陈乃清
- 作品数：25 被引量：147H指数：8
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- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪核移植重组胚胎的发育能力被引量：8
- 1996年
- 以ＭｃＧｒａｔｈ－Ｓｏｌｔｅｒ（１９８３）提供的去（注）核方法，将猪胚胎的单个卵裂球细胞注入去核的次级成熟卵母细胞，借助电融合的方法（ＡＣ：５Ｖ，１．５ＭＨｚ，１０～１５ｓ；ＤＣ：２ｋＶ／ｃｍ，４０μｓ。电激活／融合液：０．３ｍｏｌ／Ｌ甘露醇＋０．１ｍｍｏｌ／ＬＭｇＳＯ４＋０．１ｍｍｏｌ／ＬＣａＣｌ２＋７．５ｍｇ／ｍＬＣＣＢ）融入受体胞质构成重组胚，体外培养（培养液为改良ＴＣＭ－１９９；培养条件为５％ＣＯ２，９５％空气，３８．５℃，饱和湿度）使之发育。实验结果表明：（１）分离单个卵裂球时，以０．２５％链霉蛋白酶Ｅ消化透明带效果最佳。单个卵裂球获得率可达９１．７％（８８／９６）；（２）核受体以激活后２ｈ的卵母细胞优于未激活的卵母细胞，卵裂率分别为６４．６％（３１／４８）和３４．５％（１９／５５）（Ｐ＜０．０５）；（３）体外成熟卵母细胞与体内成熟卵母细胞在作为核受体时，其重组胚的发育能力无显著差异（分别为５８．７％，６５．６％，Ｐ＞０．０５）；（４）作为核供体的胚胎对于重组胚的发育能力有显著影响。ＭＺＴ（ｍａｔｅｒｎａｌｚｙｇｏｔｅｔｒａｎｓｆｅｒ，母子转变，是指早期胚胎发育由母源控制向合子控制的转折点）以后的?
- 陈乃清赵浩斌苟德明樊俊华魏庆信渊锡藩
- 关键词：猪胚胎核移植电融合胚胎发育
- 玉米kn-1同源盒的高效表达
- 2000年
- 同源盒基因 (homeobox genes)在植物 ,动物 ,真菌的广泛存在说明这种结构在真核生物进化过程中高度保守 ,并暗示其具有重要功能 .本文将玉米 kn- 1同源盒插入表达载体 p GEMΔ Xba ,并将形成的重组克隆p GEMΔ MK转化 BL 2 1(DE3)而获得高效表达 ;表达产物的分子量为 2 9× 10 3,并主要以可溶性蛋白形式存在 .Kn-1,Quox\|1,OSIH- 1间的交叉免疫反应证实三者在蛋白质水平具同源性 .而 Kn- 1同源结构域 (Homeodomain)
- 程兴国陈乃清彭进易清明
- 关键词：基因表达玉米靶基因
- 母牛产犊间隔几个问题被引量：11
- 1992年
- 母牛产犊间隔是指母牛两次分娩之间的间隔天数,又称为胎间距。它能够科学、准确地反映母牛的繁殖力,与奶牛业的经济效益有着密切的联系。奶牛的产犊间隔决定了其终生的繁殖力及终生产奶量,因此已成为奶牛繁殖的一个重要的生物学及经济学综合指标。一、奶牛适宜的产犊间隔时间母牛产犊时间的延长。
- 渊锡藩陈乃清
- 关键词：产犊间隔卵巢机能空怀期孕牛卵巢静止泌乳高峰期
- 猪的超数排卵被引量：17
- 1997年
- 为了获得充足的卵母细胞或胚胎，以满足猪胚胎生物工程研究的需要，对猪的超数排印技术进行了研究。对于7～8月龄的母猪，在发情周期的15～18天，采用国产PMSG（1000IU～1250IU）配合hCG（1000IU～1250IU）肌肉注射，可获得良好的超排效果，平均每头排卵23.9～27.9枚。结果表明，此超排方法是既简便而又有效的母猪超排程序。
- 陈乃清苟德明路兴中赵浩斌魏庆信
- 关键词：超数排卵PMSGHCG
- 成人肝cDNA文库的构建被引量：2
- 1997年
