蒋国凤
- 作品数：23 被引量：25H指数：4
- 供职机构：广西大学林学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金广西大学科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种与甘蓝黑腐病黄单胞菌致病相关基因的应用
- 一种与甘蓝黑腐病黄单胞菌致病相关的III型效应物基因在植物甘蓝黑腐病害防治中的应用，该基因是下列核苷酸序列之一：(1)序列表中序列1的DNA序列；(2)与所述序列表中序列1限定的所述DNA序列具有80％以上同源性的DNA...
- 纪良姜伯乐何勇强岑卫健韦红玉蒋国凤姜伟杭小红
- 文献传递
- 鼠李糖乳杆菌L-乳酸脱氢酶的生物信息学分析和基因克隆被引量：1
- 2023年
- 本研究以鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)L-乳酸脱氢酶(Lr-L-LDH)为研究对象,以研究较多的Lr-L-LDH1为对照,对基因组注释的两个Lr-L-LDH1和Lr-L-LDH2基因,进行异同分析。采用在线网站和专业软件对Lr-L-LDH1和Lr-L-LDH2的一级结构、基本特性、亲疏水性、二级结构进行分析和预测,对三级结构进行同源建模以及酶和底物的分子对接分析,并对酶的编码基因进行系统发育分析,克隆表达及酶活性检测。结果显示:相较于Lr-L-LDH1,Lr-L-LDH2有着相似的分子特性,二级和三级结构,但Lr-L-LDH2编码序列短,氨基酸序列同源性低(48.08%),有不同的进化地位;Lr-L-LDH2也含有乳酸脱氢酶催化活性位点序列和保守的NAD^(+)结合位点序列(GXGXXG),能够形成典型的活性三维口袋域,是NAD^(+)依赖型四聚体结构L-乳酸脱氢酶,在细胞中需要果糖1,6-二磷酸(FBP)来激活,催化丙酮酸还原为L-乳酸;体外克隆表达和酶学分析表明,Lr-L-LDH2酶活力极显著低于Lr-L-LDH1(P<0.01)。Lr-L-LDH1和Lr-L-LDH2都具有乳酸脱氢酶活性,推测二者在乳酸表达调控中相互作用,对鼠李糖乳杆菌L-乳酸脱氢酶的分子改造应同时考虑Lr-L-LDH1和Lr-L-LDH2的作用,研究对乳酸发酵工业的基因工程改造提供分子基础和科学依据。
- 许黎明蒋国凤伍新龄廖秀芳劳夏姐牙韩春李秀年
- 关键词：鼠李糖乳杆菌L-乳酸脱氢酶生物信息学进化分析活性位点酶活力
- 中国特有野生酿酒葡萄的群体基因组学分析
- 2024年
- 葡萄是中国的重要经济植物,酿酒葡萄更是葡萄产业的重要部分。本研究通过34份酿酒葡萄基因组重测序数据,研究中国三种特有野生酿酒葡萄山葡萄(Vitis amurensis)、刺葡萄(Vitis davidii)和毛葡萄(Vitis heyneana)的群体间遗传结构、遗传多样性与群体历史变化,通过群体遗传学手段筛选选择信号,挖掘中国野生酿酒葡萄特有的重要种质基因。群体结构显示群体间聚成四个分支。与中国主要栽培酿酒葡萄相比,三个野生酿酒葡萄群体多样性较低,且均受东亚大陆末次冰期的影响,导致群体有效数量较低,相关野生种质资源需要得到进一步的保护和收集。通过对中国野生酿酒葡萄共同受选择区域进行定位,本研究共鉴定到272个中国野生酿酒葡萄受选择的基因,这些基因富集到葡萄有性生殖、花粉形成、淀粉和蔗糖代谢,以及自噬体等功能或通路上,研究结果能为栽培酿酒葡萄今后的杂交育种、抗病和酿酒风味等方面提供重要的育种依据。这些基因可能与中国野生葡萄长期受本土环境影响而形成的独特生长发育过程有关。本研究可为中国原产野生酿酒葡萄的保护及育种应用提供重要理论依据。
- 张天浩蒋国凤
- 关键词：葡萄酿酒葡萄育种
- 一个用于鉴定十字花科黑腐病菌Ⅲ型效应物分泌与转运的报告质粒的构建
- 2014年
- 通过免疫检测的方法鉴定十字花科黑腐病菌(Xcc)Ⅲ型效应物的分泌和转运,将cyaA基因克隆至带有3×FLAG的pJXG载体上,构建带有3×FLAG和cyaA基因的报告质粒pJAA,并用已鉴定为Ⅲ型效应物的XC_1553启动子区信号区验证该报告质粒。将pJAA1553三亲导入Xcc 8004*和8004*△hrcV,然后通过Western blotting免疫检测XC_1553的分泌,结果在8004*/pJAA1553的胞外蛋白中检测到了XC_1553的分泌,而在8004*△hrcV/pJAA1553的胞外蛋白中没有检测到XC_1553的分泌。通过免疫反应定量检测8004*/pJAA1553和8004*△hrcV/pJAA1553侵染后植物体内的cAMP含量,结果发现8004*/pJAA1553侵染后植物体内的cAMP含量比8004*△hrcV/pJAA1553侵染后植物体内的cAMP含量高15倍。结果表明,报告质粒pJAA能够应用于鉴定十字花科黑腐病菌的Ⅲ型效应物。
- 成春燕杨威甘永亮蒋国凤杨丽超阳丽艳姜伯乐
- 关键词：十字花科黑腐病菌
- 十字花科黑腐病菌hrp基因致病功能分析被引量：1
- 2015年
- 通过对Xcc 8004菌株的hrp基因进行逐一敲除,系统研究单个hrp基因对Xcc致病性的贡献。结果表明,9个hrc(hypersensitive response and conserved)基因单独突变后在满身红萝卜上的致病性和在辣椒ECW-10R上激发HR的能力完全丧失;9个hrp基因中,hrpW突变后在辣椒ECW-10R上仍能产生HR,满身红萝卜上致病性减弱,其余hrp基因突变后致病性和过敏反应均丧失;4个hpa(hrp associated protein)基因突变后,hpaA和hpaB突变体完全丧失在满身红萝卜上的毒性也不能在辣椒ECW-10R上引起HR,hpa1和hpaP突变后致病性和HR显著减弱。另外,通过RT-PCR对Xcc 8004 hrp基因簇的每个基因受hrpX和hrpG的调控情况进行分析,结果表明所有hrp基因在不同程度上都受到hrpG、hrpX的正向调控。
- 曾献莹李婉莲杨丽超蒋国凤王凛甘永亮阳丽艳姜伯乐
- 关键词：十字花科黑腐病菌HRP基因
- 一种编码6-磷酸海藻糖磷酸酶的基因的用途
- 一种编码6-磷酸海藻糖磷酸酶的基因的用途。本发明披露了一种与十字花科黑腐病病菌致病相关的编码6-磷酸海藻糖磷酸酶的基因在防治植物十字花科黑腐病病害中的用途，所述基因是编码序列表中序列2所示蛋白质的DNA序列，即序列表中序...
