王黎
- 作品数：5 被引量：23H指数：3
- 供职机构：暨南大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 体外诱导人羊膜上皮细胞分化为结膜上皮样细胞被引量：1
- 2014年
- 目的将人羊膜上皮细胞(HAEC)和兔结膜上皮细胞共培养,观察是否能将HAEC诱导分化为结膜样上皮细胞。方法分别采用酶消化法和组织块法获得HAEC和兔结膜上皮细胞,并对培养的细胞进行形态学观察;运用TranswellTM非接触共培养系统将HAEC和兔结膜上皮细胞共培养2周,诱导HAEC分化;通过免疫荧光组织化学染色法检测诱导后HAEC中细胞角蛋白4(CK4)、黏蛋白Muc4、Muc5AC的表达,实时定量PCR(qRT-PCR)检测分化细胞Muc4、Muc5AC mRNA的表达。结果体外培养的人羊膜上皮细胞和兔结膜上皮细胞形态较为相似,免疫荧光组织化学染色法检测到诱导后HAEC中CK4、Muc4、Muc5AC呈阳性表达,qRT-PCR检测分化细胞Muc4、Muc5AC mRNA表达阳性。结论 HAEC在与兔结膜上皮细胞共培养的诱导条件下,可以向结膜上皮样细胞和产黏蛋白细胞转分化。
- 周清刘小勇王黎秦晓艳江明明陈剑
- 关键词：人羊膜上皮细胞共培养转分化
- 人羊膜上皮细胞的体外培养及标志分子的检测分析被引量：4
- 2014年
- 目的进行人羊膜上皮细胞(HAEC)的体外培养,观察其生物学特性,检测其分子特征。方法取剖宫产术后人羊膜,应用酶消化法获得HAEC,倒置显微镜下观察细胞生长变化;CCK-8法检测HAEC的生长曲线;Giemsa染色观察HAEC的克隆形成率;流式细胞术检测HAEC的细胞周期;取第2代HAEC,流式细胞术检测其CD29、CD31、CD44、CD59、CD105、CD117、CD133、HLA-DR的表达。免疫荧光法检测其CD9、上皮性钙黏素(E-cadherin)、足糖萼素样蛋白(PODXL)、阶段特异性胚胎表面抗原4(SSEA-4)、性别决定区Y相关因子2蛋白(SOX2)、SSEA-1、Nanog蛋白、八聚体结合蛋白3/4(Oct-3/4)的表达情况。结果酶消化法可以获得较纯的HAEC,细胞呈贴壁生长,呈多角形,核呈圆形。细胞在贴壁后第3天进入指数生长期。细胞周期分析显示66%处于G0/G1期,S期细胞占31.69%,G2/M期细胞占2.31%。HAEC的克隆形成率为(9.33±2.00)%。流式细胞仪检测显示HAEC阳性表达CD44、CD29、CD105、CD59,不表达CD31、CD117、CD133、HLA-DR。免疫荧光法检测显示HAEC表达胚胎干细胞相关分子CD9、E-cadherin、PODXL、SSEA-4、SOX2、SSEA-1、Nanog、Oct-3/4。结论HAEC可以在体外培养生长并在一定时期内保持其增殖活性;HAEC表达胚胎干细胞相关的表面标志分子。
- 刘小勇周清张晓玲秦晓艳王雯婕王黎孟晶陈剑
- 关键词：羊膜上皮细胞细胞培养胚胎干细胞
- 角膜塑形镜对青少年近视患者眼轴影响的Meta分析被引量：12
- 2014年
- 目的 系统评价青少年近视患者配戴角膜塑形镜及框架眼镜1～2年间眼轴长度的变化.方法 计算机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library、CBM、CNKI、VIP和WanFang Data,检索时限均从建库至2013年7月,文种限中、英文.资料提取和纳入研究的方法学质量评价后,采用RevMan5.1软件进行Meta分析.结果 最终纳入7篇文献,共1 346只眼.Meta分析结果显示：与配戴框架眼镜组比较,配戴角膜塑形镜1年、2年,眼轴长度增长明显变缓[1年：MD=-0.52,95％CI（-0.82,-0.21）,P=0.0009;2年：MD=-0.35,95％CI（-0.60,-0.09）,P=0.0008].结论 角膜塑形镜能够延缓青少年近视患者眼轴的增长,起到控制近视发展的作用.但长期疗效仍需进一步随访证实.
- 江明明周清陈剑刘小勇王黎黄祥訸
- 关键词：青少年近视眼轴META分析
- CM-Dil与DAPI联合标记人羊膜上皮细胞的可行性研究被引量：1
- 2013年
- 目的建立人羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cell，HAEC）的体外培养方法，并探讨氯甲基苯甲酰胺（CM—Dil）与4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）对HAEC进行联合标记示踪的可行性。方法运用酶消化法获取HAEC，收集第2代细胞，流式细胞仪检测CD29、CD34、CD44、CIM5和CD105的表达率，SP免疫化学法鉴定HAEC。CM—Dil与DAPI对HAEC进行体外标记，荧光倒置显微镜下观察1d、7d和14d的标记情况，台盼蓝染色检测细胞活力，CCK-8法检测细胞增殖以明确联合标记对体外培养HAEC生长特性的影响。结果HAEC贴壁培养后呈扁平多角形，CD29、CD34、CD44、CD45和CD105的阳性率分别为99．64％、2．21％、32．41％、0．84％、36．70％，细胞角蛋白Keratin阳性表达。HAEC在cM—Dil和DAPI联合标记1d后，荧光显微镜下可观察到细胞膜和细胞核分别在不同波长下呈红色和蓝色荧光，标记率为100％；14d后，经传代培养的HAEC荧光强度与1d时相近，细胞形态无改变。台盼蓝染色显示标记细胞存活率为96．8％-98．9％，CCK-8检测标记细胞的增殖力较未标记组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CM—Dil和DAPI可有效标记HAEC，染色简单、无细胞毒性，荧光衰减较慢，可作为HAEC的标记及示踪方法。
- 王黎周清杨艳陈剑徐锦堂
- 关键词：人羊膜上皮细胞示踪
- 痛性眼肌麻痹综合征1例被引量：5
- 2014年
- 患者,男,54岁。2013年8月6日以＂双眼视物重影1个月余,伴左眼痛及同侧头痛＂为主诉入院。1个月前患者因视物重影曾多次就诊当地医院,鼻内窥镜未见异常,头颅MRI及CT显示：左侧下直肌肥厚,近眶尖处显著,给予激素及营养神经血管治疗后效果不佳,遂就诊我科。入院时患者精神不振,面容痛苦,常取左侧蜷缩位。
- 江明明周清蔡香然刘小勇陈剑王黎黄祥訸
- 关键词：痛性眼肌麻痹综合征视物重影头颅MRI神经血管精神不振肌肥厚
