王锡乐
- 作品数：68 被引量：235H指数：8
- 供职机构：北京市实验动物管理办公室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技基础条件平台建设计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 禽网状内皮组织增殖症病毒流行病学研究及疫苗研制
- 为了研制抗REV基因工程疫苗，以用于预防REV感染，本试验利用Bac-to-Bac Baculovirus Expression Systems，构建了能表达REV囊膜糖蛋白基因(env)的重组杆状病毒。本试验用特定油乳...
- 王锡乐
- 关键词：疫苗母源抗体酶联免疫吸附实验流行病学
- 文献传递
- 黑龙江立克次体与宿主内皮细胞相互作用的初步研究
- 江立克次体为专性内皮细胞内寄生菌,引起的蜱传斑点热已命名为"远东蜱传斑点热".远东蜱传斑点热在我国及我国周边地区广泛存在,为一新发现的人兽共患病.本研究采用黑龙江立克次体的代表株HLJ-054株(分离...
- 孟艳芬段长松王锡乐熊小路温博海
- 关键词：黑龙江立克次体人内皮细胞相互作用致病机制
- 立氏立克次体蛋白抗原基因的表达和重组蛋白抗原的免疫印迹分析被引量：3
- 2009年
- 目的表达立氏立克次体(Rickettsia rickettsii)主要抗原基因,免疫印迹初步分析重组蛋白抗原的抗原性。方法根据立氏立克次体全基因组序列选出主要抗原相关基因,采用PCR从全基因组中扩增抗原相关基因,将扩得的基因片段插入原核表达质粒构建抗原基因重组表达质粒,将重组质粒转化大肠杆菌并诱导转化菌表达重组蛋白抗原。采用立氏立克次体感染的豚鼠血清和斑点热患者血清分别与纯化的重组蛋白抗原做免疫印迹分析。结果经PCR扩增后获得43个目的基因片段,其中36个基因片段在大肠杆菌中高效表达重组蛋白抗原,其中5个蛋白抗原在免疫印迹中与感染豚鼠血清和斑点热患者血清反应均为阳性。结论免疫印迹筛选出5种立氏立克次体重组蛋白抗原,结果提示它们是能够诱导机体产生特异性免疫应答的主要抗原,可作研制斑点热诊断试剂或亚单位疫苗的新候选蛋白抗原。
- 吴德平王颖王锡乐陈梅玲温博海
- 关键词：重组蛋白免疫印迹
- 基因芯片分析单核细胞内贝氏柯克斯体毒力相关基因表达
- 柯克斯体(Coxiella burnetii)是重要人兽共患病Q热(Q fever)病原体,为专性胞内寄生的革兰阴性嗜酸菌.贝氏柯克斯体的高致病性和对环境、理化因素的高抵抗力使其被认作重要的生物战剂/生物恐怖剂.本研究基...
- 王世斌王锡乐熊小路温博海
- 关键词：贝氏柯克斯体单核细胞
- 中国大陆地区实验动物机构、人员和设施现状分析被引量：5
- 2017年
- 本文目的是调查分析中国大陆地区实验动物机构、人员和设施的现状。通过对中国大陆地区31个省、直辖市、自治区和军队系统的调查分析发现,大陆地区实验动物许可证数量共计1870个,其中生产许可证数量为422个,使用许可证数量为1448个。调查还发现,实验动物行业的主力是企业,主要服务于医药卫生行业,而且提供综合性服务已经成为实验动物机构的发展方向;实验动物从业人员的管理走向正轨,虽然科技人员在实验动物从业人员中的比例最高,但学历和职称整体偏低,需要加强人才培养;实验动物生产和使用设施的面积以及建设经费投入逐年增大,但政府对生产设施建设的经费投入有待加强。
- 王锡乐巩薇贺争鸣李根平
- 关键词：实验动物
- 实验动物安乐死技术规范
- 本文件规定了实验动物安乐死实施的基本原则、资源配置以及过程控制等管理和技术方面的要求。本文件适用于实验动物生产和使用机构建立和完善安乐死实施的技术能力和对安乐死实施过程的管理，也适用于认可机构、监管机构以及客户对实验动物...
- 史光华刘晓宇吕龙宝周正宇李娜李秦卢选成魏晓峰王锡乐多曙光李彦青邵奇鸣张晓迪张爱国吴宝金邱业峰卢胜明黄韧高诚
- 蛋白Mip在对贝氏柯克斯体的免疫保护中的应用
- 本发明公开了蛋白Mip在对贝氏柯克斯体的免疫保护中的应用。该应用为SEQ IDNO：1所示蛋白在制备Q热疫苗中的应用。本发明证明贝氏柯克斯体重组膜蛋白Mip可以作为一种抗原蛋白，能够刺激机体产生免疫应答对抗贝氏柯克斯体毒...
