王薇
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金美国中华医学基金会项目美国中华医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生政治法律更多>>
- 高效液相色谱-串联质谱法测定肝组织中华蟾酥毒基和酯蟾毒配基被引量：2
- 2013年
- 目的建立灵敏、准确的高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定肝组织中华蟾酥毒基和酯蟾毒配基含量的方法。方法肝组织匀浆液中加入内标地塞米松,用二氯甲烷提取后挥干,残渣加入甲醇溶液溶解并上样到ProElut C18固相萃取柱上分离净化,应用HPLC-MS/MS正离子多反应监测模式测定。结果肝组织中华蟾酥毒基和酯蟾毒配基分别在1~204 ng/g和1~206 ng/g范围内线性关系良好。检测限（S/N≥3）均为0.3 ng/g。基质效应为96.5%~126.7%。萃取回收率为70.0%~82.3%。日内及日间精密度均小于10%。结论所建方法灵敏、可靠,能满足法医毒物分析的鉴定需要。
- 王薇刘明东颜有仪叶懿赵俊红熊卉肖敏廖林川
- 关键词：法医毒理学串联质谱法华蟾酥毒基酯蟾毒配基
- GC/MS法测定人体血液和肾、肝组织中的丙泊酚被引量：2
- 2012年
- 目的采用气相色谱/质谱法检测人体血液和肾、肝组织中的丙泊酚。方法心血和肾、肝组织中的丙泊酚经环己烷提取,采用气相色谱/质谱法,丙泊酚选择m/z 163、178,内标百里香酚选择m/z 150、135进行测定;并考察方法专属性、线性范围、定量线与检出限、回收率与精密度。结果丙泊酚的保留时间为8.17min,与内标百里香酚分离良好;其在心血和肾、肝组织中的检测浓度线性关系良好,r值均大于0.992,最低检测质量浓度分别为0.05μg/mL、0.10μg/g及0.05μg/g,方法回收率90%～110%,日内、日间RSD均小于7%。结论本文方法简便、灵敏、快速,其准确度、精密度和回收率均可满足生物检材中丙泊酚浓度的测定,可在相关研究及实践中选用。
- 王智慧颜有仪詹兰芬唐群星赵俊红王薇廖林川
- 关键词：法医毒物分析丙泊酚生物检材
- HMGN2对大肠埃希氏菌TA系统的作用
- 2009年
- 目的研究HMGN2对大肠埃希氏菌TA系统作用。方法用5%高氯酸萃取兔胸腺组织,通过反相高效液相色谱进一步分离纯化蛋白,用Tricine-SDS-PAGE、AU-PAGE和Dot-blot进行鉴定。采用凝胶迁移阻滞试验(EMSA)检测HMGN2对大肠埃希氏菌TA系统的结合作用;平板菌落记数法检测TA系统激活或非激活条件下,菌体过表达重组HMGN2和对照组对细菌存活百分率的影响。结果HMGN2可阻滞mazEF基因的泳动速率,且随HMGN2浓度增加,阻滞作用增强。利福平激活TA系统,菌体过表达重组HMGN2后,与对照组比较细菌存活量减少约30%,有统计学差异。而头孢哌酮不能激活TA系统,过表达重组HMGN2组和空质粒组CFU%分别为70.2%、68.9%,两者无明显差异。结论HMGN2可加强mazEF系统介导的细菌程序性死亡;HMGN2对TA系统的作用也可能是其抗大肠埃希氏菌作用的机制之一。
- 王薇陈军利黄宁邓璐霞陈善泽李夏吴桂霞曹玥范波赵静韩琴
- 关键词：HMGN2抗菌功能
- HMGN2对肺炎克雷伯氏杆菌耐药性的影响
- 2009年
- 目的探讨HMGN2对肺炎克雷伯氏杆菌耐药性的影响。方法分离、纯化并鉴定兔胸腺组织HMGN2。用质粒提取试剂盒提取耐药肺炎克雷伯杆菌中的质粒pMG252,PCR扩增其耐药基因qnrA;凝胶阻滞实验检测HMGN2与耐药质粒pMG252及qnrA基因结合;用不同浓度的HMGN2刺激培养肺炎克雷伯氏杆菌,然后用试管二倍稀释法测定环丙沙星对其MIC值的改变,微量法测定细菌的生长曲线,检测HMGN2对耐药菌株耐药性的逆转效果;将重组HMGN2及耐药质粒pMG252转化到大肠杆菌DH5α中,检测重组HMGN2对细菌耐药性的影响。结果HMGN2可明显阻滞pMG252质粒及qnrA基因的泳动速率,且随HMGN2浓度增加,qnrA基因的泳动速率逐渐减慢;15μg/ml HMGN2与细菌共孵育后,环丙沙星对耐药肺炎克雷伯氏杆菌的MIC值明显下降,且该耐药株的生长与对照组和低剂量组相比明显的受到抑制;pET-32a-c(+)-HMGN2重组表达质粒可时环丙沙星对大肠杆菌DH5α的MIC值明显小于其对照组,下降到其1/16。结论HMGN2能有效逆转含耐药质粒pMG252的肺炎克雷伯氏杆菌等对喹诺酮类抗生素的耐药性。
