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花生DNA导入大豆的后代POD　SOD活性及其同工酶谱分析被引量：3: 1996年; 利用花粉管通道技术，将花生ＤＮＡ导入大豆中，得到变异后代Ｄ３．取结荚期大豆、花生和Ｄ４的不同器官为测试材料，对超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）活性及同工酶特性进行了比较研究．结果表明，导入后代Ｄ４种皮的ＳＯＤ、ＰＯＤ活性明显增高，种子活性降低；其同工酶在凝胶上的分布及染色活性均表现出与受体和供体不同的特征，有的酶带明显来自花生ＤＮＡ．; 杜海军芦兴武赵恩鹏许守民王丕武; 关键词：DNA导入大豆 SOD POD 同工酶

血小板生成素糖基化与其体内生物学活性关系的研究被引量：3: 1999年; 为探讨血小板生成素（ＴＰＯ）糖基化与其体内生物学活性的关系，给血小板缺乏症小鼠模型腹腔分别注射相同活性单位酵母系统表达的人ＴＰＯ成熟肽或大肠杆菌表达的人ＴＰＯＮ－端结构域蛋白，连续给药５ｄ，每天一次，末次给药后３ｄ，比较两种ＴＰＯ组动物外周血血小板数量、骨髓巨核细胞培养单位（ＣＦＵ－Ｍｅｇ）、骨髓有核细胞ＤＮＡ含量。结果高、中、低剂量的ＴＰＯ成熟肽组动物的血小板数、巨核细胞集落数和骨髓ＤＮＡ含量均明显高于ＴＰＯＮ－端结构域蛋白的相应组（Ｐ＜０．０１）。显示酵母系统表达的ＴＰＯ成熟肽比大肠杆菌表达的ＴＰＯＮ－端结构域有明显的生物学活性，这可能与它们的糖基化程度及半衰期有关。; 刘丽王颖王颖田生礼孟岩芦兴武孟岩冷爱军; 关键词：血小板生成素糖基化生物学活性

人B淋巴细胞活化相关基因的克隆及其功能初探: B淋巴细胞是机体重要的免疫活性细胞，在机体免疫应答中，B细胞接受抗原或其它因素的刺激后，发生活化、增殖及分化，产生应答效应。因此，B细胞的活化是B细胞行使其功能的重要前提。众多研究表明，B细胞由静止向活化状态转变的过程，...; 芦兴武; 关键词：B淋巴细胞活化基因克隆; 文献传递

酵母系统表达TPO与E.coli表达TPO N端结构域生物半衰期比较: 1998年; 为了探讨血小板生成素（ＴＰＯ）糖基化与其生物半衰期的关系，首先纯化了巴氏毕赤酵母系统分泌表达的人ＴＰＯ成熟肽和大肠杆菌表达的人ＴＰＯＮ端结构域蛋白．纯化产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定和活性分析后，两种蛋白以相同浓度或相同活性单位给Ｗｉｓｔｅｒ大鼠尾静脉注射，利用酶联免疫分析（ＥＬＩＳＡ）和ＴＦ１细胞测定不同时间点实验动物血浆中ＴＰＯ浓度或生物学活性，求出两种ＴＰＯ的生物半衰期（ｔ１／２）值．结果显示，以相同浓度和相同活性单位给药，ＴＰＯ成熟肽的ｔ１／２均比其Ｎ端结构域的长，前者分别是后者的１．６５倍和１．２７倍．; 刘丽田生礼王颖王颖孟岩芦兴武孟岩冷爱军; 关键词：血小板生成素糖基化生物半衰期

人B淋巴细胞活化相关新基因的克隆: 2001年; 分离新的与 B细胞活化相关基因。方法采用差异显示反转录 PCR（ DDRT－ PCR）技术对人扁桃体活化和静止 B细胞 mRNA的差异表达进行分析，差异显示的片段经过 Northern杂交验证后，作为探针进行人活化 B细胞 cDNA文库的筛选。结果差异显示分析共获得明显的差异表达的标签序列（ expressed sequence tag, EST） 62条，其中主要在静止 B细胞表达的有 32条，在活化 B细胞表达的有 30条。经 Northern杂交验证，共获得阳性的片段 25条。以在活化 B细胞中高表达的 EST30为探针，经 3轮筛选人活化 B细胞文库后获得 1个新的全长为 2 048 bp的 cDNA克隆。该克隆含有 1个 630 bp的开放读码框。其推断的氨基酸序列 N端与酵母的动力蛋白 KAR3部分同源。结论克隆了 1条可能与 B细胞活化相关的新基因。; 芦兴武殷际义崔莲仙; 关键词：B淋巴细胞

人TPON端结构域在毕赤酵母中的分泌表达及产物鉴定被引量：4: 1998年; 目的在酵母系统中分泌表达人ＴＰＯＮ－端结构域，对其生物学活性进行初步研究，为与其它ＴＰＯ分子进行ＴＰＯ糖基化生物学意义的研究打基础。方法将编码人ＴＰＯ成熟肽Ｎ端１９５个氨基酸的ｃＤＮＡ与酵母整合型载体ｐＰＩＣＺαＡ重组，构建的重组质粒用ＤｒａⅠ消化成线性ＤＮＡ，转染酵母细胞ＧＳ１１５，使ＴＰＯ基因整合到酵母染色体上；用ＴＰＯ抗体筛选获得遗传性分泌稳定表达的重组酵母细胞株；用ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ鉴定ＴＰＯ产物及分子量；用对小鼠骨髓细胞形成巨核细胞集落形成单位（Ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅｃｏｌｏｎｙｆｏｒｍｉｎｇｕｎｉｔ，ＣＦＵ－Ｍｅｇ）的方法测定活性。结果获得了ＴＰＯＮ－端结构域在酵母系统中的分泌表达，表达产物可被ＴＰＯ抗血清识别，分子量约为２２０００；其产物对小鼠骨髓细胞形成ＣＦＵ－Ｍｅｇ具有明显的刺激作用。; 田生礼刘丽孟岩芦兴武谢宝树刘立忠冷爱军王颖; 关键词：血小板生成素毕赤酵母 N端结构域分泌

人B细胞活化相关基因BC-1514全长cDNA的克隆与原核表达: 2001年; 目的　克隆与B细胞活化相关的新基因及其原核表达。方法　采用差异显示反转录PCR(DDRT PCR)技术对人扁桃体活化和静止B细胞mRNA的差异表达进行分析 ,差异显示的片段经过Northern杂交验证后 ,作为探针进行人活化B细胞cDNA文库的筛选。将所获得的阳性克隆的编码区经PCR扩增后克隆到原核表达载体pGEX 5X 1中 ,重组质粒经酶切、测序鉴定后转化大肠杆菌BL 2 1,以IPTG诱导表达融合蛋白。结果　以在活化B细胞高表达的EST32为探针 ,经 3轮筛选人活化B细胞文库获得一个新的全长为 15 14bp的cDNA克隆 (命名为BC 15 14)。重组的BC 15 14蛋白可在E .coli中以融合蛋白的形式有效表达 ,其表达量约占细菌总蛋白量的 14.3%左右。BC 15 14cDNA的GenBank的登录号为AF30 44 42。结论　获得了 1条新的与B细胞活化相关的cDNA克隆并在E .coliBL 2 1中得到了有效表达。; 芦兴武殷际义李永海崔莲仙; 关键词：B淋巴细胞 CDNA

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芦兴武