胞,用蛋白质印迹实验(Western blotting)检测p-Smad2、Smad2的表达情况以及检测TGF-β1刺激的状态下,过表达或低表达Ang Smad通路的变化。MTT法检测TGF-β1对HeLa细胞增殖的作用,mRNA及蛋白水平检测TGF-β1对Ang表达的影响。结果 Ang能够抑制Smad2的磷酸化。过表达Ang时TGF-β1促进的Smad2的磷酸化也受到抑制,而敲低Ang的表达后促进了TGF-β1诱导的Smad2的磷酸化。TGF-β1能够抑制HeLa细胞增殖,但不影响Ang的表达。结论Ang与TGF-β1对HeLa细胞增殖的作用可能与Smad信号通路相关,并且Ang能够抑制TGF-β1诱导的Smad2的活化。
- 夏文戎付文亮蔡玲蔡欣王园园徐东刚
- 关键词：血管生成素TGF-Β1SMAD2
- 一种基于改良LAMP法的日本血吸虫核酸检测试剂盒及检测方法
- 本发明涉及一种基于改良LAMP法的日本血吸虫核酸检测试剂盒及检测方法。本发明公开了一种用于检测日本血吸虫的引物组及其应用。本发明首先提供了一个引物组，由序列表的序列1所示的单链DNA分子(F3)、序列表的序列2所示的单链...
- 邢微微徐东刚王园园査磊冯惊涛喻鑫玲毛昕罗志宏毛金武
- 文献传递
- 人工构建的新型细菌Fc受体蛋白
- 1993年
- 本文构建了5个基于链球菌G蛋白(SpG)及金黄色葡萄球菌A蛋白(SpA)的新型Fc受体蛋白,它们分别含有1—6个免疫球蛋白Fc段结合区结构域,且在结构形式上亦不同于天然SpG或SpA。在大肠杆菌中,经热诱导它们的表达量占菌体总蛋白的17—30％。免疫双扩散及酶联实验结果表明,这种人工构建的由SpG C3结构域组成的Protein TG(184 AA)比天然SpG能更广谱、更有效地与人、羊、兔等IgG结合,且最佳结合pH也由SpG的pH5变为pH5—8;而由Protein TG与SpA的A,B,C 3个结构域融合的Protein TGA(357 AA)则兼并了SpG及SpA的结合谱。
- 蔡仕英王园园姚志建
- 关键词：基因表达
- PTD-NGF融合蛋白的制备、活性分析及其跨膜功能研究
- 2008年
- 目的:构建PTD-NGF融合基因,检测表达的重组蛋白生物学活性和跨膜转运功能。方法:提取小鼠大脑组织RNA逆转录后,钓取β-NGF基因。PCR技术构建PTD-NGF融合基因,插入表达质粒pBV220后,转化大肠杆菌DH5α进行表达与纯化。稀释法复性后,SDS-PAGE及Western印迹鉴定表达重组蛋白。PC12细胞分化培养检测融合蛋白的生物学活性。重组蛋白与HepG2细胞共孵育,免疫组化检测其跨膜功能。结果:PTD-NGF融合基因测序正确,表达产物与目的蛋白大小相符,能与NGF抗体发生结合反应。纯化后蛋白纯度可约达90%以上,重组蛋白经复性可诱导PC12细胞出现明显分化,并能跨膜进入HepG2细胞内部。结论:成功构建了融合基因,表达的重组蛋白具有显著的生物学活性及跨膜转运功能。
- 李仁德王园园王金凤蔡欣邹民吉刘中成周磊磊邢微微龙民慧王嘉玺徐东刚
- 关键词：蛋白转导结构域跨膜转运基因融合
- IL-1ra-Fcε融合分子的构建及其在293T细胞中的表达与鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的:构建IL-1ra-Fcε融合基因的真核表达载体pCI-neo-IL-1ra-Fcε,研究其在体外的表达情况。方法:利用RT-PCR方法从哮喘大鼠脾细胞中克隆大鼠IgE恒定区cDNA,同时从载体pBV220-IL-1ra中克隆IL-1ra基因。利用重叠延伸PCR技术合成了IL-1ra-Fcε融合基因。将其克隆入真核表达载体pCI-neo,以脂质体法转染293T细胞,G418筛选稳定表达细胞株。利用Western印迹、RT-PCR验证融合蛋白的表达,并在EL-4/CTLL-2细胞中对融合蛋白活性进行了验证。结果和结论:成功构建了pCI-neo-IL-1ra-Fcε表达载体,Western印迹、RT-PCR验证融合蛋白在293T细胞得到表达,并获得了稳定表达IL-1ra-Fcε的细胞株。表达的融合蛋白在体外具有拮抗IL-1的功能。为过敏性哮喘基因治疗奠定了基础。
- 刘中成王园园邹民吉王嘉玺徐东刚
- 关键词：转染真核表达
- 北京地区儿童生活方式、免疫状态及ORMDL3基因SNPs与哮喘发生的相关性研究被引量：18
- 2010年
