王智文 作品数:11 被引量:80 H指数:6 供职机构: 山东农业大学林学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
用树脂法分离提取类芽孢杆菌(Paenibacillus)Cp-S316抗细菌活性物质 被引量:2 2007年 类芽孢杆菌Cp-S316对家蚕真菌、细菌病原物具有广谱抗性。为研究抗菌物质的化学结构、理化性质,并探讨其工业化生产的可行性,研究了不同树脂对抗细菌活性物质的吸附性能,对吸附性能优良的树脂进行了解吸性能的比较,并对解吸剂进行了筛选。结果:X-5树脂对活性物质具有较好的吸附性能,当树脂与发酵液混合后的质量浓度为0.03 g/mL时,振荡吸附4 h,其吸附率为90%;以0.02 mol/L HCl-75%丙酮为最佳解吸剂,层析柱柱长12 cm,直径1.5 cm,流速3.9 mL/(cm2.min)动态解吸,其总解吸率为92%,其中浓度较高部分(树脂与解吸液混合后的质量浓度为0.67 g/mL)的解吸率为90%。关键词类芽孢杆菌Cp-S316;活性物质;分离提取; 刘训理 薛东红 王智文 吴凡 何亮 刘开启关键词:活性物质 树脂 圆孢芽孢杆菌A95的分离与鉴定 被引量:5 2006年 从茶树根际土壤中分离获得一株对多种家蚕病原真菌具有强烈拮抗作用的细菌。经培养特征观察以及生理生化指标测定、16S rDNA碱基序列测定和同源性分析,鉴定该菌株为圆孢芽孢杆菌,定名为Bacillus globisporusA95。该菌株的16S rDNA序列已在GenBank注册(登记号:AY387584)。 陈凯 王智文 刘训理 孙海新 薛东红 吴凡关键词:家蚕真菌病 拮抗菌 多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)Cp-S316抗真菌活性物质的发酵、分离纯化与性质研究 多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)Cp-S316是本实验室从泰山土壤中分离并鉴定的一株拮抗细菌(GenBank登录号:AY292989)。该菌株抗菌谱广,对多种动植物病原细菌和真菌具有较强拮抗作... 王智文关键词:多粘类芽孢杆菌 抗真菌活性物质 分离纯化 文献传递 1株植物病原真菌拮抗细菌的鉴定 被引量:5 2007年 从泰山土壤中分离获得1株细菌4'531,对其进行了形态特征观察、生理生化特征测定及16S rDNA序列分析,并构建了包括其在内的10株相关种属菌株的系统发育树,最后研究了其对烟赤星病(Alternariaalternate)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、棉立枯病菌(Rhizoctonia solani)3种植物病原真菌的拮抗作用。结果表明,4'531菌株属于类芽孢杆菌属(Paenibacillus),与其亲缘关系较近菌株Paenibacillus polymyxa(AJ320493)的同源性达98%;结合形态和生理生化特征,鉴定该菌株为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa),该菌株的16S rDNA序列已在GenBank中注册,登录号为DQ279739;4'531菌株对3种供试植物病原真菌均有明显的拮抗作用。 何亮 宋新华 王智文 吴凡 刘训理关键词:植物病原真菌 拮抗细菌 多粘类芽孢杆菌 拮抗作用 多粘类芽孢杆菌Cp-S316抗真菌活性物质的提取及其部分性质研究 被引量:11 2007年 多粘类芽孢杆菌Cp-S316对动植物真菌、细菌病原物具有广谱抗性,为研究抗真菌活性物质的化学结构、理化性质并探讨其工业化生产的可行性,研究了大孔吸附树脂对多粘类孢杆菌Cp-S316产生的抗真菌活性物质的吸附、解吸性能,筛选出其最佳解吸剂,并测定了抗真菌活性物质的部分性质。结果表明,大孔吸附树脂X-5对抗真菌活性物质的吸附及解吸性能最好,其饱和吸附量为5.36×104μg·g^(-1),其最佳解吸剂为0.01mol·L^(-1)HCl-70%乙醇,以解吸剂∶树脂=2∶1(v∶m)进行静态解吸,解吸率达93.28%。