- 蒋国凤唐纪良姚裕群姜伯乐何勇强梁晓夏杭小红
- 文献传递
- 一个用于体外鉴定野油菜黄单胞菌Ⅲ型效应物的报告质粒的构建
- 许多革兰氏阴性植物病原细菌通过Ⅲ型分泌系统(T3SS),将效应物蛋白分泌并转运进入植物体内,从而引起植物致病或过敏反应。效应物是病原细菌和植物分子互作的关键物质。全基因组筛选鉴定Ⅲ型效应物蛋白并研究其功能,对于解明病原菌...
- 姜伯乐蒋国凤张正淳韦红玉岑卫健赵宇何勇强唐纪良
- 关键词：植物病害黄单胞菌菌株鉴定
- 文献传递
- 野油菜黄单胞菌hpa2基因的突变和功能分析被引量：5
- 2008年
- 利用自杀质粒pK18mob诱变野油菜黄单胞菌Xcc8004的hpa2基因,获得整合突变体PK3001。致病性和过敏反应检测发现,hpa2突变体PK3001过敏反应完全丧失,但致病性无明显变化。利用gus报告基因和RT-PCR检测hpa2基因的表达调控,结果表明,hpa2基因在基本培养基上高表达,且受hrpG、hrpX正向调控。
- 姜伯乐蒋国凤黄佩芳杭小红荆龙杨艳何勇强唐纪良
- 关键词：野油菜黄单胞菌
- 十字花科黑腐病菌Ⅲ型分泌系统hpa基因功能的鉴定
- 植物病原细菌通过hrp基因簇编码组装的Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system，T3SS)将称之为Ⅲ型效应物的毒力蛋白分泌并转运至寄主细胞体内，调节或干扰寄主的正常生理活动，从而建立寄生关系或引起抗病反应...
- 蒋国凤
- 关键词：十字花科黑腐病菌效应物过敏反应
- 文献传递
- 十字花科黑腐病菌Ⅲ型效应物基因avrAC_(Xcc8004)推测的启动子区被引量：5
- 2014年
- 【目的】十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc),能侵染所有十字花科植物,引起黑腐病。Xcc通过III型分泌系统(Type III Secretion System,T3SS)将III型效应物(T3SS effector,T3SE)蛋白直接转运到植物细胞内,T3SEs对于病原菌致病性至关重要。许多已鉴定的T3SEs基因的启动子区都存在植物诱导启动子盒(Plant-inducible promoter,PIP-box)和-10 box,但PIP-box及-10 box与经典的启动子-10区及-35区之间的关系如何未见报道,-10 box的序列保守性如何也未见报道。本研究旨在对T3SE基因avrAC Xcc8004推测的启动子区进行研究。【方法】首先,通过5'RACE确定其转录起始位点,接着用Fusion PCR对-10 box TACGTT序列中倒数第二个碱基T进行点突变为A/C/G,即:TACGAT、TACGCT和TACGGT,构建GUS融合报告菌株,定量测定GUS酶活。【结果】5'RACE结果显示avrAC Xcc8004的转录起始位点为A,对比分析得到启动子的-35区位于PIP-box之后8 bp处,而-10区与-10 box重叠;avrAC Xcc8004启动子区的PIP-box和-35区、-10 box的整个模体为:TTCAC-N15-TTCGC-N8-TTGATG-N18-TACGTT。最后,GUS定量测定结果表明,突变为C时(TACGCT)的菌株的GUS酶活最高,突变为G时(TACGGT)的酶活增高最少。在ΔhrpX和ΔhrpG中的GUS酶活均比在Xcc 8004中有显著的降低。【结论】Xcc的T3SE基因PIP-box与-35区前后相衔,-10 box即-10区,-10 box对于avrAC Xcc8004的转录活性有较大的影响,-10 box突变前后avrAC Xcc8004均受HrpG和HrpX正向调控。
- 蒋国凤吴秋菊梁晓夏杨丽超阳丽艳王凛吴小建姜伯乐
- 关键词：BOX
