钟江
- 作品数：102 被引量：356H指数：9
- 供职机构：复旦大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 耐受性CD8^+ NKT细胞体外增殖能力的鉴定
- 2011年
- 目的:利用CFSE标记细胞,流式细胞术(FCM)检测法,解析超抗原SEB活化的耐受性CD8+ NKT细胞在体外增殖的情况。方法:利用CFSE标记新鲜分离的C57BL/J鼠脾细胞,分别与ConA和LPS共同培养3d,收集细胞进行荧光染色并用FCM解析细胞表面CD69分子的表达率和增殖能力。CFSE标记的鼠脾细胞与SEB共培养5d和10d后,荧光染色并用FCM解析细胞表面CD69的百分数和增殖能力。SEB活化的第10天细胞经CFSE标记后在IL-2的协同作用下继续培养10d,荧光染色,FCM解析这群细胞的增殖能力、活性分子CD69的表达率和NKT细胞亚群的变化情况。结果:ConA、LPS和SEB三者均可以刺激小鼠脾细胞增殖。ConA和LPS在3d内可以使细胞增殖3代,且CD69的表达率为74.19%和41.56%;SEB在5d和10d内分别可以使细胞增殖5代和7代,细胞表面CD69的表达率为32.09%和48.66%。SEB活化的10d细胞可以在IL-2的协同下继续传代培养10d,可以增殖7代;这群细胞中CD8+ NKT细胞亚群,由原始的0.36%增加到38.58%;细胞表面CD69分子由正常值的0.11%提高到83.74%。结论:超抗原SEB活化的CD8+ NKT细胞可以在体外进行增殖培养,且这些细胞是活性化的细胞。利用CFSE标记细胞,FCM可以检测耐受性CD8+ NKT细胞在体外的增殖水平。
- 郭业磊陈钰钟江张世仑
- 关键词：CD8+NKT细胞超抗原SEBCFSE
- 不同细胞系对棉铃虫核型多角体病毒复制的受纳性研究被引量：2
- 1993年
- 用棉铃虫单粒包埋型核型多角体病毒(HaSNPV)分别感染棉铃虫细胞SFE-HA8212(HA-8212),草地贪夜蛾细胞(sf)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)3株细胞系,观察了它们对HaSNPV复制的受纳性。结果表明,HA-8212细胞为受纳性类型:感染细胞出现细胞病变;测定感染细胞上清液中病毒TCID_(50)值表明,病毒粒子不断地形成并释放;以HaSNPV的单克隆抗体MAD_7和多克隆抗体检测出感染细胞中有病毒抗原合成;用^(35)S-Met标记显示有10种病毒特异蛋白(ICSP)分期合成;用标记的病毒DNA作探针进行分子杂交显示细胞中有大量病毒特异的核酸合成。CHO细胞为非受纳型:感染细胞生长正常,无病毒粒子或任何病毒生物大分子生成。Sf细胞为半受纳型:感染细胞破碎,仅在一定阶段有病毒特异核酸合成,但无病毒粒子和ICSP形成。文中讨论了研究细胞系对病毒复制的受纳性的应用意义。
- 张菁钟江苏德明
- 关键词：细胞系棉铃虫多角体病毒
- AcMNPV bro基因的表达和作用研究被引量：3
- 2016年
- bro基因(baculovirus repeated orf)是杆状病毒编码的一个独特的基因家族,一些病毒的基因组中编码有多个该基因家族的成员.研究分析了苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)基因组仅有的一个bro基因,结果表明:AcMNPVbro基因(ac-bro)在感染后6h就开始转录,并在8h时检测到BRO表达;ac-bro基因敲除的重组病毒感染后子代病毒的效价略低于野生型病毒,且其DNA复制明显推迟.利用大肠杆菌中重组表达的Ac-BRO蛋白进行的体外实验提示其具有结合DNA的能力.这些结果提示ac-bro基因在病毒的复制中有一定的作用.
- 张楠葛晶周子谦尹隽钟江
- 关键词：杆状病毒DNA结合基因敲除
- 人α干扰素基因在家蚕细胞中的高表达被引量：8
- 1993年
- 用家蚕核多角体病毒(NPV)为载体,使人α干扰素基因正确装配到NPV多角体蛋白基因启动子控制下,构成重组质粒,又与NPVDNA共转染家蚕细胞。反复病毒空斑纯化后,得到重组病毒。重组病毒感染家蚕细胞。
- 张林元邓小昭李淑德刁勇李越希刁振宁钟江东云仙苏德明
- 关键词：干扰素家蚕细胞基因表达
- 博尔纳病病毒与人类神经精神性疾病
- 2005年
- 博尔纳病病毒是一种宿主范围很广的动物病毒,因其可能与人类的某些神经精神性疾病有关而备受重视.但其在人体的感染,致病还存在很多争议.需要通过建立高效灵敏和准确的检测技术进行更加全面的研究,同时对其可能致病机制的分子生物学研究也会有助于澄清有关争议.如果能够确认某些人类的神经精神性疾病与博尔纳病病毒有关,将会极大地帮助人们控制这类危害越来越大的疾病.
