穆瑞斌
- 作品数：10 被引量：28H指数：3
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 经导管与外科手术闭合室间隔缺损的对比研究
- 目的:对比分析外科手术和经导管闭合室间隔缺损 (VSD)的临床资料,探讨介入治疗 VSD 的可行性。方法:回顾分析2001-12～2002-07在我院心内科行经导管闭合 VSD 52例,同期行外科手术缝合 VSD 59例...
- 穆瑞斌秦永文赵仙先王胜强
- 文献传递
- 膜部室间隔缺损封堵器的研制和临床应用进展被引量：14
- 2004年
- 穆瑞斌秦永文
- 关键词：膜部室间隔缺损封堵器VSD
- 抗血小板多肽在大肠杆菌中的克隆和表达被引量：1
- 2002年
- 设计合成了两条编码KGDX (赖 甘 天冬 X)的寡核苷酸链 ,长度为 3 6个碱基对 ,两端分别为BamHI酶和XcoI酶切位点。将该基因插入原核高效表达载体PGEX 4T 1的tac启动子下游 ,获得重组质粒PGEX 4T 1KGDX ,转化大肠杆菌DH5a,3 7℃诱导使重组子表达。GST KGDX融合蛋白具有可溶性 ,产量为3 5mg/L培养基 ,表达量占菌体总蛋白 48 0 2 %。破碎菌体上清经谷胱甘肽 琼脂糖悬珠亲和层析法获得纯度为95 %的重组蛋白。1 2 5I7E3竞争拮抗实验结果表明 ,GST无GPIIb/IIIa结合作用 ,GST KGD融合蛋白能代替 7E3竞争性地与GPIIb/IIIa受体特异性结合 ,从而抑制血小板聚集。其IC5 0值为 40 μmol/L。
- 查艳萍秦永文荆清穆瑞斌
- 关键词：基因重组纯化大肠杆菌抗血小板作用基因克隆急性冠脉综合征
- 重组多功能抗凝多肽基因的大肠杆菌中的表达及活性测定
- 在由于血管成形术或动脉粥样斑块破裂及其它损伤因素所致血管壁损伤而引起的血栓形成过程中,血小板、纤维蛋白原和凝血酶起着非常关键的作用.目前防止血栓形成和发展的方法包括抑制血小板的活化、抑制凝血酶的活性、或者是增强纤溶系统的...
- 穆瑞斌
- 关键词：融合蛋白抗血小板抗凝血酶GST水蛭素
- 文献传递
- 室间隔缺损封堵器的研制和临床应用进展
- 在我国每年出生的新生儿中先心病约有15万,全国现有先心病可能达300多万。自从1964年 Dotter 等开创血管病介入治疗以来,以导管为手段的介入诊疗方法得到迅速的发展和普及。常见的先天性心脏病中动脉导管未闭和继发孔型...
- 秦永文穆瑞斌
- 文献传递
- 重组糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂的表达和纯化
- 2002年
- 观察糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂重组GST KGDX(谷胱甘肽S 转移酶 赖 甘 天冬 X)融合蛋白对血小板聚集的抑制作用。设计合成了两条编码KGDX(赖 甘 天冬 X)的寡核苷酸链 ,两端分别为BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点。将该基因插入原核高效表达载体pGEX 4T 1的tac启动子下游 ,获得重组质粒 pGEX 4T 1KGDX ,转化大肠杆菌DH5a,37℃诱导使重组子表达。GST KGDX融合蛋白具有可溶性 ,产量为 35mg/L培养基 ,表达量占菌体总蛋白的 48.0 2 %。破碎菌体上清经谷胱甘肽 琼脂糖悬珠亲和层析法获得纯度为 95 %的重组蛋白。血小板凝聚仪检测活性表明 ,在体外GST KGDX融合蛋白抑制ADP诱导的人血小板聚集作用强于GST(P <0 .0 5或 <0 .0 1 )。全血流式细胞术结果表明 ,GST KGDX能与GPⅡb/Ⅲa受体特异性结合。结论 :大肠杆菌中能够表达出较高产量的GST KGDX融合蛋白 。
