赵虹
- 作品数：33 被引量：53H指数：4
- 供职机构：哈尔滨医科大学附属第四医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学军事更多>>
- STUB1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的:构建人STUB1基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体并进行鉴定。方法:针对筛选确定的人STUB1基因RNAi有效靶点序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeI和EcoRI酶切后的pMagic 4.0载体连接,产生短发卡RNA慢病毒载体。PCR筛选阳性克隆,测序鉴定,并包装成慢病毒颗粒。结果:PCR鉴定与DNA测序证实,合成的含STUB1 shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确。STUB1 shRNA慢病毒载体在293T细胞中成功包装成慢病毒颗粒。结论:成功构建人STUB1基因RNAi慢病毒载体以及包装成功慢病毒颗粒,为研究STUB1在胶质瘤发生发展过程中相关信号通路的作用,提供了稳定感染细胞的载体。
- 赵虹赵虹张惊宇徐万海杨子超
- 关键词：RNA干扰慢病毒载体LENTIVIRAL慢病毒表达载体胶质瘤发生阳性克隆
- 外周炎症和中枢炎症在帕金森病发病机制中的作用
- 2023年
- 帕金森病(PD)是第二常见的神经退行性疾病,主要临床症状为运动障碍,给患者带来极大困扰。近年来大量研究表明,PD与外周和中枢炎症密切相关。PD患者首先出现便秘等运动前症状,肠道屏障功能障碍和肠道微生物失调加速肠神经胶质细胞激活、α-突触核蛋白聚集以及外周免疫细胞增殖,产生各种促炎细胞因子和趋化因子。大脑内,各种病原体相关分子模式(PAMPs)和组织相关分子模式(DAMPs)激活小胶质细胞,主要通过TLRSNF-κB-NLRP3信号通路促进NLRP3炎性小体组装,促炎因子释放,最终导致多巴胺能神经元死亡。外周促炎因子使血脑屏障通透性增加,淋巴细胞、单核/巨噬细胞等外周免疫细胞进一步加剧中枢神经炎症。文中总结了外周炎症和中枢炎症在PD发病中的作用,为今后治疗PD提供可能的治疗靶点。
- 马清清苏雪袁田崔慧娟赵虹
- 关键词：帕金森病小胶质细胞
- 小鼠NMNAT1基因的过表达和RNAi重组慢病毒的构建包装和检测
- 2011年
- 目的:针对小鼠烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶1(NMNAT1)基因构建质粒并进行慢病毒包装,同时检测其表达水平和干扰效率,为进一步探讨该基因的功能提供研究工具和实验基础。方法:根据NMNAT1基因信息,用慢病毒载体pLenti6构建三种重组质粒,分别包含NMNAT1 cDNA全长、一个针对NMNAT1的小干扰序列和一个用于干扰对照的阴性序列。把这些质粒包装进慢病毒载体,并检测病毒滴度,再用慢病毒感染Hela细胞检测NMNAT1表达量和RNA干扰效率。结果:测序结果证明目的序列正确地插入到载体内。通过qPCR方法鉴定慢病毒包装成功,病毒滴度均为2×108 TU/ml以上。表达NMNAT1的重组慢病毒感染Hela细胞,该细胞能够高水平表达NMNAT1蛋白,而携带RNAi序列的慢病毒能够显著抑制其表达,干扰效率在70%以上。结论:针对NMNAT1的过表达和RNAi重组慢病毒制备成功,为进一步研究NMNAT1基因的功能和用慢病毒进行基因治疗提供了良好的研究工具。
- 赵虹杨子超张惊宇
- 关键词：慢病毒属基因过表达
- miR-204通过RAP1信号通路诱导多形性胶质母细胞瘤凋亡被引量：2
- 2017年