- 目的分析ORMDL3基因的SNP rs7216389,rs7216558在中国北京地区儿童中的基因型频率,并调查其与儿童哮喘间的相关性。综合ORMDL3基因相关SNPs、儿童生活方式、IL-4、总IgE和特异性IgE所反映的免疫状态进行与儿童哮喘的相关性分析。方法采用病例-对照研究的方法,通过《国际儿童哮喘及过敏研究(ISSAC)问卷》收集生活方式信息;对聚合酶链式反应(PCR)产物进行序列分析得到SNPs的基因型;酶联免疫吸附法(ELISA)测定IL-4水平;免疫测定法测得儿童总IgE水平;放射性过敏原吸附试验法(RAST)检测特异性IgE水平。使用多元Logistics回归分析ORMDL3基因相关SNPs、生活方式、免疫状态与儿童哮喘的相关性。结果共收集到北京地区220名哮喘患儿及208名对照儿童的血液样本及相关信息。ORMDL3基因SNPs(rs7216389,rs7216558)在病例与对照组中无差异(P>0.05)。哮喘家族史与过敏性哮喘相关(P<0.05),而哮喘家族史、患儿年龄、采暖方式、家庭吸烟习惯、总IgE水平与非过敏性儿童哮喘显著相关(P<0.05)。结论在北京地区,ORMDL3基因SNPs(rs7216389,rs7216558)与儿童哮喘非显著相关。遗传因素与过敏性哮喘显著相关;而在非过敏性哮喘患儿中生活方式及免疫应激状态与哮喘相关,反映了除遗传因素以外,生活方式、免疫状态也对儿童哮喘具有重要影响。
- 金哲王金凤李红王园园王强吴奎武徐东群徐东刚
- 关键词：儿童哮喘病例对照研究SNPS
- 兔动脉粥样硬化动物模型的建立和评价被引量：66
- 2008年
- 目的探索短时间内快速建立动脉粥样硬化家兔模型的方法和评价指标。方法用高胆固醇饲料喂养法与免疫反应损伤法结合建立兔动脉粥样硬化动物模型。分别于高脂饲养前、第4周和第8周测定血甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL)的含量、丙二醛的含量(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、C反应蛋白(CRP),并于第8周后作形态学观察。结果饲养4周后,模型组血清中甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量、丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、C反应蛋白(CRP)(P<0.01)等显著性升高。饲养8周后模型肉眼及光镜下均可见典型动脉粥样斑块。结论此法能短时间内建立兔动脉粥样硬化模型。
- 王园园龙民慧周磊磊邹民吉徐涛刘深王嘉玺徐东刚
- 关键词：动脉粥样硬化家兔动物模型
- 几种制备感受态细胞及质粒转化方法的比较被引量：4
- 1991年
- 制备感受态细胞并进行质粒转化实验是重组 DNA 工作中的重要环节。本文就几种制备感受态细胞的方法进行了比较,对有些操作步骤做了改进,对一些影响质粒转化的因素进行了初步探讨。
- 王园园蔡仕英姚志建
- 关键词：感受态细胞
- 重组SAK及其突变体多克隆抗体制备及应用研究被引量：3
- 2007年
- 目的通过制备SAK及其突变体(SAK2)的多克隆抗体,检测并比较两者的免疫原性。方法将4只新西兰大耳白兔随机分为SAK组2只,SAK2组2只,皮下多点注射抗原SAK及SAK2。第3次免疫1周后,收集血清。使用饱和硫酸氨沉淀及DEAE离子交换法纯化多克隆抗体,ELISA检测抗血清效价。ELISA检测抗原抗体反应性,比较SAK和SAK2的免疫原性。结果兔抗SAK多克隆抗体与SAK2的反应性显著低于与SAK的反应性,兔抗SAK2多克隆抗体与SAK和SAK2的反应性无明显差异。结论使用多克隆抗体检测抗原抗体反应性的结果显示,SAK突变体SAK2缺失了部分抗原表位,同时未产生新的抗原表位。与SAK相比SAK2可能具有较低的免疫原性。利用多克隆抗体检测抗原抗体反应性对判断抗原性变化具有重要价值。
- 王园园王旻邹民吉刘深徐涛蔡欣王金凤徐东刚
- 关键词：葡激酶多克隆抗体免疫原性
- SAK蛋白在制备降血脂药物中的应用
- 本发明公开了属于生物医药领域的一种SAK蛋白在制备降血脂药物中的应用。所述SAK蛋白，其氨基酸序列为中国专利文献(CN101314769A)中序列表中的SEQ ID NO：1所示。上述SAK蛋白对高脂血症动物模型给药在1...
- 徐东刚王旻付文亮王园园邹民吉夏文戎毛金武
- 文献传递
