石建斌
- 作品数：9 被引量：29H指数：4
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- 马铃薯T-DNA插入拷贝数的检测及对农艺性状的影响研究
- 2015年
- 以转基因马铃薯株系为材料,采用Real-time PCR方法,以SYBR Green I为荧光染料,以马铃薯块茎贮藏蛋白基因(Patatin)作为内参基因,以植物表达载体上的潮霉素抗性基因(HPT)为筛选标记基因,建立目的基因CT值与起始模版的相关性标准曲线,通过实时荧光定量PCR分别获得每个样品中内参基因和外源基因的CT值,根据Pfaffl法计算获得了T-DNA在转基因马铃薯中的拷贝数,且与Southern blot方法进行了比较,并结合田间农艺性状,分析了外源基因拷贝数马铃薯株高及薯块产量的影响。结果表明,内参基因和外源基因标准曲线的相关系数分别为R2=0.996、R2=0.995和R2=0.990。在所测的23株转基因株系中,12株为单拷贝插入,6株为双拷贝,5株为多拷贝。Real-time PCR比Southern blot方法结果更准确、操作更简便快捷、成本更低。且插入拷贝数的多少与马铃薯田间农艺性状变化有一定的关系,发现2拷贝以上的T-DNA插入较容易引起部分性状的改变。
- 石建斌杨永智王舰
- 关键词：马铃薯实时荧光定量PCR拷贝数农艺性状
- 蚕豆种质资源清蛋白遗传多样性分析被引量：6
- 2012年
- 利用SDS-PAGE对101份蚕豆种质资源进行了清蛋白遗传多样性分析,共检测出蛋白带2625条。除共有带外,迁移率不同的谱带类型36种,其中相对分子量为92kD、75kD、62kD、40kD、34kD、17kD、13kD的谱带在检测的种质材料中出现的频率最高,分别为92.08%、90.10%、99.01%、95.05%、95.05%、98.02%、95.05%。其余29种谱带类型具有较强的多态性,多态性谱带平均为16.09条,多态性比例为44.69%。每份种质材料的清蛋白谱带数介于21～31条之间,平均25.99条;供试种质间遗传相似系数0.6111～0.9722,平均0.7122。3个地理类群内多样性指数0.9879,类群间多样性指数0.0121,表明蚕豆清蛋白的变异主要来源于类群内。聚类分析将参试种质分为6类,与以往蚕豆种质分类研究结果类似,表明清蛋白能在一定程度上反映种质间的亲缘关系。研究结果对于蚕豆蛋白质品质育种具有一定的参考价值。
- 石建斌侯万伟刘玉皎马晓岗
- 关键词：蚕豆清蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳遗传相似系数
- 蚕豆种子贮藏蛋白质组分的比较研究被引量：8
- 2012年
- 以10份蚕豆品种为材料,利用SDS-PAGE方法,对其种子贮藏蛋白亚基组成进行了分析,结果表明:不同品种间的种子贮藏蛋白具有一定的差异,表现出一定的多态性;共分离出23条迁移率不同的亚基条带,13条具有多态性;利用贮藏蛋白亚基条带的信息,分析了品种间的蛋白相似度,相似度指数0.619～0.947,平均0.744;并通过聚类分析,在遗传相似系数0.8260水平上,将供试材料分为了3类,其中第2类具有较丰富的多样性,多样性指数达3.9296;共筛选出7对亲缘关系较远的杂交组合,可为蚕豆品种选育提供一定的科学依据。
- 石建斌侯万伟刘玉皎
- 关键词：蚕豆种子贮藏蛋白SDS-PAGE亲缘关系
- 青海不同基因型蚕豆蛋白质组成及其亚基的遗传变异分析
- 蚕豆（ViciafabaL.）是一种重要的豆类作物，也是我国西部干旱、半干旱地区种植的主要豆类之一，其含有比较丰富的蛋白质、纤维素、维生素及许多矿物质。前期对蚕豆的研究多集中在形态结构方面，表明蚕豆在形态结构上存在着较为...
