白建萍
- 作品数：91 被引量：590H指数：14
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划军队医药卫生科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程更多>>
- 新型仿生活性人工骨诱导兔腰椎横突间脊柱融合研究被引量：14
- 2005年
- 目的采用先进快速成形技术(RP)结合骨组织工程方法研制新型仿生活性人工骨,并探讨其在兔腰椎横突间脊柱融合的应用情况.方法首先采用RP制备薄块型聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙(PLGA/TCP)人工骨载体,进而高效复合牛骨形态发生蛋白(bBMP)以制备仿生活性人工骨,扫描电镜观察载体材料及人工骨超微结构.将健康新西兰兔28只(平均体重4.1 kg)随机均分为A、B两组(每组14只).A组:于兔腰4～5右、左侧横突间分别植入仿生活性人工骨(A1组)、自体髂骨(A2组);B组:于兔腰4～5右、左侧横突间分别植入复合自体新鲜红骨髓的PLGA/TCP载体材料(B1组)、单纯PLGA/TCP载体材料(B2组).于术后6周和12周,定期大体观察、手法检测、组织学[苏木素-伊红(HE)、三色法及四环素-钙黄绿素荧光检测]和影像学方法(X、CT)系统评价脊柱融合情况.结果 RP制备的PLGA/TCP载体具有规则的空间支架结构、相互贯通的孔隙及材料表面微孔特征,这些均有利于bBMP的高效复合.动物实验结果显示,A1组仿生活性人工骨植入具有强的诱骨活性及骨性融合能力,不仅成骨早、新骨形成量大,而且在新骨形成及改塑的同时载体材料逐渐降解,术后12周可形成较为典型的骨小梁及骨髓结构,骨代谢活性亦接近正常.A2组自体髂骨移植能达到良好骨性融合,但术后12周所形成的新骨结构尚须进一步塑形及完善.B1组、B2组术后12周仍遗有较多的载体材料有待降解,基本无成骨能力.术后12周,A1、A2、B1、B2 4组横突间融合率分别为100.0%、58.3%、18.2%和0%,A1组融合率最高(P<0.01).结论先进RP制备的PLGA/TCP载体不仅具有良好的空间超微结构及孔隙特性,而且能高效复合bBMP以正确构建新型组织工程人工骨.该仿生活性人工骨诱导兔横突间脊柱融合获得成功,为生物制造脊柱外科所需的新型、高效人工骨移植材料奠定了重要基础.
- 马兴胡蕴玉熊卓颜永年吕荣王军李丹徐新智白建萍
- 关键词：脊柱人工骨植入腰椎横突新西兰兔脊柱融合生活性骨诱导
- 人松质骨来源基质细胞克隆培养与成体干细胞特性研究被引量：4
- 2007年
- 目的观察培养的人松质骨来源基质干细胞是否具有骨髓来源基质干细胞的多向分化的成体干细胞特性。方法取股骨、髂骨3 mm×3 mm×3 mm松质骨,剪碎冲洗,用有限稀释法进行克隆培养,然后对传代细胞用化学药物或生长因子进行成骨、成软骨以及心肌细胞分化诱导培养,并检测成骨、成软骨及心肌细胞表型。结果克隆培养细胞培养2周开始表达CD29、CD59、CD116;成骨诱导条件下2周细胞开始表达Ⅰ型胶原、骨钙素,至第28天碱性磷酸酶阳性率可达95%;成软骨诱导条件下细胞表达Ⅱ胶原,甲苯胺蓝染色阳性;心肌细胞诱导条件下细胞表达肌钙蛋白,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测有MLC-2V的mRNA表达,4周左右可见细胞连接形成合胞体样结构生长,并有自发性搏动。结论人松质骨来源基质干细胞具有多向分化能力的基质干细胞,在临床和实验研究中可以替代骨髓来源的间充质干细胞。