- 目的探讨多形性胶质母细胞瘤(Glioblastoma multiforme,GBM)中miRNA-204差异表达,及其对GBM U87凋亡的影响及作用机制。方法下载TCGA数据库level 3水平下的miRNA以及mRNA的表达谱数据,基于显著负向调控关系建立miRNA-mRNA调控网络。结合单因素和多因素COX风险回归模型以及K-M生存分析识别预后相关miRNA集合,且能显著区分GBM患者高低生存。利用生物信息学方法,挖掘GBM预后相关的调控子网,并通过miRNA负向调控的基因集合在KEGG通路中的映射,分析miRNA对GBM患者预后的影响。通过MTT、AO/EB对GBM细胞系U87生存率以及表型进行检测。Western blot检测凋亡相关蛋白以及MAPK信号通路相关蛋白的变化。结果共识别30个GBM预后相关的miRNA,这些miRNA构成的集合能够将高生存和低生存的GBM患者区分成两类。共14个miRNA出现在负向调控网络中。其中7个预后miRNA经实验证实为GBM抑制子。其余7个预后miRNA中,我们识别2个重要的风险性miRNA,即miR-204和miR-210,二者的表达可能会改变下游通路的活性,从而影响GBM患者预后。miR-204能影响U87细胞增殖,使促凋亡蛋白Bax蛋白的表达升高、抑凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达下调,使RAP1蛋白表达升高。结论 Mi R-204通过RAP1信号通路调节GBM U87的凋亡,这为微小RNA可成为临床GBM患者的有效治疗药物提供了实验依据。
- 王洪财赵虹
- 关键词：微小RNAGBM凋亡
- 硫辛酸的抗氧化应激作用在帕金森病中的展望被引量：1
- 2017年
- 机体内活性氧蓄积,超出正常代谢能力,是导致细胞变性、坏死,造成组织损伤的重要原因。而针对氧化损伤,机体存在很多对抗机制,抗氧化应激通路——核因子红系2 p45相关因子2/血红素氧合酶1(Nrf2/HO-1)通路是其中重要的一条。机体内抗氧化应激物质可以通过减少胞质中的Nrf2降解来促进其核内转导,升高下游HO-1的水平,进而发挥抗氧化应激作用。硫辛酸具有极佳的抗氧化性,可以显著增强Nrf2的核内转导及上调HO-1,对多种细胞有保护作用。因其具有良好的脂溶性和水溶性,容易通过血脑屏障,故其对神经元细胞尤其是多巴胺能神经元的保护作用值得探索和期待。
- 张红旭赵星丞刘丽娟刘畅玄明文赵虹曲铮毅
- 关键词：氧化应激硫辛酸帕金森病
- 携带大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)基因重组慢病毒载体的构建及体外表达检测
- 2009年
- 目的构建携带大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)基因重组慢病毒载体,并检测其体外表达目的基因的能力。方法应用基因克隆技术将大鼠BDNF基因克隆入慢病毒载体pFUW中,经过PCR、酶切和测序鉴定后,与包装质粒共转染293T细胞,制备并收集携带BDNF基因的慢病毒,重组病毒感染体外培养Hela细胞,利用实时定量PCR、蛋白质免疫印迹方法检测BDNF的表达情况,观察病毒转染效果。结果PCR、酶切和测序鉴定,成功克隆了pFUW-BDNF重组子。所包装的重组慢病毒对Hela细胞的感染效率>90%,实时定量PCR、蛋白质免疫印迹方法可以检测到重组慢病毒感染Hela细胞后能高水平表达BDNF。结论成功构建了携带BDNF基因慢重组病毒载体,并可在体外高水平表达其所携带的目的基因,为将其进一步应用于神经系统损伤性疾病的治疗研究奠定了方法学基础。
- 张惊宇杨安萍李金星刘路然赵虹杨子超
- 关键词：BDNF慢病毒载体基因治疗
- 哮喘患者CRTH2基因多态性与IL-13表达关系的研究
- 目的探讨前列腺素D2受体CRTH2基因多态性与哮喘发病之间的关系。方法利用PCR技术、分子信标与实时荧光PCR相结合的基因检测技术对45例哮喘患儿及45例健康儿童G1544C,A1651G的基因突变进行分析,同时用ELI...
