袁建平
- 作品数：13 被引量：26H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院病原生物学教研室更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金国家自然科学基金上海市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 调节细胞凋亡的病毒基因产物被引量：1
- 2000年
- 宿主细胞采用凋亡机制抵御有害物质,而病毒则编码各种蛋白来调节细胞凋亡。本文综述了各种病毒基因产物对细胞凋亡的诱导或抑制作用,理解这些机制将为病毒感染性疾病和肿瘤的治疗提供新的思路。
- 袁建平
- 关键词：细胞凋亡
- 幽门螺杆菌VacA^+BCS对上皮细胞骨架的影响
- 2003年
- 目的 为了观察VacA+ BCS对上皮细胞骨架的作用 ,并分析这种致细胞骨架病变的作用特点 ,从而明确VacA等分泌性毒力因子的致病意义。方法 利用cDNA基因表达谱芯片技术研究VacA+ BCS作用细胞中细胞骨架蛋白相关基因的表达变化 ,同时利用免疫荧光染色以及共聚焦显微镜观察细胞骨架的形态结构变化。结果 同VacA-BCS作用细胞和空白对照相比 ,VacA+ BCS作用细胞引起了细胞骨架蛋白相关基因表达的改变 ,同时 ,显微镜观察结果也从形态和结构方面证实了上皮细胞骨架的改变。结论 VacA+ BCS可以引起上皮细胞骨架的结构和功能的改变 ,VacA等细菌分泌性毒力因子可能在H pylori致病中发挥重要作用。
- 王洪涛袁建平赵蔚吴凯宇李振红时晓东童善庆郭晓奎
- 关键词：幽门螺杆菌微管蛋白空泡毒素基因芯片
- 基因芯片在细菌基因组学和细胞微生物学研究中的应用被引量：2
- 2003年
- 利用基因芯片可以鉴定病原菌在不同宿主微环境中受到差异调节的基因、直接或间接由转录因子控制的基因,以及编码多步骤代谢和生物合成途径中各种组分的基因;通过比较基因组学研究,评价相关菌种和菌株的自然群体内遗传多样性的范围和特性,并在ORF水平描述病原体和共生体之间的差异;同时也可进行感染组织细胞基因表达分析,研究病原体和宿主之间复杂的相互作用关系。
- 袁建平郭晓奎
- 关键词：基因芯片功能基因组学
- 幽门螺杆菌感染治疗的新靶位
- 2002年
- 抗生素治疗幽门螺杆菌感染面临着细菌耐药性的威胁,研究该细菌未知基因的功能,寻找新的抗菌靶,将为预防和治疗幽门螺杆菌感染开辟新途径。将机体适应性免疫应答运用于幽门螺杆菌感染的治疗,亦有广阔前景。
- 袁建平
- 关键词：幽门螺杆菌感染抗生素耐药性
- 幽门螺杆菌VacA毒性亚单位在大肠杆菌中的分别表达
- 2004年
- 目的用基因工程方法获取幽门螺杆菌vacA基因毒性相关片段p37和p58,以深入研究vacA的致病机制。方法用PCR技术,扩增幽门螺杆茵vacA基因的两个片段p37、p58,并克隆入原核表达载体pQE-31,构建重组质粒pQE31—p37和pQE31-p58,转化大肠埃希茵M15,IPTG诱导蛋白质表达,用Ni-NTA柱纯化融合蛋白。结果SDS-PAGE分析显示,经IPTG诱导的E.coli如M15表达出相对分子量分别为37KDa和58kda的P37和P58融合蛋白质,SDS-PAGE分析表明,表达的蛋白质经含Ni-NIA的层析柱纯化后为单一蛋白质。结论成功构建了原核表达栽体pQE31-p37和pQE31-p58,获得了高纯度的单一蛋白质,为进一步探讨VacA的生物学活性及VacA抗体的制备鉴定了基础。
- 杨贵珍刘钟滨袁建平胡宝瑜时晓东郭晓奎
- 关键词：幽门螺杆菌VACA亚单位
- 柯萨奇病毒B3通过caspase依赖途径诱导HeLa细胞凋亡被引量：5
- 2001年
- 目的评价柯萨奇病毒B3CVB3致HeLa细胞死亡的方式及分子机制。方法用CVB3作用于HeLa细胞,在不同时间收集细胞,通过相差显微镜、电子显微镜、流式细胞仪以及分子生物学手段,检测HeLa细胞的病变及caspase-3基因mRNA和蛋白质的表达。结果CVB3作用于HeLa细胞后,细胞很快发生变性和坏死,24h后较多细胞凋亡;caspase基因在病毒作用早期即被活化,表现在caspase-3mRNA在病毒作用后6h内,迅速增高达峰值。在24h内,又降至接近病毒作用前的水平。caspase-3蛋白表达在42h内逐渐增高。结论CVB3可诱导HeLa细胞发生坏死和凋亡两种反应,坏死早于凋亡,细胞凋亡与caspase-3的表达密切相关。