- 滕勇胡蕴玉王臻关玉成白建萍
- 关键词：细胞培养分化成体干细胞克隆
- 抗感染重组合异种骨的生物相容性研究被引量：12
- 2002年
- 目的 检测抗感染重组合异种骨（ARBX）产品的生物相容性,确保ARBX产品在临床上安全、有效。方法 根据卫生部制定的《生物材料和制品的生物学评价标准》及《相关生物材料和制品的企业标准 Q/JGY001-94》,进行了ARBX急性毒性试验、过敏性试验、熟原试验、骨内埋植试验、肌内埋植试验、溶血试验及细胞毒性试验。结果ARBX未引起小鼠急性毒性反应、豚鼠过敏反应及家兔热原反应。在兔骨内和小鼠肌内埋植,既未产生纤维包膜,也未引起淋巴细胞及炎性细胞浸润。对家兔红细胞溶血率为1.2％,无溶血现象。体外细胞毒性反应指标R=0.25/0,无细胞毒性。结论ARBX的生物相容性符合国家规定的生物材料和制品的生物学标准及企业标准,可试用于临床治疗相关疾病。
- 袁志胡蕴玉赵玉珍孟国林孙梁吕荣白建萍王哲
- 关键词：抗感染重组合异种骨生物相容性生物材料骨缺损
- 重组人骨形态发生蛋白-2与卵磷脂复合材料修复兔长骨节段性骨缺损被引量：1
- 2005年
- 目的:观察重组人骨形态发生蛋白-2与卵磷脂复合材料修复兔长骨节段性骨缺损的能力,检验重组人骨形态发生蛋白-2的诱导成骨活性及卵磷脂作为重组人骨形态发生蛋白-2载体材料的可行性。方法:实验于2003-12/2004-02在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所完成。实验动物由第四军医大学动物研究中心提供,材料由华东基因技术研究所提供。设实验组和对照组两组,24只大耳白兔随机分为两组,每组12只。手术造成桡骨中上段15mm骨缺损,实验组植入重组人骨形态发生蛋白-2与卵磷脂复合材料片,其中重组人骨形态发生蛋白-2的含量为1.0mg,对照组植入单纯卵磷脂片。术后通过影像学、组织学观察及骨密度测定,评价重组人骨形态发生蛋白-2与卵磷脂复合材料对兔长骨节段性骨缺损的修复效果。结果:各组12只兔均纳入最后分析。①骨缺损修复的影像学表现:实验组术后4周时缺损区有大量新生骨痂形成,术后8周时新生骨痂将缺损区桥接,术后12周时达到皮质骨连接;对照组无骨痂形成。②骨缺损修复的组织学表现:实验组术后4周时的骨痂为编织骨,术后8周时骨痂外层为板层骨,中央为编织骨,内有骨髓组织,术后12周时骨痂外层为皮质骨,中央为髓腔组织;对照组缺损区为结缔组织和肌组织充填。③骨密度值比较:实验组术后12周时骨痂密度达到正常值的76%。结论:重组人骨形态发生蛋白-2与卵磷脂复合材料对兔桡骨节段骨缺损具有很好的修复效果,重组人骨形态发生蛋白-2具有良好的成骨活性,卵磷脂可以作为重组人骨形态发生蛋白-2的一种新的载体材料。
- 徐建强胡蕴玉孙梁白建萍吕荣王军
- 关键词：骨形态发生蛋白质类磷脂酰胆碱类骨疾病
- 骨组织工程快速成型支架改性的相关研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨胶原杂化及磷灰石表面沉积改性后的聚乳酸一羟基乙酸共聚物／β-磷酸三钙（PLGA／β—TCP）作为快速成型支架应用于骨组织工程的可行性。方法使用骨髓基质干细胞对胶原杂化及磷灰石表面沉积改性后的PLGA／β-TCP的生物相容性进行评估，通过扫描电镜观察改性后材料的表面特性及细胞与材料复合的形态学特征；细胞与材料复合后的繁殖与分化能力分别使用细胞计数及碱性磷酸酶定量方法进行评估。结果通过对亲水性、细胞增殖能力及碱性磷酸酶测定证实改性后的PLGA／β-TCP快速成型支架较单纯材料其亲水性及生物相容性有明显提高（P〈0．05）。结论胶原杂化及磷灰石表面沉积改性后的PLGA／β—TCP快速成型支架可作为三维支架应用于骨组织工程。