- 石建斌
- 关键词：蚕豆蛋白质组成
- 文献传递
- 蚕豆蛋白质亚基分析与特异种质鉴定被引量：7
- 2012年
- 采用SDS-PAGE方法,对112份不同基因型蚕豆的清蛋白和球蛋白亚基的差异性进行分析。结果显示:(1)蚕豆清蛋白和球蛋白亚基的有效等位变异分别为1.750 0±0.452 3、1.545 5±0.522 2,多态性比率分别为75.00%、54.55%,清蛋白的亚基遗传多样性指数较球蛋白亚基高。(2)蚕豆清蛋白和球蛋白分别含有在不同基因型蚕豆中构成不同的12和10个亚基,其中清蛋白含有9个基本亚基,116kD、96kD、45kD为清蛋白的3个特异亚基;球蛋白含有8个基本亚基,58kD、35kD为球蛋白的2个特异亚基;研究共鉴定筛选出42个含有清蛋白特异亚基和21个含有球蛋白亚基的种质资源。(3)清蛋白的97kD、63kD基本亚基和球蛋白的97kD、56kD、47kD基本亚基存在一定的缺失现象,共鉴定出19个清蛋白亚基和21个球蛋白亚基缺失的优异种质。研究表明,蚕豆清蛋白和球蛋白亚基构成在不同种质之间具有差异性,除基本亚基外,部分种质还含有特异亚基或缺失亚基。
- 刘玉皎侯万伟石建斌
- 关键词：蚕豆蛋白亚基多样性种质鉴定
- 青海不同基因型蚕豆蛋白组成及清蛋白和球蛋白亚基的SDS-PAGE分析被引量：7
- 2012年
- 采用连续提取蛋白法和SDS-PAGE技术分析了青海省11个不同基因型蚕豆的蛋白质组成以及清蛋白、球蛋白亚基的差异.结果表明:蚕豆蛋白主要由清蛋白、球蛋白、谷蛋白、醇溶蛋白和其他蛋白组成,不同基因型蚕豆的蛋白质含量及其组成存在一定的变异,其中清蛋白和球蛋白是蚕豆蛋白主要组成部分,占总蛋白的75.08%.不同基因型蚕豆的清蛋白和球蛋白亚基存在一定的差异,蚕豆清蛋白亚基由97、66+67、63、50、45、38+41、22ku等7个基本亚基组成外,还有96ku特异亚基;球蛋白亚基由63、56、52、47、22ku等5个基本亚基组成外,还有46ku的特异亚基.
- 刘玉皎侯万伟李萍石建斌
- 关键词：蚕豆蛋白亚基SDS-PAGE
- 马铃薯赤霉素合成代谢途径关键酶基因GA2ox1、GA20ox1的克隆与功能分析
- 赤霉素（GA）作为植物体内一种内源激素，在高等植物生长的整个生命周期，起着重要的调控作用。GA-20氧化酶和GA-2氧化酶是赤霉素合成途径中第三阶段的关键酶，它们均由多基因家族编码，参与着赤霉素水平的调控。GA-20氧化...
- 石建斌
- 关键词：马铃薯种植良种培育转基因技术内源激素
- 青海不同生态环境下蚕豆蛋白亚基差异性研究被引量：1
- 2011年
- 以青海不同生态环境条件下的青海13号蚕豆为材料,利用SDS-PAGE电泳技术分离清蛋白和球蛋白各主要亚基,通过Band Scan 5.0软件得出各亚基的相对含量。结果表明,蚕豆清蛋白和球蛋白亚基构成具有差异性,发现2个99 ku、61 ku的清蛋白特异亚基和3个94 ku、64 ku、39 ku的球蛋白特异亚基,57 ku、47 ku等2个清蛋白亚基和61 ku、51 ku等2个球蛋白亚基具有一定的缺失现象。各亚基在含量上也各不相同,存在一定差别,可以看出,蚕豆蛋白亚基的增失及含量随生态环境的不同存在一定的变异。本研究对蚕豆品质育种具有一定的参考价值。
- 石建斌侯万伟刘玉皎马晓岗
- 关键词：蚕豆蛋白亚基SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳生态环境
- 马铃薯突变体赤霉素代谢关键酶基因差异表达分析被引量：4
- 2016年
- 为揭示马铃薯株高突变与赤霉素代谢途径关键酶基因的关系,以马铃薯株高突变株系4P2-9为材料,利用实时荧光定量PCR方法中的相对定量RT-PCR建立双标准曲线,以Actin基因为内参基因,对高原4号及其株高突变材料4P2-9中的赤霉素代谢相关基因的表达情况进行了检测。结果显示,4P2-9的株高及节间数显著低于对照材料(P<0.05),节间长度显著高于对照(P<0.05),赤霉素代谢的关键酶基因KS、KO和GID1表达量显著下调,分别为对照材料的0.725倍、0.657倍和0.890倍;GA20ox1和GA2ox1基因的表达量表现为上调,分别为对照材料的1.557倍和1.425倍。结果表明,赤霉素代谢过程中关键酶基因表达量的改变是造成4P2-9材料株高变化的原因之一,而GA20ox1和GA2ox1基因的表达量的上调是促使株高降低的主要因素。
- 石建斌杨永智王舰
- 关键词：马铃薯赤霉素基因表达量