- 梁红艳赵虹姜晓峰
- 文献传递
- β-连锁蛋白在脑胶质瘤中的表达及其与病理分级的关系研究被引量：1
- 2016年
- 目的分析β-连锁蛋白在脑胶质瘤中的表达,探讨其与病理分级的关系。方法 82份脑胶质瘤标本（脑胶质瘤组）及40份对照标本（对照组）均购自上海锐赛生物技术有限公司,采用免疫组化SP法检测脑胶质瘤组和对照组β-连锁蛋白表达情况。比较脑胶质瘤组与对照组β-连锁蛋白表达阳性率,不同病理分级脑胶质瘤标本β-连锁蛋白表达阳性率,并分析β-连锁蛋白对高级别脑胶质瘤的预测价值。结果β-连锁蛋白主要表达于细胞膜,极少数表达于细胞质。脑胶质瘤组β-连锁蛋白表达阳性率高于对照组（χ-2=11.858,P=0.000）。Ⅰ级与Ⅱ级脑胶质瘤标本β-连锁蛋白表达阳性率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;Ⅲ级及Ⅳ级脑胶质瘤标本β-连锁蛋白表达阳性率高于Ⅰ级、Ⅱ级脑胶质瘤标本,Ⅳ级脑胶质瘤标本β-连锁蛋白表达阳性率高于Ⅲ级脑胶质瘤标本（P〈0.05）。ROC曲线显示,β-连锁蛋白预测高级别脑胶质瘤的AUC为0.742,当β-连锁蛋白阳性细胞百分比≥5%时,其灵敏度为95.7%、特异度为52.8%、阳性预测值为72.1%、阴性预测值为52.8%、准确率为76.8%。结论β-连锁蛋白在脑胶质瘤中呈高表达,其表达水平与脑胶质瘤病理分级有关,可能参与脑胶质瘤的发生和进展,因此下调β-连锁蛋白的表达可能成为治疗脑胶质瘤的新途径。
- 张惊宇张力娜郑永慧孙永奇刘路然赵虹杨子超
- 关键词：神经胶质瘤病理分级
- NMNAT1基因对体外原代培养神经元树突发育的影响
- 2013年
- 目的评价NMNAT1基因对原代培养小鼠神经元树突发育的影响。方法我们在体外建立了原代培养小鼠神经元模型,并通过RNA干扰和基因过表达的方法控制NMNAT1基因的表达水平。应用电穿孔转染,我们上调或下调NMNAT1基因的表达水平,应用免疫细胞化学方法研究神经元树突的形态。在所有的功能试验中,把FK-866(CAS658084-64-1)一种高效的特定的非竞争性NMNAT1抑制剂用作药物学对照。结果在体外原代培养的皮层神经元中下调NMNAT1基因能减缓树突生长和减少树突的数目。结论 NMNAT1基因在原代培养的皮层神经元形态发生中起显著作用,表明NMNAT1基因的丢失可能会引起中枢神经系统神经元变性。
- 赵虹张惊宇车守梅赫丹丹郭朝晖
- 关键词：树突神经系统退行性疾病
- 烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶1基因对原代培养小鼠神经元活力的影响
- 2013年
- 目的评价烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶I（NMNATl）基因对原代培养小鼠神经元活力的影响。方法取原代培养神经元，分成正常对照组、过表达NMNATl慢病毒感染组、RNA干扰慢病毒感染组，后两组分别感染小鼠NMNATl基因的过表达和RNA干扰慢病毒颗粒以上调和下调NMMT1基因的表达水平。应用MTT染色观察各组原代培养小鼠神经元活力的变化。结果与正常对照组原代培养小鼠神经元活力比较，过表达NMNAT1慢病毒感染组神经元的细胞活力显著增强，而RNA干扰慢病毒感染组神经元的细胞活力受到严重干扰，差异有统计学意义（P=0．025．P=0．027）。结论NMNAT1基因在神经元发育过程中起重要作用，其缺失可能导致中枢神经系统的神经退化。
- 赵虹孙冬玲许美玲张惊宇赫丹丹
- 关键词：原代培养神经元