- 熊小路温博海王锡乐
- 文献传递
- 氯仿-甲醇提取贝氏柯克斯体残存组分Q热疫苗的免疫原性及免疫保护性研究被引量：6
- 2007年
- 目的实验评价氯仿-甲醇提取贝氏柯克斯体残存组分(CMR)疫苗的免疫特性及免疫保护性。方法采用国内分离贝氏柯克斯体新桥株制备CMR疫苗,用CMR免疫Balb/c小鼠;采用间接免疫荧光法检测CMR免疫小鼠血清特异性抗体水平和用淋巴细胞增殖试验评价CMR疫苗体外刺激小鼠脾细胞增殖的能力;以贝氏柯克斯体攻击免疫小鼠和用贝氏柯克斯体特异的荧光定量PCR检测感染小鼠血和脾脏样本。结果CMR免疫第4周起,小鼠血清中检出高水平的特异性抗体,CMR加氢氧化铝佐剂免疫小鼠的血清特异性抗体显著高于未加佐剂组。CMR在体外刺激正常小鼠和免疫小鼠脾淋巴细胞增殖水平显著高于对照组,WCV则抑制正常脾淋巴细胞增殖。三种剂量(30μg、10μg、1μg/只)CMR免疫小鼠血和脾脏样本贝氏柯克斯体含量显著低于未免疫组,以30μg组及加佐剂免疫小鼠的样本含菌量更显著低于对照组。结论采用我国分离株制备的CMR疫苗能诱导机体产生高效特异性体液免疫和细胞免疫应答,使机体抵抗大剂量的贝氏柯克斯体感染,具有良好的免疫原性和免疫保护性;氢氧化铝佐剂能显著增强CMR疫苗的免疫保护效能。
- 孙长俭陈梅玲杨晓温博海牛东升李青凤王锡乐
- 关键词：贝氏柯克斯体Q热疫苗
- 苣荬菜乙醇提取液抗贝氏柯克斯体的初步研究
- 2011年
- 目的初步探讨苣荬菜（北败酱）乙醇提取物的抗Q热病原菌-贝氏柯克斯体药效。方法用乙醇提取苣荬菜,1g干生药获得1mL提取液;用贝氏柯克斯体腹腔感染Balb/c小鼠（105菌体/只）感染后第2d用倍比（5-160倍）稀释苣荬菜乙醇提取液腹腔给药,每天1次、连续给药5d;第7d处死小鼠并取小鼠脾脏组织提取DNA,用种特异性荧光定量PCR检测DNA。结果 10、20、40、80倍稀释药物组小鼠脾脏贝氏柯克斯体载量约2~5倍少于非药物处理对照组,其中20倍稀释药物组的小鼠脾脏贝氏柯克斯体载量显著（5倍）少于对照组。结论我们的研究首次证明苣荬菜乙醇提取物对贝氏柯克斯体体内生长有明显的抑制作用,提示它具有潜在的抗贝氏柯克斯体药效。
- 温博栋邱建波王锡乐熊小路温博海
- 关键词：贝氏柯克斯体药效抗菌
- 汉赛巴通体重组外膜蛋白Pap31的研制和抗原性分析被引量：2
- 2008年
- 目的克隆并表达汉赛巴通体Pap31外膜蛋白基因,并对其抗原性进行初步分析。方法采用PCR从汉赛巴通体基因组DNA扩增外膜蛋白基因pap31,将目的基因片段插入原核表达质粒pQE30,构建重组质粒pQE30/pap31;将构建的重组质粒转化大肠杆菌M15并诱导目的基因表达,以SDS-PAGE电泳以及免疫印迹法分析表达目的蛋白。结果在SDS-PAGE电泳分析发现pQE30/pap31转化菌高效表达一重组蛋白,经免疫印迹分析发现该蛋白与汉赛巴通体免疫血清发生强烈反应;经间接免疫荧光分析发现该重组蛋白免疫血清能特异识别汉赛巴通体。结论汉赛巴通体外膜蛋白基因pap31在大肠杆菌高效表达,表达的重组Pap31外膜蛋白具有良好的抗原性。
- 王君王锡乐陈梅玲李冠武温博海
- 关键词：外膜蛋白基因表达免疫反应性
