王在照
- 作品数：47 被引量：231H指数：8
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 稀有鮈鲫芳香化酶基因的表达及内分泌干扰物(EDCs)暴露对其表达的影响被引量：5
- 2011年
- 克隆稀有鮈鲫芳香化酶基因（cyp19a和cyp19b）片段,半定量方法检测其组织表达特异性,实时定量PCR检测2基因在孵化后18~50 d幼鱼的发育阶段表达情况,对成鱼进行3 d的乙炔基雌二醇（EE2,1 nmol/L）和壬基酚（NP,1μmol/L）药物暴露试验,实时定量PCR检测它们对2个基因表达的影响。结果显示,克隆获得759 bp的cyp19a和407 bp的cyp19b片段,cyp19a主要在卵巢中表达,cyp19b主要在脑中表达。在幼鱼发育阶段,cyp19a的表达没有显著差异,cyp19b在38 d后出现明显的下降;成体稀有鮈鲫cyp19a受到EE2极显著抑制（0.23倍,P〈0.01）,但NP抑制效果不显著（0.59倍）,cyp19b在EE2和NP暴露后都有上调的趋势（1.83、1.02倍）。说明cyp19基因可以作为EDCs的作用靶分子,有助于对高等脊椎动物包括人类进行预测和风险评估。
- 王晶晶刘小林秦芳王厚鹏吴婷婷胡晓齐王在照
- 关键词：CYP19
- 稀有鮈鲫雄激素受体基因的克隆和内分泌干扰物对其表达的影响被引量：5
- 2011年
- 采用RT-PCR和RACE法分离了稀有鮈鲫（Gobiocypris rarus）精巢雄激素受体基因（AR）的cDNA,其核苷酸序列3 130 bp,编码844个氨基酸。它的氨基酸序列与鲤科鱼类AR的同源性较高。AR基因在稀有鮈鲫的性腺、肝、脑、肠和肌肉等组织中均有表达,在雄性个体中精巢和肝脏的表达量最高,其他组织较低,而在雌性个体除肌肉中表达量较低外,其他组织均为中等水平的表达。0.01和0.1 nmol/L的乙炔基雌二醇暴露3 d后,能够分别非显著和显著地提高稀有鮈鲫幼鱼AR的mRNA表达,而1 nmol/L的乙炔基雌二醇则对其表达有下调的趋势,0.1~10 nmol/L的双酚A对其表达均有显著下调,0.01μmol/L壬基酚对其表达有显著下调,而0.1和1μmol/L壬基酚对其表达均有下调的趋势,因此不同种类内分泌干扰物及其不同暴露浓度对稀有鮈鲫AR的mRNA表达有不同影响。
- 胡晓齐王晶晶王厚鹏吴婷婷秦芳任战军王在照
- 关键词：雄激素受体CDNA克隆内分泌干扰物实时定量PCR
- 大鳞副泥鳅GPR30基因的克隆及EE2暴露对其表达的影响
- 2013年
- 【目的】克隆大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)G蛋白偶联受体30(G protein-coupled receptor30)基因GPR30,研究其在成鱼各组织中的表达状况;用EE2(17α-ethynylestradiol)处理大鳞副泥鳅雌性幼鱼后,检测GPR30、ERαmRNA在幼鱼肝脏和卵巢中的表达状况,探究EE2对雌激素膜受体GPR30和经典雌激素核受体ERα基因表达的影响,推测GPR30可能存在的生理功能。【方法】采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和快速扩增cDNA末端(RACE)技术,克隆大鳞副泥鳅GPR30,对其核苷酸序列及所编码的氨基酸序列信息和进化关系进行分析;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法,研究GPR30mRNA在大鳞副泥鳅成鱼性腺、肠道、肌肉、肾脏、脑、肝脏、鳃、眼睛等组织中的表达状况,以及经不同质量浓度(1,5,25ng/L)EE2处理后雌性幼鱼肝脏和卵巢中GPR30和ERαmRNA的表达。【结果】克隆获得了GPR30,该基因全长2 152bp,阅读框全长1 062bp,编码353个氨基酸,该基因氨基酸序列与斑马鱼的GPR30氨基酸序列相似性最高,达92.9%。GPR30氨基酸序列的比对结果显示,大鳞副泥鳅与其他脊椎动物的GPR30结构域一致。荧光定量PCR分析表明,GPR30在大鳞副泥鳅成鱼卵巢中表达最高,在雄鱼肠道中表达最低,且GPR30mRNA在雌雄大鳞副泥鳅的性腺中差异性表达,在卵巢中的表达量较精巢中高702倍。EE2暴露试验显示,在5ng/L EE2处理组的卵巢及1和5ng/L EE2处理组的肝脏中,GPR30有略微增长;随着EE2质量浓度的增高,ERαmRNA在肝脏中的相对表达水平较对照组显著增长。【结论】成功克隆了大鳞副泥鳅GPR30,其与哺乳动物的GPR30有相似的结构和功能,可能与雌激素效应存在密切关系。在基因转录水平上,GPR30与ERα可能不存在直接的显著相关关系。
- 章霞张莹莹李蒙郑尧王在照
- 关键词：大鳞副泥鳅GPR30基因克隆实时荧光定量PCR
- 中国对虾大颚器官超微结构及保幼激素Ⅲ类似物的分离被引量：3
- 1999年
- 王在照任自力相建海王良臣崔同昌王良臣王秀玲
- 关键词：中国对虾
- 17α-甲基睾酮对稀有鮈鲫性腺发育及类固醇合成基因的影响
- 目的：检测17α-甲基睾丸酮(MT)对稀有鮈鲫性腺发育的影响,探讨MT影响类固醇合成的分子机制.方法：采用RACE技术克隆了雄激素合成相关基因11β-HSD,用实时荧光定量PCR的方法检测了类固醇合成相关酶类基因：类固醇...
