王玲军
- 作品数：9 被引量：5H指数：2
- 供职机构：上海海洋大学食品学院更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 鲢骨骼肌轻酶解肌球蛋白基因的cDNA克隆
- 通过RT-PCR法和3'-RACE法从冬季和夏季鲢的骨骼肌中分离到两种肌球蛋白重链同工型基因,分别命名为低温型(sc-W)和高温型(sc-s).两种同工型基因的cDNA序列包含了部分3'-翻译区和全部3&...
- 王玲军陶妍党静王孙勇
- 关键词：CDNA克隆
- 鲢鱼轻酶解肌球蛋白的cDNA克隆及结构解析
- 蒋旷陶妍王玲军党静
- 关键词：鲢鱼CDNA克隆氨基酸序列
- 鲢鱼轻酶解肌球蛋白的cDNA克隆及结构解析
- 在过去的研究中,我们已经通过3'-RACE从冬季和夏季鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix)的骨骼肌中分离到两种肌球蛋白重链同工型基因,分别命名为低温型(sc-w)和高温型(sc-s),并...
- 蒋旷陶妍王玲军党静
- 关键词：鲢鱼CDNA克隆氨基酸序列
- 鲢肌球蛋白重链球状结构域的基因克隆及结构解析
- 肌球蛋白重链由多个具不同功能的结构域组成,位于氨基端的球状头部(Subfragment-1,S1)具有ATP酶活性和与肌动蛋白结合的功能,因此,肌球蛋白被誉为机体的"分子马达".本实验通过RT-PCR...
- 刘召静王玲军陶妍
- 关键词：肌球蛋白CDNA克隆
- 鲢鱼肌球蛋白重链球状结构域的cDNA克隆及结构解析
- 早期的研究中,我们报道了从冬季和夏季鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix)的快速肌中分离到两种肌球蛋白重链同工型基因,分别命名为低温型(sc-w)和高温型(sc-s).本文根据该两种同工型基因在3...
- 刘召静陶妍王玲军党静福岛英登
- 关键词：鲢鱼肌球蛋白CDNA克隆氨基酸序列
- 鲢鱼骨骼肌轻酶解肌球蛋白基因的cDNA克隆被引量：3
- 2010年
- 通过RT-PCR法和3′-RACE法从冬季和夏季鲢鱼的骨骼肌中分离到两种肌球蛋白重链同工型基因,分别命名为低温型(sc-w)和高温型(sc-s)。两种同工型基因的cDNA序列包含了部分3′-翻译区和全部3′-非翻译区,编码了鲢鱼轻酶解肌球蛋白(light meromyosin,LMM)羧基端的一部分氨基酸序列。在终止密码子的上游和下游区域,两种同工型基因之间在核苷酸序列上显示了明显的差异,其序列同源性为79.5%,推断的氨基酸序列的同源性为88.1%。根据与草鱼和鲤鱼相关同工型氨基酸序列的比对结果,发现在15个氨基酸残基位点上鲢鱼低温型(sc-w)与草鱼10℃型(gc10)一致,但两者显示了与其它同工型不同的变异,并且其中的11个位点属高度保守性残基。这些结果似乎表明了基于低温驯化的淡水鱼表达的肌球蛋白重链同工型必须在它们的初级结构上发生某些氨基酸残基的变异才能有助于其适应低温的栖息环境,在蛋白质水平上则展现出完全不同于高温栖息鱼类的肌球蛋白功能和性质。另一方面,根据分子系统树的分析结果,表明了来自相似栖息环境温度的鱼的肌球蛋白重链之间具有更近的基因距离,进一步证明了环境温度对广温性淡水鱼肌球蛋白重链的基因歧化和功能进化的影响。
- 王玲军陶妍党静王孙勇
- 关键词：鲢鱼CDNA克隆
- 基于热驯化的草鱼肌球蛋白的性质变化及其分子机理
- 2013年
