罗小英
- 作品数：30 被引量：487H指数：13
- 供职机构：西南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 利用Y-RACE法进行棉花胚珠cDNA末端快速扩增被引量：6
- 2002年
- 在YADE(Y shapedadaptordependentextension)方法的基础上 ,设计了一种新的cDNA末端快速扩增方法 ,称为Y RACE法 .利用该方法只需一次cDNA合成就能进行多个基因的 3′和 5′末端的扩增 .分别利用Y RACE方法和RACE试剂盒 (TaKaRa)扩增了一个棉花胚珠cDNA片段F0 2 7的末端序列 .序列比较表明 ,用Y RACE方法扩增的末端序列较试剂盒所得序列在最末端稍短 ,但同样能进行正确拼接并获得全长编码序列 .对Y RACE法的优缺点和可能的改进作了进一步讨论 .
- 肖月华罗明方卫国罗克明侯磊罗小英裴炎
- 关键词：棉花胚珠CDNA末端快速扩增
- 农杆菌介导法将FPF1基因导入油菜的研究初报被引量：30
- 2002年
- 将拟南芥早花基因FPF1(floweringpromotingfactor 1)插入双元高效表达载体pBI 12 1中 ,构建了植物表达载体pBIUbi-FPF1。以“双低”甘蓝型晚熟油菜品种 2 0 0 0F4 10 2 ,2 0 0 0F4 15 3的下胚轴为转化受体 ,通过农杆菌介导的遗传转化获得抗卡那霉素的再生转基因植株 ,并探讨了影响油菜再生频率以及遗传转化效率的几个因素。对部分经卡那霉素筛选得到的再生植株进行了PCR检测 ,其中 70 %以上的卡那霉素抗性植株表现阳性 。
- 黄琼华杨光伟李德谋罗小英裴炎
- 关键词：转基因油菜农杆菌介导法早熟性卡那霉素
- 根癌农杆菌介导球孢白僵菌的遗传转化
- 昆虫病原真菌是自然界控制昆虫种群数量的主要因素之一。昆虫病原真菌是唯一通过穿透寄主体壁主动侵染寄主的微生物,具有防治持效期长,害虫难以产生抗/耐性等优点,因而广泛应用于害虫的生物防治中。但昆虫病原真菌作为生物杀虫剂的潜力...
- 方卫国张永军肖月华杨星勇范艳华侯磊罗小英裴炎
- 文献传递
- 棉花类LRR抗病蛋白(GhLRR-RL)基因的克隆及表达分析被引量：21
- 2002年
- 从棉花胚珠的cDNA AFLP片段中 ,选取一个与拟南芥类LRR抗病蛋白 (LRR RL)序列相似的片段 ,用RACE方法延伸其 3′和 5′未知序列 ,得到一个棉花类LRR抗病蛋白的全长cDNA序列 (GenBank登录号 :AY0 4 0 5 32 )。该cDNA长 12 5 9bp ,包含一个 987bp的开放阅读框 ,具有Poly(A)加尾信号。推测的蛋白质包含 32 8个氨基酸 ,其中大部分是LRR区 ,其序列符合膜外LRR的共有序列LXXLXXLXXLXLXXNXGXIPXX。序列和结构比较分析表明 :该棉花LRR RL蛋白与拟南芥的两个类LRR抗病蛋白高度同源 ,而与植物的其他LRR蛋白结构不同 ,推测LRR RL蛋白属于一类新的LRR蛋白。斑点杂交和 3′RACE扩增表明 ,棉花LRR RL基因具有组成性表达的特点。
- 肖月华罗明侯磊罗克明罗小英裴炎
- 关键词：棉花
- 棉纤维蔗糖合酶基因SS3上游调控序列的克隆及其表达分析被引量：2
- 2005年
- 棉纤维蔗糖合酶基因SS3在棉纤维发育过程中起着重要作用.采用YADE技术克隆了该基因5′上游1717bp的调控区,该调控区含有典型的启动子核心元件TATA box ,以及TATC box、G box、GCN4 -motif、Prolamin box、Skn 1 likemotif、TCA element、HSE和O2 site等各种顺式调控元件和其他一些反应元件.将此序列和报告基因GUS融合在烟草、棉花中表达.组织化学分析结果显示棉花SuSyR序列启动GUS基因在烟草的子房、胎座、种子以及在棉花花蕾与棉铃中表达.在棉花花蕾蕾长为3mm、6mm、9mm和15mm花蕾中表达主要存在于雄蕊及雄蕊管、胎座等器官;在棉铃中,1DPA棉铃的花柱、花药、子房及胚珠中出现了蓝色,6DPA棉铃的子房及胚珠被染成蓝色,在2 0DPA的棉铃中蓝色只出现在胚珠及其纤维中、在胚珠中只有珠心被染成蓝色,在4 0DPA胚珠中只有纤维呈蓝色.研究结果揭示,棉花的SuSyR调控序列启动GUS基因主要在子房、胚珠和纤维等器官和主叶脉、茎微管束等输导组织中表达,在棉花中尤为明显,表明棉纤维蔗糖合酶基因SS3除参与棉花蕾铃发育、纤维素的合成外,还参与了光合产物的运输与分配过程.