该活性物质对热、紫外线稳定,对胰蛋白酶、蛋白酶K有一定的耐受性,对氯仿部分敏感,对酸稳定,对碱敏感。抗真菌活性物质提取方便、理化性质稳定,显示了一定的应用和开发前景。 王智文 袁士涛 何亮 夏尚远 吴凡 杨少波 刘训理关键词:活性物质 圆孢芽孢杆菌A95抗菌蛋白的分离纯化及性质研究 被引量:9 2006年 对圆孢芽孢杆菌(Bacillus globisporus)A95产生的抗菌蛋白进行了分离纯化,并研究了其部分性质。菌株摇瓶发酵液离心后的上清液经硫酸铵40%~60%分级盐析获得粗提物。粗提物溶液经Sephadex G-100柱层析、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-50脱盐纯化获得的抗菌蛋白,通过性质检测、电泳及MALDL-TOF-MS质谱检测,表明为分子量1.464~1.529kD的一组环肽类抗菌蛋白。该抗菌蛋白对多种家蚕病原真菌具有较好的抗菌活性,参照美国国家临床试验标准化委员会(NCCLS)提出的标准,用微量液基稀释法分别测定了对绿僵菌、白僵菌和黄曲霉的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC)。该抗菌蛋白对热稳定,对胰蛋白酶、蛋白酶K、氯仿有一定的耐受性,对酸部分敏感,对碱稳定。 刘训理 王智文 孙海新 陈凯 薛东红 刘开启关键词:抗菌蛋白 分离纯化 家蚕真菌病 拮抗菌 Cp-S316菌株发酵培养基的优化及其对烟草赤星病菌的抑制作用 被引量:12 2007年 通过单次单因子试验和正交试验,对Cp-S316菌株抗真菌活性物质的发酵培养基进行了优化,获得适合菌株生长和抗真菌活性物质产生的最佳培养基配方为:土豆100g、乳糖40g、蛋白胨15g、硝酸钠0.5g、硫酸镁2g、水1L。经摇瓶发酵试验,发酵液效价比基础培养基配方提高了325.24%。Cp-S316菌株产生的抗真菌活性物质粗提物对烟草赤星病菌菌丝具有强烈的抑制作用,采用抑制菌丝生长速率法测定了其对烟草赤星病菌的抑制中浓度为EC50=0.248mg·mL-1;显微镜下观察发现,活性物质能够引起菌丝原生质凝集。 王智文 刘训理 何亮 夏尚远 崔萍 吴凡关键词:发酵 培养基 抗菌作用 夏秋蚕饲育技术 2005年 1 做好蚕种的补催青和收蚁,保证收蚁头数和蚁体健壮夏秋蚕期温度高,蚕卵的胚子发育快,发种、领种应避免接触28℃以上高温, 干湿差保持在1.5℃-2℃。夏秋蚕的收蚁宜早,一般可在早晨5时感光,争取在上午8时前收蚁给桑完毕。若孵化不齐。 王智文 王倩关键词:夏秋蚕 给桑 补催青 喂蚕 簇中管理 短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)XDH菌株发酵培养基配方的研究 被引量:7 2006年 从泰山土壤中分离获得一株对多种动物病原细菌具有强烈拮抗作用的细菌—短短芽孢杆菌(Brevibacillus bre-vis)XDH。采用摇瓶培养法对发酵培养基配方进行了研究。通过单因素试验和均匀设计试验确定了XDH菌株发酵培养基最佳组成为:葡萄糖1.5%、黄豆饼粉3.0%、蛋白胨0.2%、NaC l 0.1%、(NH4)2SO40.5%、CaCO30.6%、MgSO40.6%。发酵液效价达到1456.8μg/mL,比基础培养基效价提高近10倍。 陈凯 薛东红 夏尚远 何亮 王智文 刘训理关键词:发酵 培养基 均匀设计 芽孢杆菌非核糖体肽的研究进展 被引量:11 2006年 芽孢杆菌产生的非核糖体肽主要有脂肽、多肽、线状聚酰胺物等类型,其生物合成是通过“硫模板多聚酶机制(th iotemp late mu ltienzym e m echan ism)”的多功能酶复合系统进行的,并经甲基化、酰基化、糖基化、杂环化和环化等进一步修饰而成。特殊的生物合成机制决定了非核糖体肽具有氨基酸组成及分子形式复杂、分子量较小、理化性质稳定、生物活性多样等特点,同时表现出了对病原微生物不同的抑、杀菌机制。非核糖体肽作为人类丰富的新型抗菌药物资源,在植物病害的生物防治、人类和动物疾病的治疗等方面显示了诱人的前景。研究芽孢杆菌及其产生的非核糖体肽在蚕业上的应用,有利于绿色、生态蚕业的发展。 王智文 刘训理关键词:芽孢杆菌 理化性质