- 钟江
- 关键词：神经精神性疾病博尔纳病病毒分子生物学研究动物病毒
- 昆虫细胞中共表达人糖基转移酶对重组蛋白SEAP表达的影响被引量：1
- 2016年
- 杆状病毒-昆虫细胞表达系统有表达量高及蛋白翻译后修饰较完善等特点,但与哺乳动物相比其缺乏几种关键的糖基转移酶.许多研究表明将哺乳动物的糖基转移酶基因转入昆虫细胞中,能使得昆虫细胞表达蛋白的修饰得到有效改善.本研究通过RT-PCR克隆了人Ⅱ型N-乙酰葡萄糖胺转移酶(β-1,2-N-acetylglucosaminyltransferaseⅡ)和Ⅰ型β-1,4-半乳糖基转移酶(β-1,4-galactosyltransferase)基因,并将它们分别插入重组杆状病毒上,获得了表达GnT2和β4GalT1的重组杆状病毒.以具有糖基化修饰位点的人分泌型碱性磷酸酶(Secreted Alkaline Phosphatase,SEAP)为对象,将表达糖基转移酶的重组杆状病毒和表达SEAP的重组杆状病毒共感染细胞,Western blot分析结果表明共感染时所表达的SEAP蛋白条带分子量明显大于其单独表达时的分子量.结果表明重组病毒共感染对杆状病毒-昆虫细胞表达的SEAP有修饰作用.
- 唐巍玲田苗苗黎健蓓钟江
- 关键词：SEAPBAC-TO-BAC
- 乙型肝炎病毒聚合酶基因在重组腺病毒系统中的表达被引量：1
- 2004年
- 乙型肝炎病毒是一种重要的人类病原,乙肝病毒聚合酶在病毒的复制中具有关键作用.拼接了HBV56的聚合酶全长基因,利用重组腺病毒系统,在HEK293细胞中表达乙肝病毒聚合酶.通过一种半定量PCR方法,检测到所表达的蛋白具有逆转录酶活性.这一研究对深入认识该酶结构与功能的关系,研制抑制病毒复制的药物,有一定的意义.
- 杨国尹隽吕佳清钟江
- 关键词：乙型肝炎病毒乙肝病毒HBV病毒复制HEK293细胞
- 凤果花叶病毒上海分离物(Pepino Mosaic Virus,PepMV-Sh)的初步鉴定及其ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2003年
- 对上海市引种的凤果(Solanum muricatum)植株进行的病原物调查发现有较严重的凤果花叶病发生,经研究确认系病毒感染所致。从发病植物中提取得到长度主要为100-250nm,宽度约为10nm的短杆状病毒颗粒,SDS-PAGE电泳显示其外壳蛋白的主成分是20kD的蛋白质,变性琼脂糖凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳分析均得到一RNA条带。经比对,该病毒分离物与原产地的凤果花叶病毒特性有一定的差别,暂定名为凤果花叶病毒上海分离物(Pepino Mosaic Virus,PepMV-Sh),其植物病毒学分类地位待定。用纯化的凤果花叶病毒(PepMV)制备了抗血清,建立了ELISA检测方法,并应用于凤果组培苗及大棚植株中病毒病的检测。
- 张耀良沈中建钟江陆晓莉成功李汝铎
- 关键词：凤果花叶病毒分离物ELISA检测方法
- 马尾松毛虫质型多角体病毒单克隆抗体的制备和应用被引量：2
- 1999年
- 纯化的马尾松毛虫质型多角体病毒（ＤｐＣＰＶ）云南文山株的病毒粒子经ＳＤＳＰＡＧＥ分析，其结构蛋白有１２０ｋｄ、１１６ｋｄ、１１０ｋｄ、６６ｋｄ和３３ｋｄ５个组分，而它的多角体蛋白含３０ｋｄ和２８ｋｄ两个主要组分。以纯化的ＤｐＣＰＶ粒子为抗原制备了２Ｄ５、２Ｄ１０、３Ｄ４和６Ｂ３共４种单克隆抗体，并测定了它们的亚类。制得的单克隆抗体用于ＤｐＣＰＶ的ＥＬＩＳＡ检测。对ＤｐＣＰＶ在棉铃虫卵巢细胞系ＳＦＥＨＡ８２１２和ＳＦＥＨＡ８３１中增殖动态的检测结果表明，ＤｐＣＰＶ感染培养细胞具有释放病毒量小和呈现持续感染等特点。用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法在ＳＦＥＨＡ８３１细胞感染ＤｐＣＰＶ后第１８ｈ检测到病毒抗原的合成。运用所建立的免疫学检测方法，对几批采自ＤｐＣＰＶ防治林区的幼虫样品进行分析，结果表明，该方法适用于对ＤｐＣＰＶ的防治效果及其自然流行进行长时期、大规模的监测。
- 朱光旦林军沈中建钟江陈昌洁
- 关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒单克隆抗体
- 微生物群落结构和多样性研究
- 2006年
- 当前，由于基因组研究技术的发展，微生物学作为生命科学的一门经典学科面临着学科大发展的历史机遇。权威的美国《科学》杂志在2005年年底的1期杂志中预测，微生物学将是2006年有可能取得重要进展的科学领域之一。该杂志表示，随着从诸如土壤、人肠道黏膜这样的复杂样品中提取DNA方法的优化，微生物的难以置信的多样性正在逐渐被人们所认识。2006年，将有大量的有关论文发表，内容将涉及微生物群落进化和分子机制、各种有益或致病性的微生物与其宿主间的关系、微生物种间横向基因转移的细节，
- 钟江
- 关键词：微生物群落结构生命科学微生物学基因组研究论文发表基因转移