- 查艳萍秦永文荆清穆瑞斌
- 关键词：受体拮抗剂纯化抗血小板作用
- 重组多功能抗凝多肽的表达及活性测定被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨多功能抗凝多肽基因的克隆、表达的可行性及其活性的测定。方法 设计一个具有双重抗凝功能的重组多肽分子结构 ,它由谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)作为载体蛋白与重组抗凝多肽融合而成。编码重组抗凝多肽的DNA序列是根据氨基酸序列逆向翻译后经人工合成 ,并插入表达质粒pGEX 5X 3中 ,与其中的编码GST序列的 3′端融合。采用大肠杆菌DH5α进行原核表达。应用亲和层析的方法得到纯化的融合蛋白。重组抗凝多肽含有 31个氨基酸 ,由 3个功能部分组成 :(1)Lys Gly Asp(KGD)氨基酸序列 ,可抑制血小板GpⅡb/Ⅲa受体与纤维蛋白原的结合 ;(2 )纤维蛋白单肽A的 7 16残基 (FBA7 16) ,是凝血酶的抑制剂。 (3)水蛭素C末端的 12肽 ,可直接抑制凝血酶。结果 纯化的融合蛋白能抑制二磷酸腺苷诱导的血小板聚集 (10 0 μmol/L时其活性为对照组的 2 0 7% ) ;随浓度增加而显著延长部分凝血活酶时间 (80 μmol/L时凝血活酶时间为 74 7s)和凝血酶时间 (80 μmol/L时为 10 2 3s)并抑制凝血酶的蛋白酶分解活性 (10 0 μmol/L时活性为对照的 11% )。同时 ,也发现GST也有抗血小板作用 ,但其作用要明显弱于融合蛋白。
- 穆瑞斌秦永文查艳萍荆清
- 关键词：活性水蛭素血小板聚集抑制剂
- 室间隔缺损的介入治疗进展被引量：7
- 2002年
- 室间隔缺损(VSD)由于其特殊的解剖部位,因此VSD经导管治疗始终是个有争议、富有挑战性的问题。随着导管技术和相关材料科学的发展,对VSD的封堵术也越来越成熟。本文对近年来VSD的各种封堵技术作一综述。
- 穆瑞斌
- 关键词：室间隔缺损介入治疗封堵器经导管介入治疗
- 谷胱甘肽S-转移酶-KGDX融合蛋白的抗血小板作用被引量：1
- 2001年
- 目的 观察重组GST -KGDX(谷胱甘肽S -转移酶 -赖 -甘 -天冬 -X)融合蛋白对血小板聚集的抑制作用 .方法 设计合成了两条编码KGDX(赖 -甘 -天冬 -X)的寡核苷酸链 ,长度为 36个碱基对 ,两端分别为BamHI酶和XcoI酶切位点 .将该基因插入原核高效表达载体PGEX - 4T - 1的tac启动子下游 ,获得重组质粒PGEX - 4T -1KGDX ,转化大肠杆菌DH5a,37℃诱导使重组子表达 .采用谷胱甘肽 -琼脂糖悬珠亲和层析法获得纯化蛋白 .用血小板凝聚仪检测活性 .结果 GST -KGDX融合蛋白具有可溶性 ,产量为 35mg/升培养基 ,表达量占菌体总蛋白 48.0 2 % ,容易从裂解菌中纯化得到 .体外实验 :GST、GST -KGDX融合蛋白均能抑制ADP诱导的人血小板聚集 ,GST -KGDX强于GST(p<0 .0 5或 <0 .0 1) ,其IC50 值分别为 4μmol/L、6 μmol/L .结论 (1)GST、GST -KGDX融合蛋白在体外均能抑制ADP诱导的人血小板聚集 .(2 )大肠杆菌中能够表达出较高产量的GST -KGDX融合蛋白 ,为抗血小板因子提供了一个很好的蛋白质来源 .
- 查艳萍秦永文荆清穆瑞斌
- 关键词：基因重组蛇毒抗血小板作用
- 原发性血小板增多症伴左冠状动脉主干闭塞1例被引量：2
- 2001年
- 查艳萍穆瑞斌
- 关键词：原发性血小板增多症冠状动脉搭桥术外科手术
