申泉
- 作品数：41 被引量：162H指数：7
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- 利用转座子将parDE与pCPP430体内重组提高生防工程菌的遗传稳定性被引量：3
- 2001年
- 带有梨火疫欧氏杆菌 (Erwiniaamylovora)完整的hrp基因簇的重组粘粒pCPP43 0转化到植物的附生菌成团泛菌 (Pantoeaagglomerans) 3 0 8R中后可以使成团泛菌获得在烟草等植物上引发过敏反应和诱导植物抗病性的能力。pCPP43 0携带着约 40kb的梨火疫欧氏杆菌的染色体DNA ,在成团泛菌 3 0 8R中不能稳定遗传。本文首先把广宿主范围质粒RK2的控制质粒稳定性的parDE片段插入到转座载体pUT mini Tn5Km的唯一克隆位点NotI上 ,然后利用Tn5的转座特性 ,将parDE体内重组到pCPP43 0上 ,经过在无抗生素选择压下反复传代和过敏反应活性测定 ,筛选到了遗传稳定性显著提高的重组生防工程菌。
- 张丽申泉赵立平
- 关键词：过敏反应质粒稳定性KM
- 一种重组杆状病毒
- 本发明提供了一种重组杆状病毒，该重组病毒为核苷酸序列为SEQ ID No1.的基因通过转座重组整合到杆状病毒AcMNPV基因组上获得。本发明进一步提供了其构建方法，包括分别从AcMNPV和pEGFP‑N1载体中获得iap...
- 付月君曹蕾菥梁爱华杜军李新锋张志云王伟柴宝峰申泉
- 重组生防菌308R(pKSH)的遗传稳定性研究被引量：2
- 2006年
- 工程菌308R(pKSH)携带有梨火疫欧文氏杆菌的hrpN基因,能产生并分泌诱导植物抗病性蛋白-Harpin。该工程菌在无选择压培养基中生长50代,带有重组质粒pKSH的细胞占总菌量的23·1%,对照菌308R(pCPP430)的细胞占4·75%。将工程菌和对照菌喷雾到番茄叶面,保湿条件下的13d内,叶面菌量维持在105cfu/cm2以上,自然条件下的5d内,菌量维持在104cfu/cm2以上,其间308R(pKSH)的稳定性一直高于对照菌。因此证明工程菌308R(pKSH)比对照菌308R(pCPP430)稳定性有所提高,但还是不够理想。讨论了该工程菌不稳定的原因以及改进途径。
- 李艳琴白艳申泉
- 凝血因子Ⅸ无义突变真核表达载体的构建及其在COS-7细胞的表达被引量：1
- 2010年
- 本研究以含有fⅨ cDNA的pcDNA3.1质粒为模板构建4种包含不同类型无义突变的fⅨ真核表达载体并进行鉴定,实现其在COS-7细胞中的表达。采用以PCR为基础的定点突变法体外构建fⅨ基因无义突变体,并通过DNA序列分析进一步鉴定证实;应用脂质体转化技术将野生型、突变型fⅨ表达载体分别瞬时转染COS-7细胞,采用实时定量PCR鉴定fⅨ mRNA在各组的相对表达水平。结果表明,4个突变型质粒除相应位点的无义突变外,未见其它突变,提示无义突变载体构建成功。实时定量PCR鉴定表明,各突变组真核表达载体已成功转染COS-7细胞株并能转录为mRNA。结论:采用以PCR为基础的定点突变法可在体外构建fⅨ真核表达载体,并可在COS-7细胞中表达,其转录过程中不引发mRNA降解,这为进一步研究无义突变引起FⅨ功能丧失及表达量降低的机制和治疗研究提供了物质基础。
- 聂欣杨林花柴宝峰申泉张媛张耀方陈剑芳
- 关键词：凝血因子IX真核表达载体血友病B
- 植病生防菌成团泛菌电击转化条件的研究被引量：4
- 2000年
- 研究了植病生防菌成团泛菌（Ｐａｎｔｏｅａ ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ）的电击转化条件。结果表明受体菌固体培养、生长到对数早期时的细胞转化效果最好；质粒ＤＮＡ分子量增加１０培，转化效率降低１００倍；质粒ＤＮＡ浓度在０．０１－１μｇ／μＬ范围内其变化与转化频率呈正比，与转化效率成反比；从成团泛菌中提纯的质粒ＤＮＡ比从大肠杆菌中提纯的相同质粒ＤＮＡ转化成团泛菌的效率高出３０倍；
- 李艳琴申泉赵春贵李新锋赵立平
- 关键词：电击
- 无义密码子介导的mRNA降解机制与疾病被引量：1
- 2008年
- 无义密码子介导的mRNA降解（nonsense mediated mRNA decay，NMD）现象的发现，最早源于1979年美国学者Losson和Lacroute在对酵母菌URA3基因的研究中观察到无义密码子突变体在mRNA瞬时合成率并非很低的情况下能够降低mRNA水平。随着分子生物学的研究进展，NMD机制在酵母、果蝇、线虫以及哺乳动物细胞中都得到了证实。
- 申泉柴宝峰
- 关键词：MRNA水平密码子降解机制介导疾病RNA降解
- 一种重组杆状病毒
- 本发明提供了一种重组杆状病毒，该重组病毒为核苷酸序列为SEQ ID No1.的基因通过转座重组整合到杆状病毒AcMNPV基因组上获得。本发明进一步提供了其构建方法，包括分别从AcMNPV和pEGFP‑N1载体中获得iap...
- 付月君曹蕾菥梁爱华杜军李新锋张志云王伟柴宝峰申泉
- 文献传递
- 芽孢杆菌制剂及其生产方法和用途
- 本发明涉及一种芽孢杆菌制剂及其生产方法，以及该制剂的应用。其特征是采用从植物上分离、纯化的单一枯草芽孢杆菌菌株CGMCC 0420和深层发酵的方法制备而成的液体活菌制剂。该制剂系纯种发酵，其生产工艺简单，成本低，保存期长...
- 赵立平赵艮贵李新峰李艳琴申泉
- 文献传递
- 一种重组腺病毒及其制备方法和应用
- 利用哺乳动物偏爱密码子表优化并合成东亚钳蝎氯离子通道毒素(BmK CT)基因，将其克隆到腺病毒中间载体中获得含该毒素基因的重组质粒pShuttle-IRES-hrGFP-2-BmK CT，将该重组质粒转化到含有腺病毒骨架...
- 梁爱华杜军付月君张志云王伟柴宝峰申泉杨仁佳
- 文献传递
- 人工合成猪生长激素基因及其表达纯化方法
- 本发明依据大肠杆菌偏爱密码子使用原则，设计了适合在大肠杆菌中高效表达的猪生长激素PGH的DNA序列，其表达的PGH蛋白与猪体内表达的PGH编码区氨基酸序列一致。将该基因克隆到pET-28a<Sup>+</Sup>表达系统...
- 柴宝峰梁爱华张振兴王伟付月君申泉张志云
- 文献传递