- 陈军利王薇黄宁邓璐霞陈善泽李夏吴桂霞曹玥范波赵静韩琴
- 关键词：HMGN2耐药性逆转耐药性逆转
- ALDH2基因多态性与乙醇代谢及外周乙醛积蓄程度的关系被引量：9
- 2014年
- 目的了解不同乙醛脱氢酶2（acetaldehydedehydrogenase2，ALDH2）基因型人群饮酒后，其乙醇药代动力学和外周乙醛积蓄程度。方法收集无血缘关系的志愿者14名，采集静脉血液并且通过聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术提取DNA并检测ALDH2基因型，按一定剂量饮酒后，以顶空气相色谱法于不同时间点同时测定血中乙醇及乙醛的含量并计算药代动力学参数。结果根据电泳结果，野生组为5名野生纯合型ALDH2＊1／＊1个体．突变组为9名突变杂合型ALDH2＊1／＊2个体，血中乙醇和乙醛分别在0～1570．7μg/mL和0～5．1772μg／mL范围内线性关系良好。突变组乙醇及乙醛药时曲线下面积（AUC）以及乙醇的末端消除半衰期（tl／2Z）均大于野生组，乙醇的经生物利用度校正的表观消除率（CL／F）小于野生组（P〈0．05）。结论饮酒后，ALDH2＊I／＊2突变组受酶活性抑制影响，血中乙醇和乙醛代谢减慢，造成外周乙醛的蓄积，从而进一步强化其在体内的作用。
- 熊卉王薇叶懿颜有仪肖敏阮若云廖林川
- 关键词：法医毒理学法医遗传学乙醇乙醛乙醛脱氢酶2
- 利用同源重组构建人肺鳞状细胞癌旁组织的酵母双杂交cDNA文库被引量：2
- 2008年
- 背景:酵母双杂交技术是目前应用最成功的研究蛋白质相互作用的技术平台。目的:运用SMART(switching mechanism at5′end of RNA transc-ript)技术构建人肺鳞状细胞癌旁组织的酵母双杂交cDNA文库。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-07/2007-01在四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学感染免疫实验室完成。材料:人肺鳞状细胞癌旁组织由四川大学华西医学中心附属第一医院胸外科提供。方法:运用SMART技术,以纯化的Poly(A)+RNA为模板,用Powerscript逆转录酶进行转录,并在mRNA的5’末端添加一段5’-oligo作为延伸后的模板,从而富集全长cDNA。纯化的双链cDNA与线性化pGADT7-Rec质粒载体共同转化酵母菌株感受态AH109,经胞内同源重组形成环状文库质粒。应用营养缺陷的方法在SD/-Leu平板上筛选并收集所有克隆从而获得酵母双杂交的人肺鳞状细胞癌旁组织cDNA文库。主要观察指标:采用琼脂糖凝胶电泳观察人肺鳞状细胞癌旁组织的cDNA文库构建结果,并进行文库容量及多态性鉴定。结果:①总RNA和mRNA纯度较好,比较完整。②双链cDNA文库大小介于0.5～3kb之间。③共获得1.2×106转化子,重组子不同插入片断大小在0.3～2kb之间,文库具有较好的多样性。结论:在酵母菌株AH109成功构建了用于酵母双杂交的人肺鳞状细胞癌旁组织cDNA文库。
- 彭媛媛邓璐霞石艳娥赵媛陈军利王薇冯云吴琦王伯瑶黄宁
- 关键词：SMART技术CDNA文库同源重组酵母双杂交
- 甲醛固定组织中士的宁与马钱子碱的LC-MS/MS分析
- 2012年
- 目的建立甲醛固定组织中士的宁与马钱子碱的高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法。方法甲醛固定组织经匀浆、离心后,上清液用SCX固相萃取小柱净化,在SB-C18液相色谱柱上以V(0.1%甲酸溶液)∶V(0.1%甲酸乙腈溶液)=75∶25为流动相进行分离,采用电喷雾离子源(ESI)、正离子检测、多反应监测模式进行分析,外标法定量。结果甲醛固定肾、肝组织中士的宁与马钱子碱色谱分离良好,在0.002～2.0μg/g内均具有良好的线性(r>0.996);肾组织中士的宁和马钱子碱的检出限分别为0.06 ng/g和0.03 ng/g,肝组织中均为0.3ng/g;提取回收率均>74.5%,日内及日间精密度均小于8.2%。结论所建LC-MS/MS方法灵敏度高,可用于甲醛固定组织中士的宁和马钱子碱的检测,以满足法医毒物分析的鉴定需求。
- 詹兰芬刘明东颜有仪叶懿王薇王智慧赵俊红廖林川
- 关键词：法医毒理学液相色谱-串联质谱法马钱子碱甲醛固定