- 庞龙胡蕴玉颜永年刘利熊卓魏义勇白建萍
- 关键词：胶原钙磷盐
- 人骨髓间充质干细胞的优化培养被引量：10
- 2004年
- 目的:骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcellsMSCs)培养大多集中在动物,探讨人MSCs的优化培养方法,为组织工程临床应用奠定基础。方法:手术切取患者骨松质3mm×3mm×3mm,在含血清培养基内用剪刀将其剪为1mm×1mm×1mm大小,然后用注射器冲洗;抽取患者骨髓5mL。分别用贴壁法和密度梯度离心法原代培养。比较不同培养方法MSCs的生长情况。对各组传代细胞用化学药物进行成骨诱导培养,并检测成骨细胞表型。结果:手术切取患者骨松质和抽取患者骨髓均能培养出骨髓间充质干细胞,切取骨松质获取的细胞数量大,5m骨髓培养细胞数平均可达L2.43×108,3mm×3mm×3mm骨松质可以获取MSCs的平均细胞数可达9.57×108;全骨髓法细胞贴壁时间早两三天,密度梯度离心法细胞均一性好,利于纯化。结论:临床组织工程中可以根据情况和需要采用不同方法获取MSCs。
- 滕勇胡蕴玉白建萍王臻戴先文李明全
- 关键词：人骨髓间充质干细胞切取密度梯度离心法细胞数
- 重组人骨形成蛋白2诱导脂肪成体干细胞向软骨分化的形态学研究被引量：10
- 2006年
- 目的探索分离培养兔脂肪成体干细胞,经重组人骨形成蛋白2(recombinanthumanbonemorphogeneticprotein2,rhBMP-2)定向诱导后,向软骨细胞分化的可能。方法将4月龄新西兰兔脂肪组织机械分割,通过型胶原酶消化后得到脂肪成体干细胞(adipose-derivedadultstemcells,ADASCs),采用微球方法进行培养,在rhBMP-2诱导组、重组人转化生长因子β1(recombinanthumantransforminggrowthfactorβ1,rhTGF-β1)诱导组和rhBMP-2+rhTGF-β1(共同诱导组)干预6d后,各组诱导液中分别加入维生素C50μg/ml,再干预8d,应用HE、Alcianblue、Vonkossa染色和型胶原免疫组织化学染色等组织学方法对诱导后的细胞进行鉴定。结果连续诱导培养14d后,各诱导组HE染色显示软骨陷窝形成,对照组软骨陷窝形成不明显。Alcianblue染色见细胞基质中富含蛋白多糖,胞外基质分泌较多的型胶原;但Vonkossa染色为阴性;对照组均为阴性。结论在微球方法培养下,通过相关形态学研究表明,rhBMP-2具有诱导脂肪成体干细胞向软骨细胞分化的能力,将为采用ADASCs修复软骨损伤奠定理论基础。
- 魏义勇胡蕴玉郝伟吕荣王军白建萍
- 关键词：软骨细胞
- 永生化人骨髓基质干细胞系的生物学特征被引量：2
- 2010年