- 刘少贞秦芳王在照
- 编码中华绒螯蟹蜕皮抑制激素的部分cDNA的克隆和序列分析
- 从中华绒螯蟹Eriocheir sinensis的眼柄中提取总RNA,以眼柄总RNA为模板进行反转录获得眼柄cDNA.根据日本对虾Penaeus japonicus的具有蜕皮抑制活性的多肽Pej-SGP-Ⅳ的第5-10个...
- 王在照相建海
- 关键词：中华绒螯蟹蜕皮抑制激素CDNA克隆
- 文献传递
- 中国对虾热休克蛋白70基因及其克隆方法
- 本发明属于分子生物学技术领域，具体地说是一种中国对虾热休克蛋白基因70及其克隆方法。它具有序列表中SEQ ID NO 1碱基序列及SEQ IDNO.2所示的氨基酸序列；包括：1)从中国对虾的组织中提取总RNA；2)进行c...
- 相建海焦传珍王在照李富花
- 文献传递
- 中国对虾3种Ⅱ型CHH家族神经肽基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2003年
- 根据中国对虾蜕皮抑制激素的全长cDNA序列设计引物 ,以中国对虾基因组DNA为模板 ,采用PCR等技术分别得到 3个扩增产物 :NP1、NP2和NP3,长度分别是 5 4 0bp、6 0 1bp和 82 6bp。NP1和NP2均由 2个外显子和 1个内含子组成 ,NP3由 3个外显子和 2个内含子组成。序列分析表明 ,NP1、NP2和NP3是中国对虾Ⅱ型CHH家族神经肽的基因片段。NP1、NP2和NP3的外显子分别与斑节对虾的神经肽Pem SGP C2、Pem SGP C1及中国对虾FenchMIH的mRNA相似性最高 ,同源性分别为 91 5 %、92 8%、88 9%。由此可以推测NP3是中国对虾MIH的基因序列 。
- 王在照相建海
- 关键词：中国对虾
- 不同养殖模式下雌核发育彭泽鲫雌雄鱼性别分化相关基因的表达差异被引量：4
- 2015年
- 将同一批经雌核发育产生的F1彭泽鲫(Carassius auratus var.pengze)仔鱼(Pcc)分别置于实验室和池塘进行养殖,结果发现,与池塘养殖雄鱼比例极少相比,实验室养殖中出现了高比例的雄鱼。实验室养殖Pcc F1雄雌比例为(43.6±3.0)%,而池塘养殖Pcc F1雌雄比为(4.7±1.2)%。本研究比较了不同养殖模式下雌雄鱼性腺分化相关基因的表达,结果发现除Pcc-vasa、Pcc-esr1和Pcc-esr2b外,实验室养殖Pcc F1精巢中性腺分化、受体、类固醇合成酶类基因表达极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)高于卵巢中对应基因的表达量。对于池塘养殖的Pcc F1,除Pcc-amh、Pcc-dmrt1b、Pcc-dmrt1c、Pcc-foxl2、Pcc-vasa和Pcc-esr2b外,精巢中性腺分化和受体基因表达极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)高于卵巢中对应基因的表达量;但精巢中绝大部分类固醇合成酶类基因的表达量极显著低于卵巢(P<0.01)。实验室和池塘养殖Pcc F1雌雄出现差异表达的基因主要是类固醇合成酶类及调控芳香化酶的转录因子,这些基因的差异表达可能与雌雄激素的合成或调控相关,从而导致不同养殖模式出现不同比例的雄鱼。
- 郑尧陈家长邴旭文王在照
- 关键词：雌核发育彭泽鲫性腺分化
- 重要海水养殖动物功能基因的研究及技术平台的构建
- 相建海宋林生李富花张晓军董波王兵李莉王金星吴长功蔡中华刘保忠王在照孙金生焦传真沈瑶青
- 该成果选择我国主要海水养殖经济动物功能基因为主攻对象，在研究过程中，构建了海洋动物功能基因研究的关键技术平台，获得了大量序列表达标签（ESTs）和功能基因，运用分子生物学、功能基因组学、生物信息学、基因芯片等技术对重要特...
- 关键词：
- 关键词：海水养殖动物功能基因