- 罗小英肖月华李德谋罗明侯磊李先碧杨霞裴炎
- 棉花PTS2受体基因(GhPex7)的克隆及表达分析被引量：9
- 2003年
- 利用cDNA AFLP差异片段F0 10 ,通过RACE延伸、EST检索等方法获得了一个棉花过氧化物酶体定位信号2受体蛋白基因 (peroxisomaltargetingsignaltype 2receptor,GhPex7p)的编码序列。该cDNA包含一个 95 4bp的开放阅读框 ,编码 317个氨基酸 ,推测其等电点为 5 6 0 3。同源性分析表明 :推测GhPex7与拟南芥、酵母、果蝇、小鼠和人的Pex7p基因存在序列相似性 ,其中与拟南芥的同源性最高 ,为 83% ,并具有 3段WD 4 0蛋白家族的保守域 ,与拟南芥AtPex7的编码蛋白同类。Southern杂交结果表明该基因在陆地棉基因组中存在两个拷贝。Northernblotting和RT PCR分析表明该基因在棉花根、茎、叶、花、胚珠和纤维中均表达 ,但茎、叶组织中的表达水平明显高于胚珠和纤维。
- 李德谋肖月华罗明侯磊罗小英罗克明裴炎
- 关键词：棉花RACE
- 抗菌肽和几丁质酶基因提高烟草对黑胫病菌和赤星病菌的抗性研究被引量：25
- 2005年
- 通过农杆菌介导法将加信号肽修饰的人工合成杂合抗菌肽CEMA基因(SPCEMA),苜蓿防御素基因(AFP),苦瓜几丁质酶基因(CHI)以及SPCEMA-CHI、AFP-CHI、AFP-SPCEMA双价基因导入本明烟(Nicotianabenthamiana),并对转基因烟草T0和T1代进行了抗病性检测,比较了不同转基因植株的抗病效果。研究结果表明,转基因烟草对黑胫病菌(Phytoph-thoraparasiticavar.nicotianae)、赤星病菌(Alternariaalternata)的抗性均强于非转基因烟草,病情指数差异达极显著水平,其中转AFP-CHI双价基因烟草具有较强的抗性,与单价转基因烟草的抗性差异达显著水平。但各单价转基因以及双价转基因烟草之间对上述病菌并未表现出显著的抗病性差异。结果表明植物源的抗菌肽基因与几丁质酶基因在抗植物真菌病害中具有协同增效作用。
- 罗小英曾雪嘉肖月华罗明杨星勇裴炎
- 关键词：抗菌肽黑胫病菌赤星病菌烟草
- 甘蓝型油菜隐性核不育两用系S45AB中与MS2Bnap基因同源片段的克隆及序列分析被引量：11
- 2002年
- 以甘蓝型油菜隐性核不育两用系 S4 5 AB的可育株和不育株为材料 ,提取减数分裂期与单核期的花粉 m RNA,反转录合成 c DNA,并以其为模板扩增花粉特异基因 MS2 Bnap。结果减数分裂期能扩出产物 ,而单核期无任何产物。将减数分裂期的扩增产物克隆、测序。同源性分析表明 :在 S4 5 AB上克隆的 MS2 Bnap基因与 Gene Bank公布的拟南芥控制核育性基因 MS2和已报道的甘蓝型油菜的 MS2 Bnap基因的同源性分别为 88%和 99%。可育株 S4 5 B与不育株S4 5 A在 MS2 Bnap基因序列上有 4处碱基存在差异 ,其中 3处为同义突变 ,编码氨基酸未发生变化 :1处为错义突变 ,可育株为 AAA,不育株为 AGA。其三联体密码对应的氨基酸也发生了变化 ,AAA编码赖氨酸 ,AGA编码精氨酸。该变化可能与 S4 5
- 李德谋侯磊罗小英裴炎杨光伟
- 关键词：甘蓝型油菜隐性核不育基因克隆花粉发育
- 豌豆铁蛋白的纯化及其抗血清的制备被引量：11
- 2002年
- 干豌豆种子粗提物经MgCl2 盐析、AcA2 2 凝胶过滤和DEAE 纤维素阴离子交换柱层析等方法进行纯化 ,以邻菲咯啉显色法检测铁蛋白 ,最后获得纯的铁蛋白 .纯化的铁蛋白在PAGE上显示一条带 ,SDS PAGE显示该蛋白仅含 2 8kD一条亚基 .纯化的豌豆铁蛋白免疫兔 7周后 ,琼脂糖双扩散法检测抗血清效价达 1∶32 .用分级盐析法纯化抗血清 。
- 袁小红杨星勇罗小英周泽扬裴炎
- 关键词：豌豆铁蛋白纯化抗血清
- 大麦β-1,3-葡聚糖酶基因表达载体的构建及其对马铃薯的遗传转化被引量：18
- 2000年
- 在获得经大麦白粉病诱导的 β 1 ,3 葡聚糖酶cDNA基因的基础上 ,构建了该基因的植物表达载体 pBinh Glu ,采用农杆菌介导的方法将其转化进入马铃薯 ,获得了经含有卡那霉素的选择培养基筛选的转基因植株 ,通过PCR扩增验证 ,马铃薯基因组中含有大麦的β 1 ,3 葡聚糖酶cDNA基因。
- 罗小英侯磊李德谋裴炎
- 关键词：Β-1,3-葡聚糖酶马铃薯表达载体构建农杆菌介导