- 用异硫氰酸胍／盐酸胍法从人肝组织中提取ＲＮＡ，通过Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）纤维柱分离出ｍＲＮＡ。以ｍＲＮＡ为模板，含ＮｏｔⅠ接头的Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）为引物，在逆转录酶ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔⅡＲＴ催化下合成单链ｃＤＮＡ（ｓｓｃＤＮＡ），再在Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡ聚合酶Ⅰ与ＲＮａｓｅＨ和ＤＮＡＬｉｇａｓｅ共同作用下，ｓｃＤＮＡ拷贝成双链ｃＤＮＡ（ｄｓｃＤＮＡ）。经放射自显影测定，合成有全长ｃＤＮＡ片段。平末端ｄｓｃＤＮＡ与ＳａｌⅠ接头连接，ＮｏｔⅠ酶切后，通过过柱取掉小于５００ｂｐ的ｃＤＮＡ片段，大片段ｃＤＮＡ与载体ｐＳＰＯＲＴ１连接，转化受体菌ＤＨ５α，经稀释测定出含有重组子的文库大小为３．３×１０６。该文库适合于筛选低丰度ｍＲＮＡ的ｃＤＮＡ克隆。
- 苟德明郑新民陈乃清魏庆信李文鑫路兴中
- 关键词：CDNA文库
- mtDNA多态性分析在动物遗传育种中的应用
- 1996年
- 遗传标记的选择对于研究物种遗传多态现象具有十分重要的意义。早期的研究主要是从形态学标记检测动物群体的遗传特征。随着人类社会的进步,尤其是科学技术的发展,已逐步深入到认识白细胞抗原型、蛋白质多态性这样一些遗传标记。然而,所有上述的标记方法,对环境的变化非常敏感,均不能完全反映遗传物质——DNA水平上的差异。 有鉴于此,直接从DNA分子水平研究遗传标记是十分必要的。
- 王智新苟德明陈乃清
- 关键词：MTDNA多态性动物育种
- 电脉冲激活猪卵母细胞的研究被引量：5
- 1999年
- 通过对猪卵母细胞的电激活进行系统研究，结果表明：对于体外成熟卵母细胞，电场强度为 １ ２５０ Ｖ／ｃｍ ，脉冲时程为４０、６０ μｓ时，效果较好，一次脉冲激活率可达８５．３％ 和８７．１％ ；而对于体内成熟卵母细胞，电场强度为１ ５００ Ｖ／ｃｍ ，脉冲时程为４０、６０ μｓ 时，效果较好，一次脉冲激活率达８５．７％ 和８８．２％ ；增加脉冲次数并不能显著提高激活率，反而使卵母细胞裂解率显著增加；激活液选用０．３ ｍ ｏｌ／ Ｌ甘露醇（含０．１ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｍｇ Ｓ Ｏ４ ）时，添加 ０．１ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｃａ Ｃｌ２ ，获得较好的激活率（８７．８％ ）电脉冲激活卵母细胞后进一步培养。
- 陈乃清赵浩斌
- 关键词：卵母细胞
- 卵母细胞的卵龄对猪核移植效率的影响
- 1999年
- 对核移植中，猪卵母细胞的卵龄对核移植效率的影响进行了研究结果表明：体外成熟培养 ４８ ｈ 的猪卵母细胞最适合作为核受体，其激活率达 ７８．３％ ，并无裂解；去核率高达９０％ ；在作为核受体进行核移植时，融合率为７５％ ；重构胚胎的卵裂率为６４．６％ 卵龄进一步增大，激活率略有增加，但去核率。
- 陈乃清赵浩斌
- 关键词：核移植卵母细胞
- 猪2-细胞胚胎电融合被引量：1
- 1998年
- 以湖北白猪为试验动物 ,研究了不同处理对猪 2 细胞胚胎电融合的影响 ,结果表明 :融合液的离子强度、电场强度、脉冲时程和交流电处理等均影响电融合的效率 ,以非电解质的甘露醇溶液为融合液 ,融合前交流脉冲处理 ,直流电场强度为 150 0～ 2 0 0 0V/cm和脉冲时程为 4 0～ 60 μs时可获得较高的融合效率。
- 赵浩斌陈乃清魏庆信
- 关键词：电融合胚胎细胞融合
- 小鼠2-细胞期胚胎细胞电融合的研究被引量：2
- 2000年
- 为了探索核移植克隆动物技术中的细胞融合参数 ,进行了小鼠 2 -细胞期胚胎细胞的电融合试验 .直流电场强度为 2 k V/ cm,脉冲时程 40 μs时 ,效果较好 ,可以获得 70 .5 %的融合率和 6 4.5 %的发育率 ,进一步提高电场强度 ,裂解死亡率也明显提高 ;采用非电解质溶液 (甘露醇 )作为融合液时 ,胚胎细胞的融合率与融合胚的发育均优于电解质融合液 (DPBS) ;在直流电脉冲之前 ,施加交流电脉冲是必要的 ,可以显著提高融合率 (P<0 .0 5 ) .
- 陈乃清赵浩斌
- 关键词：电融合胚胎细胞小鼠胚胎发育
