赵德华
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 固氮酶催化N<,2>和H<'+>还原的机制
- 该论文中,通过定点突变及基因替代技术,成功构建了四个K pneumoniae 固氮酶突变体MoFe蛋白,其中:两个为单突变体,将野生型固氮酶钼铁蛋白α亚基中,铁钼辅因子(FeMoco)周围多肽链的Gln α190和His...
- 赵德华
- 关键词：固氮酶定点突变
- N_2和H^+在固氮酶活性中心金属原子簇中还原位点的分析被引量：1
- 2007年
- 目前研究表明,固氮酶的生理底物氮气(N_2)和质子(H^+)在钼铁蛋白中的铁钼辅因子(FeMo-co)上被还原,但其确切的还原位点尚未确定.对比分析了棕色固氮菌(Azotobactervinelandii,Av)野生型(WT)与5种突变株(包括FeMo-co附近2个保守氨基酸α-191^(Gln)和α-195^(His)单突变菌株(Qα191K和Hα195Q)、FeMo-co上钼原子相连的高柠檬酸突变株(nifV^-)以及α-191^(Gln)和α-195^(His)与高柠檬酸的双突变菌株(Qα191K/nifV?和Hα195Q/nifV^-))固氮酶催化还原N_2和H^+活性的变化,结果表明,N_2在靠近FeMo-co中心硫原子(S2B)的Fe2和Fe6上络合和还原,FeMo-co上的钼原子是H^+还原的位点.结合生物信息学分析结果显示,[8Fe7S]和FeMo-co之间可能存在两条平行的电子传递通路.
- 关锋赵德华潘淼姜伟李季伦
- 关键词：AZOTOBACTER固氮酶
- 肺炎克氏杆菌固氮酶双突变株的构建及其对底物还原的特性
- 本文通过定点突变及基因替代技术,将肺炎克氏杆菌，野生型菌株的固氮酶钼铁蛋白α亚基中铁钼辅因子(FeMoco)周围多肽链的Glnα190和Hisα194分别置换为Lys和Gln,并构建成两个单突变株,获得另外两个双突变株,...
- 赵德华李季伦
- 关键词：固氮酶活性肺炎
- 文献传递网络资源链接
- 固氮条件下Greifswald磁螺菌的深层培养及其固氮活性的调节被引量：9
- 2002年
- 建立了Greifswald磁螺菌(Magnetospirillum gryphiswaldense)在固氮条件下(微好氧和限铵)的深层培养技术.在以乳酸钠为碳源的限氮培养基中,通入含0_4％-0.8％O2的氮气,pH和温度分别控制在7.2和30℃,经3次补料,培养21h细胞密度A600nm可达1.3,固氮活性为217nmol/h.氧和铵对固氮活性有明显的抑制作用,说明该菌具有固氮酶合成后的活性调节系统.
- 姜伟赵德华李颖田杰生王珍芳李季伦
- 关键词：MAGNETOSPIRILLUMGRYPHISWALDENSE固氮固氮活性
- 肺炎克氏杆菌固氮酶双突变株的构建及其对底物还原的特性被引量：3
- 2004年
- 通过定点突变及基因替代技术, 将肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae, Kp)野生型菌株的固氮酶钼铁蛋白a亚基中铁钼辅因子(FeMoco)周围多肽链的Glna190和Hisa194分别置换为Lys和Gln, 并构建成2个单突变株,命名为Kp-Qa190K和Kp-Ha194Q. 将上述2个突变分别引入Kp-nifV突变株(与FeMoco 相连接的高柠檬酸被柠檬酸置换)获得另外2个双突变株, 命名为 Kp-Qa190K-nifV-和 Kp-Ha194Q-nifV-. 对上述4种突变株进行诱导培养和细胞的固氮酶活性分析表明, 4种突变株都失去了固氮活性, 乙炔(C2H2)还原活性也大幅度降低, Kp-Qa190K单突变株的乙炔还原活性比Kp-Ha194Q 单突变株下降得多; Kp-Qa190K-nifV-双突变株几乎完全丧失了活性, 而 Kp-Ha194Q-nifV-双突变仍保留野生型菌株10%的乙炔还原活性. 突变株将氘代乙炔(C2D2)还原成氘代乙烯(C2D2H2)的情况是: Kp-Qa190K和Kp-Ha194Q-nifV-突变株的C2D2还原产物中, 反式-1,2-二氘代乙烯比例比Kp野生型增加了1倍, 表明固氮酶催化加氢的立体构型选择性降低. 以上结果表明, 固氮酶活性中心周围多肽环境中Gln a190残基, 及与FeMoco相连的高柠檬酸, 可能直接参与质子和/或电子向活性中心FeMoco的传递. 推测Gln a190和与FeMoco的Mo原子相连的高柠檬酸, 在质子和/或电子通过Mo位?
- 赵德华李季伦
- 关键词：KLEBSIELLA固氮酶活性肺炎克氏杆菌