- [目的]明确永生化人骨髓基质干细胞系MSCxj的生物学特征。[方法]MSCxj细胞在连续体外培养过程中,相差显微镜及透射显微镜观察细胞的形态特征;计算群体倍增时间,测定细胞增殖周期,计算克隆形成率等生长增殖特征并与原代人骨髓基质干细胞BMSCs-2比较。[结果]细胞形态为成纤维细胞样,细胞器发达;群体倍增时间40.8 h,较BMSCs-2的43.82 h短,MSCxj生长增殖活跃;MSCxj克隆形成率10.9%,BMSCs-2为11.5%,具有克隆形成能力。[结论]MSCxj细胞保持了人骨髓基质干细胞的生物学特征。
- 滕勇胡蕴玉宿学家李旭升白建萍张德志
- 关键词：骨髓基质干细胞生物学细胞系
- 持续性压力培养环境对兔骨髓基质干细胞增殖的影响被引量：3
- 2009年
- 背景:骨髓基质干细胞来源的成骨细胞是骨髓腔内主要的受力细胞,在人工关节置换病例中,其生命活动状况与假体传导压力有密切关系。目的:观察持续性压力培养环境对兔骨髓基质干细胞增殖的影响,揭示持续压力致假体松动下沉进展及其置换后活动影响的生物学机制。设计、时间及地点:随机分组设计,细胞学体外观察,于2004-02/2007-10在解放军第四军医大学骨科研究所完成。材料:出生1个月的新西兰幼兔1只,体质量0.5kg,取其骨髓基质干细胞用于实验。方法:传代培养兔骨髓基质干细胞,将生长良好的第3代骨髓基质干细胞按1×104个/孔随机接种于7块24孔培养板,14h后细胞完全贴壁,换新鲜含体积分数为10%胎牛血清的DMEM。实验随机将4块培养板分为4组:对照组不予加压,20kPa持续压力组,60kPa持续压力组,100kPa持续压力组分别在规定的时间内每天施以20,60,100kPa的持续3h压力。主要观察指标:四甲基偶氮唑盐法检测培养1,3,5,7d各组骨髓基质干细胞的吸光度值变化。结果:除培养第1天外,第3,5,7天各压力组骨髓基质干细胞的吸光度值均低于对照组(P<0.01)。其中第3天20kPa持续压力组与60kPa持续压力组吸光度值差异无显著性意义(P>0.05),但均高于100kPa持续压力组(P<0.05)。第5天不同持续压力组吸光度值两两比较差异具有显著性意义(P<0.05),压力越高,吸光度值越低。第7天100kPa持续压力组吸光度值低于压力20kPa持续压力组(P<0.05)。结论:关节置换后早期患者不宜过早下地,否则将产生持续性应力,可以引起骨髓腔内骨髓基质干细胞的抑止,从而不利于骨质愈合,容易产生假体下沉和松动。
- 彭磊孙铮王臻王军白建萍宋世锋马钊
- 关键词：骨髓基质干细胞髋关节置换细胞增殖
- rh-BMP-2壳聚糖微球的制备及体外检测被引量：17
- 2009年
- [目的]以壳聚糖为辅料,通过乳化交联法制备新型重组人骨形态发生蛋白-2缓释微球,并对其粒径、载药、体外释药、理化特性及降解特性进行检测,以评估应用生物可降解的壳聚糖微球作为BMP-2缓释载体的可行性。[方法]以京尼平作为交联剂,应用乳化交联法制备具有控制释放功能的负载rhBMP-2壳聚糖微球,应用扫描电镜观察微球的形态和粒径;利用酶联免疫吸附实验(ELISA)动态检测BMP-2壳聚糖微球的载药率、包封率和缓释规律以分析微球的缓释能力。[结果]乳化交联法制备的壳聚糖微球,球形良好,球体表面光滑,具有较高的包封率(>85%)。体外药物释放试验表明,rhBMP-2可以从壳聚糖微球中缓慢释放,整个释放过程可达30 d。[结论]应用乳化交联法制备的负载rhBMP-2壳聚糖缓释微球,具有很好的控制释放rhBMP-2的能力。这种新型药物控制释放系统在细胞因子的控制释放及骨组织工程中有潜在的应用价值。
- 黄鑫孟国林刘建李丹袁志张金康白建萍
- 关键词：壳聚糖微球成骨京尼平