- 袁建平王洪涛赵蔚吴凯宇李涛郭晓奎童善庆
- 关键词：柯萨奇病毒细胞凋亡CASPASE-3
- 幽门螺杆菌VacA^+ BCS致胃上皮细胞基因表达谱的改变被引量：1
- 2002年
- 目的 :通过观察VacA+ BCS作用胃癌来源的SGC790 1细胞后 ,细胞基因表达谱的改变 ,分析Va cA等分泌性细胞毒力因子的致病性和致病意义。方法 :利用常规方法获得VacA+ BCS和VacA-BCS ,然后作用细胞 ,最后利用cDNA基因表达谱芯片技术观察细胞基因表达谱的变化。结果 :发生明显表达差异的基因占基因总数的 5 %左右 ,其中已经明确功能的表达差异基因涉及许多重要的细胞功能和生命活动 ,如基因表达调控、信号转导相关基因的差异表达、细胞骨架相关蛋白表达的变化、细胞凋亡相关因子编码基因表达的变化、以及肿瘤发生相关基因的表达变化等。结论 :VacA+ BCS可致细胞基因表达谱发生多层次和多方面的改变 ,几乎涉及H .pylori相关疾病所有重要病理过程 ,提示其在H .pylori致病机制中具有重要作用。
- 王洪涛袁建平赵蔚时晓东童善庆郭晓奎
- 关键词：胃上皮细胞基因表达谱空泡毒素
- 散发性乳腺癌患者BRCA1基因突变分析被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨BRCA1基因突变在散发性乳腺癌发生和发展中的作用及在乳腺癌临床诊断和治疗中的应用前景。方法 :应用PCR SSCP和直接测序法检测 3 0例散发性乳腺癌和 15例正常乳腺组织中BR CA1基因外显子 2、11和 2 0的突变情况。结果 :15例正常乳腺组织在 3个外显子上都未显示电泳异常 ,3 0例乳腺癌中有 6例在外显子 2上显示电泳条带异常 ,其中 4例经测序证实有突变 ,1例在外显子 2上 ,3例在内含子拼接区。BRCA1基因突变率在初诊年龄、临床分期和肿瘤体积上差异无统计学意义 ,但与肿瘤转移密切相关。结论 :BRCA1基因突变与散发性乳腺癌的发生和发展密切相关 ,该基因突变筛查可作为一种预后指标。
- 李涛袁建平吴凯宇胡宝瑜蒋树娟杨佳张希衡郭晓奎
- 关键词：突变聚合酶链反应
- 幽门螺杆菌VacA真核表达载体的构建及其诱导细胞空泡化和凋亡被引量：4
- 2003年
- 目的 :研究幽门螺杆菌空泡毒素作为单一毒力决定簇对真核细胞的作用。方法 :用 PCR扩增vac A基因片段 ,克隆入真核表达载体 p EGFP- N 1,构建重组质粒 p EGFP- vac A,转染 He L a细胞 ,通过相差显微镜和电子显微镜观察细胞形态与结构的变化。结果 :重组质粒转染 He L a细胞 2 4 h,10 %～ 2 0 %细胞的胞质内出现明显空泡 ,其中少数细胞发生凋亡改变。结论 :成功构建了用于真核表达的重组 vac A质粒 ,转染真核细胞后 ,观察 Vac A作用导致的细胞形态结构的变化 ,为研究 Vac
- 袁建平赵蔚杨贵珍胡宝瑜童善庆郭晓奎
- 关键词：幽门螺杆菌空泡毒素真核表达载体
- 人胃黏膜细胞cDNA文库和pGBKT7p-37重组质粒的构建(英文)
- 2004年
- 目的 构建人胃黏膜细胞cDNA文库 ,并选取VacA毒素的p37片段将其克隆到 pGBKT7以表达BD p37融合蛋白作为诱饵。为进一步用所此诱饵来筛选所构建文库以其找到与VacA相互作用的蛋白奠定基础。方法 用TRIzol试剂从胃腺癌病人手术切除的正常胃黏膜细胞中抽取总RNA经LD PCR得到双链cDNA ,参照Clontech的MATCHMAKERLibraryConstructionandScreeningKit构建cDNA文库并用文库所含的独立克隆数和含插入片段的克隆数占总克隆数的比例来评价酵母双杂交文库的质量。用PCR从Helicobacterpylor基因组中扩增出p 37基因将其克隆入 pGBKT7载体并使插入片段与GAL4BD同框 ,插入片段的大小和序列的正确性由双酶切和测序得以证实。结果 文库中共有 1.9× 10 6个独立克隆 ,含插入片段克隆所占比例为 91.7%。双酶切和测序结果表明 p37的正确插入 ,Westernblot结果证明了融合蛋白的表达。 结论 构建了较高质量的cDNA文库和与GAL4BD融合的诱饵蛋白 ,为进一步的研究奠定了基础。
- 李振红袁建平居忠亮赵蔚李萍胡宝瑜时晓东郭晓奎
- 关键词：幽门螺杆菌酵母双杂交CDNA文库
