金方圆
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：西北民族大学更多>>
- 发文基金：甘肃省科技支撑计划兰州市科技发展计划项目国家民委科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 兰州大尾羊PPARG基因的克隆和原核表达载体的构建方法
- 本发明通过设计克隆PPARG基因全长cDNA的PCR引物，通过RACE技术，从绵羊尾部脂肪组织克隆绵羊PPARG基因全长cDNA，确定绵羊PPARG基因编码区cDNA序列。将目的基因定向克隆于pET32a原核表达载体中，...
- 徐红伟臧荣鑫杨具田蔡勇柏家林曹忻金方圆达小强
- 文献传递
- 兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因克隆及其同源性比较被引量：5
- 2013年
- 【目的】克隆兰州大尾羊心脏型肪酸结合蛋白(H-FABP)基因全长cDNA序列,为研究绵羊H-FABP生物学作用和生产应用提供理论依据。【方法】根据已知哺乳动物H-FABP基因cDNA序列,设计5'和3'特异引物,运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得兰州大尾羊H-FABP基因全长cDNA序列。【结果】扩增获得兰州大尾羊5'端425 bp、3'端231 bp片段和177 bp中间片段,拼接获得748 bp兰州大尾羊H-FABP基因全长cDNA序列(GenBank登录号:JQ780322)。兰州大尾羊H-FABP基因ORF长402 bp,编码133个氨基酸。核苷酸序列分析显示兰州大尾羊H-FABP基因序列与大多数哺乳动物相似,但其第66位发生的碱基转换(T←→G)引起所编码的第22位天门冬氨酸(N)不同于其它所有物种的赖氨酸(K)。构建的基因进化树分析结果显示兰州大尾羊与山羊亲缘关系最近。预测兰州大尾羊H-FABP蛋白质的空间结构与山羊和牛H-FABP类似,由2个α螺旋和10个反向平行的β折叠组成,10个折叠片围成一个桶状结构,疏水性残基位于桶内,用于结合脂肪酸。【结论】克隆了兰州大尾羊H-FABP基因,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。
- 徐红伟柏家林冯玉兰曹忻蔡勇金方圆达小强杨具田臧荣鑫
- 关键词：兰州大尾羊H-FABP基因CDNA末端快速扩增
- 兰州大尾羊PPARG基因的克隆和原核表达载体的构建方法
- 本发明通过设计克隆PPARG基因全长cDNA的PCR引物，通过RACE技术，从绵羊尾部脂肪组织克隆绵羊PPARG基因全长cDNA，确定绵羊PPARG基因编码区cDNA序列。将目的基因定向克隆于pET32a原核表达载体中，...
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