郑斌
- 作品数:29 被引量:29H指数:3
- 供职机构:浙江省医学科学院更多>>
- 发文基金:浙江省科技计划项目浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- 基于日本血吸虫SEA纳米抗体的胶体金免疫层析技术的初步研究被引量:3
- 2017年
- 为建立基于纳米抗体的检测日本血吸虫感染的胶体金免疫层析技术,将已经通过噬菌体文库筛选得到的两株纳米抗体的质粒,在枯草芽孢杆菌中表达,得到具有活性的抗体蛋白(VHH-48、VHH-52)并以NI-NTA亲合层析纯化。以柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,标记VHH-48和VHH-52抗体蛋白并制备金标垫,分别用日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)和羊抗鼠Ig G作为检测线和质控线,确定抗体蛋白的最佳标记pH和最适蛋白浓度。采用抗体双夹心的方法对两株抗体蛋白进行组合,建立胶体金免疫层析方法。以优化的双夹心抗体组合,组装试纸条,进行了灵敏度的测定和血吸虫病人粪检阳性血清的敏感性评估,以并殖吸虫等其他寄生虫感染的血清测定了试纸条的特异性。结果显示,成功表达并获得了纯度较高的纳米抗体。胶体金标记VHH-48和VHH-52抗体的最适蛋白量为14和10μg/mL,最适pH分别需要加入16和12μL体积的0.2 mol/L K_2CO_3,并确定以VHH-52标金和VHH52划线为最佳的抗体双夹心组合。对可溶性虫卵抗原的最低检测量为3.4 ng/mL,检测血吸虫病人阳性血清的检出率为2.27%,检测其他寄生虫感染血清结果显示出良好的特异性。本文构建了基于日本血吸虫SEA纳米抗体的胶体金免疫层析试纸条方法,为纳米抗体在血吸虫病快速诊断的应用奠定了一定基础。
- 丁豪杰丁建祖孔庆明郑斌楼涤陈睿陆绍红
- 关键词:日本血吸虫虫卵抗原
- 一种抗弓形虫Thioredoxin的纳米抗体及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种抗弓形虫Thioredoxin的纳米抗体及其编码基因和应用,纳米抗体的VHH链氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。所述纳米抗体包括两条VHH链。本发明抗弓形虫TRX纳米抗体由弓形虫TRX抗原免疫骆驼后...
- 陆绍红丁豪杰孔庆明郑斌卓洵辉丁建祖楼涤
- 文献传递
- 一种青蒿琥酯作用日本血吸虫童虫microRNA的检测方法
- 本发明公开了一种青蒿琥酯作用日本血吸虫童虫microRNA的检测方法,通过Solexa高通量测序技术鉴定与青蒿琥酯作用相关的microRNA。本发明首次鉴定了青蒿琥酯作用日本血吸虫童虫的相关microRNA,为深入研究m...
- 孔庆明陈睿童群波楼涤丁建祖郑斌陈晓恒陆绍红
- 文献传递
- 一种用于检测血吸虫的纳米抗体组合物、免疫传感器及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种用于检测血吸虫的纳米抗体组合物、免疫传感器及其制备方法和应用。所述的纳米抗体组合物,包括两种纳米抗体,其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。所述免疫传感器以还原后的氧化石墨...
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- 文献传递
- 基于纳米抗体和石墨烯/金复合材料的免疫传感器检测日本血吸虫循环抗原的研究被引量:2
- 2017年
- 将抗日本血吸虫SEA纳米抗体固定于镀金的石墨烯薄膜上,制备一种新型的阻抗型免疫传感器检测日本血吸虫循环抗原。使用扫描电镜、原子力显微镜和拉曼光谱对石墨烯薄膜及石墨烯/金复合材料进行了表征,并对制备的免疫传感器的特异性和灵敏度进行了测试。结果显示,所制备的免疫传感器具有较好的特异性和灵敏度,与曼氏裂头蚴、刚地弓形虫、颚口线虫、简单异尖线虫、华支睾吸虫和卫氏并殖吸虫抗原没有交叉反应,检测日本血吸虫可溶性虫卵抗原达到0.01 ng/m L水平;血吸虫病患者血清的阳性检出率为66.7%,优于现有试剂盒ELISA法56.7%的检出率,与ELISA的符合率为90%。该免疫传感器检测日本血吸虫循环抗原具有较高的灵敏度和特异性,制作方法简便、快速等优点,具有较好的应用潜能。
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- 关键词:石墨烯免疫传感器
- 猪圆环病毒2型抗原或抗体胶体金快速检测试纸条及方法
- 本发明公开了一种猪圆环病毒2型抗原或抗体胶体金快速检测试纸条及方法。包括PVC板、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫、C线和T线,胶体金试纸条中采用金标蛋白CAP重组蛋白,为去核定位信号的优势抗原表位肽并带有His标签...
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- 文献传递
- 刚地弓形虫免疫逃避相关分子的研究进展被引量:12
- 2012年
- 刚地弓形虫可依赖有效的免疫逃避机制在宿主体内长期生存,造成慢性感染。纳虫泡膜、棒状体和细胞质等所含抗原物质多而复杂,在弓形虫逃避宿主的免疫应答中起重要作用。它们通过抑制过度炎症反应和一氧化氮产生,影响细胞因子基因表达,耗竭特异性免疫反应物质,以及下调免疫细胞功能等方式有效地逃避宿主免疫反应攻击。本文就弓形虫免疫逃避相关分子的最新研究进展作一综述。
- 郑斌陆绍红
- 关键词:刚地弓形虫免疫逃避分子
- 一种针对VSG的伊氏锥虫纳米抗体及其编码序列与应用
- 本发明公开了针对于伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)变异表面糖蛋白(VSG)表位的纳米抗体,同时还公开了编码该纳米抗体的基因序列以及表达该纳米抗体的宿主细胞。通过本发明所公布的纳米抗体基因序列及宿主细胞,该...
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- 文献传递
- 抗日本血吸虫SEA纳米抗体制备与分析
- 利用制备的日本血吸虫虫卵抗原(SEA),免疫健康双峰驼(Bactrian camel),分离其外周血淋巴细胞提取总RNA,利用RT-PCR扩增骆驼重链抗体IgG可变区(VHH)基因片段,将VHH片段与载体pMECS连接后...
- 郑斌陈睿楼涤丁建祖孔庆明童群波付益修陆绍红
- 关键词:日本血吸虫虫卵抗原酶联免疫吸附实验
- 一种抗弓形虫Thioredoxin的纳米抗体及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种抗弓形虫Thioredoxin的纳米抗体及其编码基因和应用,纳米抗体的VHH链氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。所述纳米抗体包括两条VHH链。本发明抗弓形虫TRX纳米抗体由弓形虫TRX抗原免疫骆驼后...
- 陆绍红丁豪杰孔庆明郑斌卓洵辉丁建祖楼涤
- 文献传递