- 为了探明草鱼肌球蛋白的结构和性质伴随栖息环境温度变化的时间过程及分子机理、实现对草鱼的热驯化改性,本文对冬季草鱼进行了30℃的热驯化试验。通过对不同热驯化阶段草鱼肌球蛋白Ca2+-ATPase变性速率常数(KD)的测定和对肌球蛋白的DSC分析,考察了肌球蛋白热稳定性的变化趋势;进一步运用RT-PCR考察了已知的3种草鱼肌球蛋白重链同工型基因在不同热驯化阶段草鱼肌肉中的表达模式。结果显示,热驯化至5周左右,草鱼肌球蛋白Ca2+-ATPase的KD值由热驯化前的41.8×10-4/s下降至3.25×10-4/s;DSC分析结果显示,肌球蛋白的热变性温度(Tm)由驯化前的37℃上升至43.6℃;RT-PCR结果表明,热驯化前和热驯化2周的草鱼肌肉中只表达低温型(gc-10),热驯化3至5周时,3种同工型基因都有表达,而热驯化5周以后表达的是中间型(gc-I)和高温型(gc-30),以后者居多。这些结果较清楚地证明了草鱼肌球蛋白热稳定性发生急剧变化所需的热驯化时间约为5周左右;对冬季草鱼热驯化3至5周左右;其肌肉中肌球蛋白重链同工型基因的表达模式已开始发生变化,即肌球蛋白发生重建,从而导致其热稳定性的改变。
- 陶妍王玲军董永
- 关键词：草鱼肌球蛋白热稳定性
- 鲢鱼轻酶解肌球蛋白的cDNA克隆及结构解析被引量：1
- 2011年
- 与栖息温度相关的鲢鱼两种轻酶解肌球蛋白重链(light meromyosin,LMM)同工型(低温型,sc-w;高温型,sc-s)的氨基酸序列解析结果表明:sc-w与sc-s在LMM的氨基酸序列上显示91.8%的同源性,但与已经报道的草鱼(Ctenopha-ryngodon idella)低温型(gc10)有96.9%的高同源性。低温型的sc-w和gc10在LMM初级结构上展现的特有变异主要发生在21个氨基酸残基位点,其中9个属保守性残基。此外,sc-w和sc-s的氨基酸序列均显示了一个高度保守的、具有典型α-螺旋结构蛋白质的特征,但sc-s较sc-w的疏水性残基含量略高。鲢鱼两种LMM同工型之间在初级结构上展现的差异可能导致了栖息于不同环境温度下的鲢鱼骨骼肌肌球蛋白具有不同的凝胶形成特性。
- 蒋旷陶妍王玲军党静谢晶
- 关键词：鲢鱼CDNA克隆氨基酸序列
- 鲢肌球蛋白重链球状结构域的cDNA克隆及结构解析被引量：3
- 2010年
- 根据已经获得的两种鲢肌球蛋白重链同工型基因(低温型sc-w和高温型sc-s)在3′端展现的明显差异,设计了2个特异性的反向引物,以鲤科鱼类肌球蛋白重链5′端的保守序列为正向引物,通过Long-PCR对编码鲢两种肌球蛋白重链同工型的球状结构域(Subfragment-1,S1)的全长基因进行了克隆和测序,并推断出它们一级结构的氨基酸序列。研究结果表明,sc-w与sc-s在S1的初级结构上显示80.5%的同源性、与已经报道的草鱼低温型(gc10)有97.2%的高同源性;sc-s则与草鱼中间型(gcI)和高温型(gc30)显示了分别为98.4%和97.1%的高同源性。低温型的sc-w和gc10在S1初级结构上展现的特有变异主要发生在43个氨基酸残基位点,其中15个属保守性残基。对S1区域中两个功能性的表面环loop1(与ATP结合位点有关)和loop2(与肌动蛋白结合位点有关)的结构解析发现,sc-w和gc10在两个表面环的长度、残基电荷分布和氨基酸组成等方面与其它同工型之间存在明显差异,揭示了这两个表面环的结构差异可能影响了栖息于不同环境温度下的淡水鱼的肌球蛋白"分子马达"功能。分子系统树的分析结果进一步证明,鱼类栖息环境温度对其肌球蛋白同工型的基因和功能歧化的影响。
- 刘召静陶妍王玲军党静福岛英登
- 关键词：肌球蛋白CDNA克隆氨基酸序列
